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公开(公告)号:CN108753809A
公开(公告)日:2018-11-06
申请号:CN201810573421.1
申请日:2018-06-06
Applicant: 上海交通大学
CPC classification number: C12N15/74 , C12N9/1029 , C12N9/16 , C12P7/40 , C12P7/6418 , C12Y301/02
Abstract: 本发明公开了一种高效表达脂肪酸的重组蓝藻及其制备方法,涉及脂肪酸生产领域。通过构建提高蓝藻脂肪酸表达量的质粒并转化获得重组蓝藻,该重组蓝藻过表达前脂蛋白二脂酰转移酶Lgt和硫酯酶AcTesA。前脂蛋白二脂酰转移酶Lgt是一种支架蛋白,在蓝藻膜导向序列的作用下定位于细胞膜。硫酯酶AcTesA通过柔性肽FL3与支架蛋白Lgt相连,硫酯酶蛋白AcTesA具有低底物特异性,可以水解C8-C16的酰基ACP,能获得种类丰富的脂肪酸产物。本发明通过支架蛋白Lgt将硫酯酶蛋白AcTesA的固定在细胞膜上,加快了蓝藻细胞中脂肪酸合成速度,降低了细胞中的ROS含量,最终提高了转基因突变株分泌至细胞外的脂肪酸产量。
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公开(公告)号:CN102337285A
公开(公告)日:2012-02-01
申请号:CN201110326935.5
申请日:2011-10-25
Applicant: 上海交通大学医学院附属仁济医院
Abstract: 本发明公开了一种含HIhh的逆转录病毒载体和病毒颗粒及其应用。所述的含HIhh的逆转录病毒载体是将XhoI与NotI双酶切重组载体pCIG-HIhh-IRES-EGFP获得的含HIhh片段,与XhoI与NotI双酶切逆转录病毒载体pSFG获得的大片段连接,经转化,酶切鉴定,测序制备得到的,所述的含HIhh的逆转录病毒颗粒是通过含HIhh的逆转录病毒载体转染包装细胞系293GPG制备的。本发明还涉及上述逆转录病毒载体和逆转录病毒颗粒在制备治疗骨缺陷药物中的应用。本发明的优点在于为骨组织工程解决早期血管化问题提供了一种新方法,为治疗骨缺陷疾病提供了一种新途径。
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公开(公告)号:CN103014027A
公开(公告)日:2013-04-03
申请号:CN201210489352.9
申请日:2012-11-26
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种优化大肠杆菌脂肪酸合成途径的方法,在构建大肠杆菌脂肪酸代谢途径关键蛋白FabG、FabZ、FabI、TesA’的步骤中,将不同数量的大肠杆菌稀有密码子AGG分别插入所述大肠杆菌脂肪酸代谢途径关键基因FabG、FabZ、FabI和TesA’中。本发明的方法可以在生物体内对基因表达进行精确地调控,进而优化相应代谢途径,采用本发明方法构建的大肠杆菌生产脂肪酸系统可以高效地生产胞外脂肪酸,其脂肪酸产量约为无稀有密码子AGG的非调控系统的两倍。
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公开(公告)号:CN108753809B
公开(公告)日:2021-08-17
申请号:CN201810573421.1
申请日:2018-06-06
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种高效表达脂肪酸的重组蓝藻及其制备方法,涉及脂肪酸生产领域。通过构建提高蓝藻脂肪酸表达量的质粒并转化获得重组蓝藻,该重组蓝藻过表达前脂蛋白二脂酰转移酶Lgt和硫酯酶AcTesA。前脂蛋白二脂酰转移酶Lgt是一种支架蛋白,在蓝藻膜导向序列的作用下定位于细胞膜。硫酯酶AcTesA通过柔性肽FL3与支架蛋白Lgt相连,硫酯酶蛋白AcTesA具有低底物特异性,可以水解C8-C16的酰基ACP,能获得种类丰富的脂肪酸产物。本发明通过支架蛋白Lgt将硫酯酶蛋白AcTesA的固定在细胞膜上,加快了蓝藻细胞中脂肪酸合成速度,降低了细胞中的ROS含量,最终提高了转基因突变株分泌至细胞外的脂肪酸产量。
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公开(公告)号:CN109651513A
公开(公告)日:2019-04-19
申请号:CN201910058956.X
申请日:2019-01-22
Applicant: 上海交通大学
Inventor: 马钢 , 王毓舒 , 洪艺瑞 , 梁智涵 , 孙诗语 , 郑书钰 , 方清伟 , 冉运聪 , 刘致祥 , 萧家宜 , 钟博子韬 , 何沛祥 , 张凯然 , 夏若瑜 , 吴蔚文 , 姚宽 , 贺林
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N15/65 , C12N1/21 , A61K47/68 , A61K47/42 , A61K49/00 , A61P35/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种重组融合蛋白,涉及基因工程技术领域,包括冰核蛋白N端结构域和T抗原结合短肽。其中,冰核蛋白N端结构域提供细菌表面锚定功能,能够使融合蛋白锚定和展示在细胞表面;T抗原结合短肽是一段能够与肠道肿瘤细胞表面T抗原特异性结合的寡肽。本发明将T抗原结合短肽以融合蛋白方式展示于细菌表面。这一策略可实现细菌对肠道肿瘤的特异性识别,解决了现有肠道探查与检测技术必须侵入体内的局限,为进一步研制用于肠道肿瘤早期诊断和治疗的靶向药物奠定了基础。
