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公开(公告)号:CN103756917B
公开(公告)日:2016-05-04
申请号:CN201410016834.1
申请日:2014-01-14
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N1/14
Abstract: 本发明提供了一种楸树内生真菌的原生质体的制备方法;所述方法包括以下步骤:步骤1,菌丝体的制备;步骤2,原生质体的制备;步骤3,原生质体纯化;步骤4,原生质体再生。本发明所述方法制备的原生质体数量较多,可达到6×107个/毫克菌丝,获得的原生质体的活力较高,再生率可达到1.2%。本发明选择培养12-24h的菌丝体,真菌处于快速生长期,生长快,细胞壁易于酶的裂解,释放出的原生质体的数量多,不易裂解,活力高。本发明选取5~30mg/ml Glucanex复合酶作为细胞壁裂解酶液,裂解效率高,原生质体释放数量多。本发明选用KCl或NaCl作为渗透压稳定剂,保证了原生质体制备数量与原生质体的稳定。
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公开(公告)号:CN1963493A
公开(公告)日:2007-05-16
申请号:CN200610119255.5
申请日:2006-12-07
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N30/00 , B01J20/281
Abstract: 本发明公开了一种以HP20树脂为填料的固相萃取试剂盒及其使用方法,属于生物化学工程领域。本发明试剂盒包括离心固相萃取柱和固相萃取试剂瓶组,两者装在同一个试剂盒中,配套使用。离心固相萃取柱包括上部的储液槽和下部填料管两部分,储液槽作为离心前样品和各种洗液的加样槽,填料管中填充有HP20树脂材料;固相萃取试剂瓶组包括:样品稀释液瓶,第一杂质洗脱液瓶,第二杂质洗脱液瓶,以及紫杉烷洗脱液瓶。本发明还提供了以HP20树脂为填料的固相萃取试剂盒的使用方法,包括离心固相萃取柱的再生和平衡、样品吸附、强碱洗脱、强酸洗脱、以及弱酸洗脱和富集。本发明可以实现紫杉烷样品的完整、高效分离、高收率的固相萃取。
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公开(公告)号:CN104610383A
公开(公告)日:2015-05-13
申请号:CN201510031256.3
申请日:2015-01-21
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07G99/00
Abstract: 本发明公开一种用萃取反萃分离纯化楸树内生真菌发酵液中楸灵素的方法:调整楸树内生真菌发酵液pH为4~6;用稀酸溶液预饱和处理乙酸乙酯,使得乙酸乙酯的pH和所述发酵液匹配;将调整好pH的楸树内生真菌发酵液与乙酸乙酯混匀,静置进行双液相萃取,收集乙酸乙酯相;将所述收集到的乙酸乙酯相和pH为7~11水相混匀,进行反萃取,回收水相即为纯化的楸灵素水溶液。与现有技术相比,本发明利用楸灵素的弱酸性,在保证80%以上的楸灵素收率的条件下,经过一次简单的萃取反萃过程,分离除去发酵液中的亲水杂质和疏水杂质,将楸灵素的纯度提高10倍以上,分离过程中乙酸乙酯可以悬蒸回收后重复利用,分离成本低,环境压力小。
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公开(公告)号:CN103756917A
公开(公告)日:2014-04-30
申请号:CN201410016834.1
申请日:2014-01-14
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N1/14
Abstract: 本发明提供了一种楸树内生真菌的原生质体的制备方法;所述方法包括以下步骤:步骤1,菌丝体的制备;步骤2,原生质体的制备;步骤3,原生质体纯化;步骤4,原生质体再生。本发明所述方法制备的原生质体数量较多,可达到6×107个/毫克菌丝,获得的原生质体的活力较高,再生率可达到1.2%。本发明选择培养12-24h的菌丝体,真菌处于快速生长期,生长快,细胞壁易于酶的裂解,释放出的原生质体的数量多,不易裂解,活力高。本发明选取5~30mg/ml?Glucanex复合酶作为细胞壁裂解酶液,裂解效率高,原生质体释放数量多。本发明选用KCl或NaCl作为渗透压稳定剂,保证了原生质体制备数量与原生质体的稳定。
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公开(公告)号:CN101705238B
公开(公告)日:2011-09-28
申请号:CN200910196271.8
申请日:2009-09-24
