公开(公告)号：CN103394073A

公开(公告)日：2013-11-20

申请号：CN201310300308.3

申请日：2013-07-17

Applicant: 上海交通大学医学院附属瑞金医院

Inventor： 宁光 ,  张晓燕 ,  杨颖

IPC: A61K38/02 ,  A61P3/04 ,  A61P3/00

Abstract: 本发明属于医药制备领域，特别涉及围脂滴蛋白在制备抑制脂肪细胞自噬和治疗脂质代谢紊乱药物中的应用，本研究采用对脂肪细胞自噬具有抑制作用的小檗碱和Perilipin进行检测，结果表明自噬促进Perilipin的降解；采用自噬激动剂ABT737来观察Perilipin的降解，经ABT737激活自噬后，Perilipin的表达明显减少；经过小檗碱处理后，与单独的ABT737组比，小檗碱与ABT737共同处理组的Perilipin表达增多。所以，Perilipin对脂肪细胞自噬有抑制作用，Perilipin含量的减少促进脂肪分解，导致整个机体能量代谢的紊乱，这为脂质代谢紊乱治疗提供了新的研究方向。

公开(公告)号：CN103393679A

公开(公告)日：2013-11-20

申请号：CN201310254448.1

申请日：2013-06-24

Applicant: 上海交通大学医学院附属瑞金医院

Inventor： 宁光 ,  张晓燕 ,  杨颖

IPC: A61K31/4375 ,  A61P3/04 ,  A61P3/10 ,  A61P9/00 ,  A61P9/12

Abstract: 本发明属于医药制备领域，特别涉及小檗碱在制备抑制皮下脂肪和内脏脂肪细胞自噬药物中的应用。本发明以高脂喂养的小鼠为实验对象，测试小檗碱是否抑制小鼠的皮下脂肪和内脏脂肪细胞的自噬。具体为，高脂喂养C57BL/6小鼠12周后，分为高脂组和小檗碱组，继续高脂饮食并用小檗碱灌胃，一天一次，持续4周。Western Blot检测自噬相关蛋白变化，Real-time PCR检测其相应mRNA水平变化。结果表明：高脂喂养下，小鼠的皮下及内脏脂肪组织自噬增加，而小檗碱能有效抑制高脂喂养小鼠的皮下脂肪和内脏脂肪的自噬，为临床上更合理的将小檗碱用于肥胖症的治疗提供了实验数据和理论依据。

公开(公告)号：CN103361307A

公开(公告)日：2013-10-23

申请号：CN201310254446.2

申请日：2013-06-24

Applicant: 上海交通大学医学院附属瑞金医院

Inventor： 宁光 ,  张晓燕 ,  杨颖

IPC: C12N5/077 ,  C12N5/0735

Abstract: 本发明涉及细胞的诱导分化方法，特别涉及一种C3H10T1/2中胚层多潜能胚胎干细胞株的诱导分化方法，其步骤包括：将C3H10T1/2细胞培养于培养液中培养，细胞达80％-90％融合后加入0.25%胰酶5mL消化，细胞收缩呈圆形时终止胰酶消化反应，离心3-5分钟、沉淀、弃去上清，再加入培养液后吹打；按1：4比例传代培养到6孔板或12孔板培养，每2-4天更换培养液1次；待培养板上的细胞长满后置于诱导液A中，2天后撤去诱导液A换成诱导液B，2天后撤去诱导液B换成培养液，每2-4天更换培养液1次即可。本发明诱导分化成的脂肪细胞，可很好地运用到后续的实验中。

公开(公告)号：CN103356611A

公开(公告)日：2013-10-23

申请号：CN201310254471.0

申请日：2013-06-24

Applicant: 上海交通大学医学院附属瑞金医院

Inventor： 宁光 ,  张晓燕 ,  杨颖

IPC: A61K31/4375 ,  A61P3/04

Abstract: 本发明属于医药制备领域，特别涉及小檗碱在制备抑制脂肪细胞自噬药物及制备治疗肥胖症药物中的应用。本发明现将C3H10T1/2细胞进行培养及诱导分化成熟脂肪细胞，然后通过小檗碱对成熟的C3H10T1/2脂肪细胞自噬标志蛋白LC3及自噬底物P62的影响测试、溶酶体抑制剂氯喹检测C3H10T1/2脂肪自噬通量变化测试和透射电镜观察自噬体数量变化情况，通过各项测试结果显示，小檗碱能有效地抑制C3H10T1/2脂肪细胞自噬，为临床上能更合理的将小檗碱应用于肥胖患者的治疗提供了理论依据，同时小檗碱也能应用在抑制脂肪细胞自噬药物的制备中。

公开(公告)号：CN103361307B

公开(公告)日：2015-07-29

申请号：CN201310254446.2

申请日：2013-06-24

Applicant: 上海交通大学医学院附属瑞金医院

Inventor： 宁光 ,  张晓燕 ,  杨颖

IPC: C12N5/077 ,  C12N5/0735

Abstract: 本发明涉及细胞的诱导分化方法，特别涉及一种C3H10T1/2中胚层多潜能胚胎干细胞株的诱导分化方法，其步骤包括：将C3H10T1/2细胞培养于培养液中培养，细胞达80％-90％融合后加入0.25%胰酶5mL消化，细胞收缩呈圆形时终止胰酶消化反应，离心3-5分钟、沉淀、弃去上清，再加入培养液后吹打；按1：4比例传代培养到6孔板或12孔板培养，每2-4天更换培养液1次；待培养板上的细胞长满后置于诱导液A中，2天后撤去诱导液A换成诱导液B，2天后撤去诱导液B换成培养液，每2-4天更换培养液1次即可。本发明诱导分化成的脂肪细胞，可很好地运用到后续的实验中。