用shRNA有效干扰家蚕CREB基因表达的方法

    公开(公告)号:CN103757052A

    公开(公告)日:2014-04-30

    申请号:CN201410000451.5

    申请日:2014-01-02

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种有效干扰家蚕CREB基因表达的方法。该方法的具体步骤为:将干扰家蚕CREB基因表达的靶序列与家蚕的U6启动子插入pMD18T载体,构建适合在家蚕中表达的pMD18T-U6-shRNA质粒,将该质粒用脂质体转染方法转染家蚕卵巢细胞系(BmN)71~73小时后,用Westernblot方法检测CREB蛋白表达量。用CREB基因的5’-GGTGCAGTCTGTTATTCAACCT-3’构建的shRNA干扰质粒能使的家蚕CREB蛋白的表达量下降50%以上。发明从技术层面为利用shRNA方法下调CREB基因表达提供了有效的靶点。

    佛司可林的新用途
    3.
    发明公开

    公开(公告)号:CN105613437A

    公开(公告)日:2016-06-01

    申请号:CN201511004325.8

    申请日:2015-12-29

    Applicant: 上海大学

    CPC classification number: A01K67/04

    Abstract: 本发明涉及一种佛司可林(Forskolin)的新用途。本发明内容包括:用佛司可林注射非滞育的家蚕二化性品种(大造)有效诱导产出滞育卵的方法;佛司可林作为腺苷酸环化酶的激活剂,激活了家蚕CREB的表达。本发明揭示了佛司可林可以在幼虫阶段通过提高CREB的表达诱导家蚕卵的滞育性改变。

    家蚕生殖腺特异表达的启动子及其捕获方法

    公开(公告)号:CN106947761A

    公开(公告)日:2017-07-14

    申请号:CN201710075992.8

    申请日:2017-02-13

    Applicant: 上海大学

    Inventor: 宋红生 陈容梅

    Abstract: 一种家蚕生殖腺特异表达的启动子及其捕获方法。该启动子为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示的碱基序列。突破传统的转基因家蚕的遗传稳定性不高和生殖腺特异启动子缺乏的障碍,首次开发和利用家蚕Nosp启动子,利用细胞转染和转基因技术分别在家蚕细胞系和活体中表达外源基因,成功的实现了外源基因在生殖腺中特异表达。该启动子的获得不仅解决了家蚕生殖腺特异启动子缺乏的问题,也进一步推动了家蚕基因组编辑技术的发展;从应用的角度来看,首先它使得转基因家蚕的遗传稳定性得以保持;其次,在害虫的遗传控制中,也可以利用该启动子的组织特异性来寻找一种对环境友好的害虫防治新方法;最后,它也为蚕丝产业的发展奠定了一定的基础。

    家蚕生殖腺特异表达的启动子及其捕获方法

    公开(公告)号:CN106947761B

    公开(公告)日:2020-05-19

    申请号:CN201710075992.8

    申请日:2017-02-13

    Applicant: 上海大学

    Inventor: 宋红生 陈容梅

    Abstract: 一种家蚕生殖腺特异表达的启动子及其捕获方法。该启动子为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示的碱基序列。突破传统的转基因家蚕的遗传稳定性不高和生殖腺特异启动子缺乏的障碍,首次开发和利用家蚕Nosp启动子,利用细胞转染和转基因技术分别在家蚕细胞系和活体中表达外源基因,成功的实现了外源基因在生殖腺中特异表达。该启动子的获得不仅解决了家蚕生殖腺特异启动子缺乏的问题,也进一步推动了家蚕基因组编辑技术的发展;从应用的角度来看,首先它使得转基因家蚕的遗传稳定性得以保持;其次,在害虫的遗传控制中,也可以利用该启动子的组织特异性来寻找一种对环境友好的害虫防治新方法;最后,它也为蚕丝产业的发展奠定了一定的基础。

    蚕电压门控钠通道基因、编码蛋白及其克隆方法

    公开(公告)号:CN101386853A

    公开(公告)日:2009-03-18

    申请号:CN200810201959.6

    申请日:2008-10-30

    Applicant: 上海大学

    Inventor: 宋红生 沈欣 孙悦

    Abstract: 本发明涉及一种家蚕(大造)的电压门控钠通道基因、编码蛋白及其克隆方法。本发明的一种电压门控钠通道基因具有SEQ NO 1所示的DNA序列。该电压门控钠通道基因的编码蛋白具有SEQ NO 2所示的氨基酸序列。该电压门控钠通道基因的克隆方法的具体步骤为:首先从家蚕的脑中提取总RNA;然后用Superscript II反转录酶和Oligo-(dT)引物合成cDNA;借鉴昆虫Para钠通道的保守氨基酸序列和家蚕基因组序列设计PCR引物,采用PCR的方法,得到各片段的克隆并测序;把各片段拼接得到家蚕钠通道基因的序列。本发明利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和PCR方法,得到家蚕钠通道基因的序列和完整的开放阅读框。利用所克隆出来的核苷酸推定的编码蛋白,与其他已克隆的钠通道蛋白序列作比对,进行结构分析。

Patent Agency Ranking