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公开(公告)号:CN102899281A
公开(公告)日:2013-01-30
申请号:CN201210376058.7
申请日:2012-09-28
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌高效生产脂肪酸的系统及其构建方法和应用。本发明提供的大肠杆菌高效生产脂肪酸的系统的构建方法是,构建大肠杆菌脂肪酸代谢途径关键蛋白FabI、FabG、FabZ、TesA与膜蛋白Lgt、二聚体蛋白GBD Domain、GBD Ligand、SH3Domain、SH3Ligand的融合蛋白,将该系列蛋白在大肠杆菌中共表达使其定位并聚集于细胞膜上,利用该系统进行发酵培养可使大肠杆菌菌体以及培养基中的棕榈酸(C-16)产量及总脂肪酸产量相较于野生型大肠杆菌有显著提高。
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公开(公告)号:CN115561451A
公开(公告)日:2023-01-03
申请号:CN202211288249.8
申请日:2022-10-20
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/543 , G01N33/558 , C12N15/11 , C12N15/52 , G16B15/30 , G16B25/20
Abstract: 本发明公开了一种基于计算机辅助设计的侧流层析检测试纸,所述检测试纸的试纸条包括背衬层,在背衬层上,从一端到另一端依次部分重叠设置样品垫、结合垫、色谱膜和吸收垫,所述检测试纸基于配体酶对样品进行识别,优选地采用胶体金层析,通过基于二级结构预测的计算机辅助设计对配体酶的两端设计RNA接头探针,胶体金和色谱膜上的生物素均偶联能够分别与配体酶两端的RNA接头探针互补的寡核苷酸序列,以此实现样品的侧流层析检测,本发明的层析检测试纸条高效快捷,可以简化筛选流程,减少探针反复优化设计的次数,降低产品差异性,提高试纸平台的通用性,并相对于现有方案提高检测灵敏度。
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公开(公告)号:CN109651513B
公开(公告)日:2021-08-31
申请号:CN201910058956.X
申请日:2019-01-22
Applicant: 上海交通大学
Inventor: 马钢 , 王毓舒 , 洪艺瑞 , 梁智涵 , 孙诗语 , 郑书钰 , 方清伟 , 冉运聪 , 刘致祥 , 萧家宜 , 钟博子韬 , 何沛祥 , 张凯然 , 夏若瑜 , 吴蔚文 , 姚宽 , 贺林
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N15/65 , C12N1/21 , A61K47/68 , A61K47/42 , A61K49/00 , A61P35/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种重组融合蛋白,涉及基因工程技术领域,包括冰核蛋白N端结构域和T抗原结合短肽。其中,冰核蛋白N端结构域提供细菌表面锚定功能,能够使融合蛋白锚定和展示在细胞表面;T抗原结合短肽是一段能够与肠道肿瘤细胞表面T抗原特异性结合的寡肽。本发明将T抗原结合短肽以融合蛋白方式展示于细菌表面。这一策略可实现细菌对肠道肿瘤的特异性识别,解决了现有肠道探查与检测技术必须侵入体内的局限,为进一步研制用于肠道肿瘤早期诊断和治疗的靶向药物奠定了基础。
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公开(公告)号:CN103014027B
公开(公告)日:2014-12-10
申请号:CN201210489352.9
申请日:2012-11-26
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种优化大肠杆菌脂肪酸合成途径的方法,在构建大肠杆菌脂肪酸代谢途径关键蛋白FabG、FabZ、FabI、TesA’的步骤中,将不同数量的大肠杆菌稀有密码子AGG分别插入所述大肠杆菌脂肪酸代谢途径关键基因FabG、FabZ、FabI和TesA’中。本发明的方法可以在生物体内对基因表达进行精确地调控,进而优化相应代谢途径,采用本发明方法构建的大肠杆菌生产脂肪酸系统可以高效地生产胞外脂肪酸,其脂肪酸产量约为无稀有密码子AGG的非调控系统的两倍。
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公开(公告)号:CN102899281B
公开(公告)日:2014-10-15
申请号:CN201210376058.7
申请日:2012-09-28
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌高效生产脂肪酸的系统及其构建方法和应用。本发明提供的大肠杆菌高效生产脂肪酸的系统的构建方法是,构建大肠杆菌脂肪酸代谢途径关键蛋白FabI、FabG、FabZ、TesA与膜蛋白Lgt、二聚体蛋白GBD Domain、GBD Ligand、SH3Domain、SH3Ligand的融合蛋白,将该系列蛋白在大肠杆菌中共表达使其定位并聚集于细胞膜上,利用该系统进行发酵培养可使大肠杆菌菌体以及培养基中的棕榈酸(C-16)产量及总脂肪酸产量相较于野生型大肠杆菌有显著提高。
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