公开(公告)号：CN108753809A

公开(公告)日：2018-11-06

申请号：CN201810573421.1

申请日：2018-06-06

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 马钢 ,  莎加·阿夫林 ,  王毓舒 ,  贺林

IPC: C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12P7/40 ,  C12P7/64 ,  C12N9/16 ,  C12N9/10 ,  C12R1/01

CPC classification number: C12N15/74 ,  C12N9/1029 ,  C12N9/16 ,  C12P7/40 ,  C12P7/6418 ,  C12Y301/02

Abstract: 本发明公开了一种高效表达脂肪酸的重组蓝藻及其制备方法，涉及脂肪酸生产领域。通过构建提高蓝藻脂肪酸表达量的质粒并转化获得重组蓝藻，该重组蓝藻过表达前脂蛋白二脂酰转移酶Lgt和硫酯酶AcTesA。前脂蛋白二脂酰转移酶Lgt是一种支架蛋白，在蓝藻膜导向序列的作用下定位于细胞膜。硫酯酶AcTesA通过柔性肽FL3与支架蛋白Lgt相连，硫酯酶蛋白AcTesA具有低底物特异性，可以水解C8－C16的酰基ACP，能获得种类丰富的脂肪酸产物。本发明通过支架蛋白Lgt将硫酯酶蛋白AcTesA的固定在细胞膜上，加快了蓝藻细胞中脂肪酸合成速度，降低了细胞中的ROS含量，最终提高了转基因突变株分泌至细胞外的脂肪酸产量。

公开(公告)号：CN108753809B

公开(公告)日：2021-08-17

申请号：CN201810573421.1

申请日：2018-06-06

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 马钢 ,  莎加·阿夫林 ,  王毓舒 ,  贺林

IPC: C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12P7/40 ,  C12P7/64 ,  C12N9/16 ,  C12N9/10 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种高效表达脂肪酸的重组蓝藻及其制备方法，涉及脂肪酸生产领域。通过构建提高蓝藻脂肪酸表达量的质粒并转化获得重组蓝藻，该重组蓝藻过表达前脂蛋白二脂酰转移酶Lgt和硫酯酶AcTesA。前脂蛋白二脂酰转移酶Lgt是一种支架蛋白，在蓝藻膜导向序列的作用下定位于细胞膜。硫酯酶AcTesA通过柔性肽FL3与支架蛋白Lgt相连，硫酯酶蛋白AcTesA具有低底物特异性，可以水解C8－C16的酰基ACP，能获得种类丰富的脂肪酸产物。本发明通过支架蛋白Lgt将硫酯酶蛋白AcTesA的固定在细胞膜上，加快了蓝藻细胞中脂肪酸合成速度，降低了细胞中的ROS含量，最终提高了转基因突变株分泌至细胞外的脂肪酸产量。