公开(公告)号：CN103399151A

公开(公告)日：2013-11-20

申请号：CN201310254499.4

申请日：2013-06-24

Applicant: 上海交通大学医学院附属瑞金医院

Inventor： 宁光 ,  方微园 ,  李小英 ,  叶蕾

IPC: G01N33/574 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明涉及医药技术领域，特别涉及CXCL8细胞因子检测试剂在制备甲状腺乳头状癌的诊断试剂中的应用。将甲状腺乳头状癌标本中，分离和培养出原代肿瘤巨噬细胞，根据巨噬细胞通过分泌的细胞因子作用于肿瘤细胞的假设，对从PTC中分离的原代TAM进行了培养、收集获得其培养上清，将其刺激甲状腺乳头状癌细胞株，实验证明：TAM可促进甲状腺乳头状癌细胞的生长，随后将甲状腺乳头状癌细胞株、正常人PBMC和TAM等进行了检测，实验证明：在TAM中CXCL8高表达，所以，将CXCL8细胞因子应用在制备甲状腺乳头状癌的诊断试剂中，可以提高甲状腺乳头状癌的诊断率，避免甲状腺乳头状癌患者错过最佳的治疗时间。

公开(公告)号：CN103361312A

公开(公告)日：2013-10-23

申请号：CN201310254122.9

申请日：2013-06-24

Applicant: 上海交通大学医学院附属瑞金医院

Inventor： 宁光 ,  方微园 ,  李小英 ,  叶蕾

IPC: C12N5/0786

Abstract: 本发明一种细胞的分离技术，特别涉及一种甲状腺乳头状癌组织中巨噬细胞的分离方法，分离步骤为：将采集到的甲状腺乳头状癌组织置于D-hanks液中、冲洗，弃D-hanks液、去除结缔组织，并将甲状腺乳头状癌组织剪成块状；在块状组织中加入Ⅱ型胶原酶，在35℃-40℃温度下消化反应1-3小时，加入含有10%胎牛血清的1640培养基终止消化反应，过滤、离心、弃上清；将细胞液用1640培养基重悬、铺板，置于5%CO2的细胞培养箱中孵育，用PBS充分洗涤；将得到的贴壁细胞在培养，收集上清液，冷冻保存。分离的巨噬细胞呈圆形，可紧密贴壁于培养皿中，CD68染色阳性，阳性率高达95%以上，证实分离巨噬细胞成功。