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公开(公告)号：CN103756917A
公开(公告)日：2014-04-30
申请号：CN201410016834.1
申请日：2014-01-14
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N1/14
Abstract: 本发明提供了一种楸树内生真菌的原生质体的制备方法；所述方法包括以下步骤：步骤1，菌丝体的制备；步骤2，原生质体的制备；步骤3，原生质体纯化；步骤4，原生质体再生。本发明所述方法制备的原生质体数量较多，可达到6×107个/毫克菌丝，获得的原生质体的活力较高，再生率可达到1.2%。本发明选择培养12-24h的菌丝体，真菌处于快速生长期，生长快，细胞壁易于酶的裂解，释放出的原生质体的数量多，不易裂解，活力高。本发明选取5～30mg/ml？Glucanex复合酶作为细胞壁裂解酶液，裂解效率高，原生质体释放数量多。本发明选用KCl或NaCl作为渗透压稳定剂，保证了原生质体制备数量与原生质体的稳定。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102660493B
公开(公告)日：2013-11-20
申请号：CN201210106705.2
申请日：2012-04-12
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种木霉菌产孢培养基及产孢方法。该木霉菌产孢培养基由果糖、木糖和一种基本培养基(酵母提取物、酒石酸铵、硝酸铵、磷酸二氢钾、七水合硫酸镁、氯化钠、二水合氯化钙、七水合硫酸亚铁、乙二胺四乙酸二钠和水)组成。分别以果糖和木糖为碳源，以酒石酸铵和酵母提取物为氮源；加入的无机盐具有构成微生物细胞的组成成分，并具有调节酶活性及细胞的渗透压、氢离子浓度和氧化还原电位等功能；其中的磷酸氢盐调节培养基的酸碱度，维持该菌生长的最适pH值；满足了该菌的生长需要。本发明的产孢方法为22～28℃，光照培养。本发明的胡桃球内生真菌木霉菌产孢培养基培养五天产孢量可达到7.4×107个孢子/毫升培养基。
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公开(公告)号：CN103333166A
公开(公告)日：2013-10-02
申请号：CN201310261417.9
申请日：2013-06-26
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07D461/00
Abstract: 本发明公开了一种利用固体酸碱催化合成长春西汀的方法，所述方法包括如下步骤：步骤1，固体碱水解：将长春胺乙醇溶液送入固体碱水解柱中，进行水解反应；步骤2，分子筛脱水：将水解后的长春胺乙醇溶液通过分子筛脱水柱，进行脱水反应；步骤3，固体酸脱水酯化：脱水后的料液进入固体酸脱水酯化柱，进行固体酸脱水酯化，即可。本发明采用强碱代替氢氧化钠催化长春胺水解，固体强酸代替浓硫酸进行脱水、酯化得到长春西汀，本方法所用催化剂可以和产物方便的分离，降低生产成本；本发明方法生产过程中不产生酸碱废水，环保性好，更适于工业化生产；可重复使用，有效的降低生产成本，所用固体酸碱对设备无腐蚀，不产生酸碱废水，绿色环保。
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公开(公告)号：CN103333166B
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201310261417.9
申请日：2013-06-26
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07D461/00
Abstract: 本发明公开了一种利用固体酸碱催化合成长春西汀的方法，所述方法包括如下步骤：步骤1，固体碱水解：将长春胺乙醇溶液送入固体碱水解柱中，进行水解反应；步骤2，分子筛脱水：将水解后的长春胺乙醇溶液通过分子筛脱水柱，进行脱水反应；步骤3，固体酸脱水酯化：脱水后的料液进入固体酸脱水酯化柱，进行固体酸脱水酯化，即可。本发明采用强碱代替氢氧化钠催化长春胺水解，固体强酸代替浓硫酸进行脱水、酯化得到长春西汀，本方法所用催化剂可以和产物方便的分离，降低生产成本；本发明方法生产过程中不产生酸碱废水，环保性好，更适于工业化生产；可重复使用，有效的降低生产成本，所用固体酸碱对设备无腐蚀，不产生酸碱废水，绿色环保。
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公开(公告)号：CN103756917B
公开(公告)日：2016-05-04
申请号：CN201410016834.1
申请日：2014-01-14
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N1/14
Abstract: 本发明提供了一种楸树内生真菌的原生质体的制备方法；所述方法包括以下步骤：步骤1，菌丝体的制备；步骤2，原生质体的制备；步骤3，原生质体纯化；步骤4，原生质体再生。本发明所述方法制备的原生质体数量较多，可达到6×107个/毫克菌丝，获得的原生质体的活力较高，再生率可达到1.2%。本发明选择培养12-24h的菌丝体，真菌处于快速生长期，生长快，细胞壁易于酶的裂解，释放出的原生质体的数量多，不易裂解，活力高。本发明选取5～30mg/ml Glucanex复合酶作为细胞壁裂解酶液，裂解效率高，原生质体释放数量多。本发明选用KCl或NaCl作为渗透压稳定剂，保证了原生质体制备数量与原生质体的稳定。
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公开(公告)号：CN102660493A
公开(公告)日：2012-09-12
申请号：CN201210106705.2
申请日：2012-04-12
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种木霉菌产孢培养基及产孢方法。该木霉菌产孢培养基由果糖、木糖和一种基本培养基(酵母提取物、酒石酸铵、硝酸铵、磷酸二氢钾、七水合硫酸镁、氯化钠、二水合氯化钙、七水合硫酸亚铁、乙二胺四乙酸二钠和水)组成。分别以果糖和木糖为碳源，以酒石酸铵和酵母提取物为氮源；加入的无机盐具有构成微生物细胞的组成成分，并具有调节酶活性及细胞的渗透压、氢离子浓度和氧化还原电位等功能；其中的磷酸氢盐调节培养基的酸碱度，维持该菌生长的最适pH值；满足了该菌的生长需要。本发明的产孢方法为22～28℃，光照培养。本发明的胡桃球内生真菌木霉菌产孢培养基培养五天产孢量可达到7.4×107个孢子/毫升培养基。
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