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域的纳豆芽孢杆菌谷氨酸脱氢酶(GDH)编码基因、蛋白及菌株。纳豆芽孢杆菌谷氨酸脱氢酶编码基因具有如SEQ ID NO:1所示的碱基序列;该基因编码的蛋白质具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列;本发明还提供了一种纳豆芽孢杆菌(Bacillus Natto)SJTU 1-4 CGMCC NO.2801。本发明确定了纳豆芽孢杆菌的谷氨酸脱氢酶编码序列,即RocG基因,为将来研究酶的活性位点和通过定点突变改变发酵菌株GDH酶活从而生产出低氨纳豆奠定了基础,RocG基因缺失菌株的氨产量可降低50%。
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公开(公告)号:CN103333166B
公开(公告)日:2016-07-06
申请号:CN201310261417.9
申请日:2013-06-26
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07D461/00
Abstract: 本发明公开了一种利用固体酸碱催化合成长春西汀的方法,所述方法包括如下步骤:步骤1,固体碱水解:将长春胺乙醇溶液送入固体碱水解柱中,进行水解反应;步骤2,分子筛脱水:将水解后的长春胺乙醇溶液通过分子筛脱水柱,进行脱水反应;步骤3,固体酸脱水酯化:脱水后的料液进入固体酸脱水酯化柱,进行固体酸脱水酯化,即可。本发明采用强碱代替氢氧化钠催化长春胺水解,固体强酸代替浓硫酸进行脱水、酯化得到长春西汀,本方法所用催化剂可以和产物方便的分离,降低生产成本;本发明方法生产过程中不产生酸碱废水,环保性好,更适于工业化生产;可重复使用,有效的降低生产成本,所用固体酸碱对设备无腐蚀,不产生酸碱废水,绿色环保。
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公开(公告)号:CN1944353A
公开(公告)日:2007-04-11
申请号:CN200610117577.6
申请日:2006-10-26
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种农业技术领域的海藻氨基酸稀土复合叶面肥及其制备方法,其制备过程如下:A)取0.1-2克海藻,进行切割粉碎,获得粒度在100微米以下的超细粒度的海藻粉;B)取0.2-2克复合氨基酸粉,将二者加入到1-5倍重量的1-6N的磷酸或者醋酸溶液中,60-120℃保温2-40小时酸解,得到海藻寡糖、多肽以及氨基酸的混合溶液。C)用氨水、氢氧化钠或者石灰水调整混合溶液的pH到5-7之间,加入金属盐母液0.5-5mL和稀土母液0.1-1mL。D)加水将混合溶液调整到11,并最后用氨水、氢氧化钠或者石灰水调整混合溶液的pH到5-7之间,即为复合叶面肥。本发明能够更进一步提高植物的光合效率,从而促进植物以更快的速度生长。
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公开(公告)号:CN1850102A
公开(公告)日:2006-10-25
申请号:CN200610024276.9
申请日:2006-03-02
Applicant: 上海交通大学
IPC: A61K31/715 , A61P35/00 , A61K31/352
Abstract: 一种能够有效治疗脑癌的胡桃楸多糖制剂及其制备方法,属于医药技术领域。本发明所述胡桃楸制剂组分重量百分比为:胡桃楸多糖85-98%,黄酮类物质15-2%。制备如下:(1)胡桃楸材料的收集和干燥;(2)胡桃楸抗癌活性成分的提取:干燥后的胡桃楸材料进行粉碎,加水,加热保温,分离清液和残渣,再按照相同方法加新水加热熬煮胡桃楸材料残渣,并过滤收集清液,合并清液,进行浓缩,然后分别加氯仿去蛋白和高疏说性的脂类成分,并加乙醇沉淀胡桃楸多糖。最后通过干燥、粉碎、过筛,得到活性多糖粉末;(3)抗癌汤剂的配置。本发明制备可以有效治疗脑癌的中药制剂,疗效高,毒副作用低,工艺简单、无三废污染,宜于大规模工业化生产。
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公开(公告)号:CN104610383B
公开(公告)日:2017-01-04
申请号:CN201510031256.3
申请日:2015-01-21
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07G99/00
Abstract: 本发明公开一种用萃取反萃分离纯化楸树内生真菌发酵液中楸灵素的方法:调整楸树内生真菌发酵液pH为4~6;用稀酸溶液预饱和处理乙酸乙酯,使得乙酸乙酯的pH和所述发酵液匹配;将调整好pH的楸树内生真菌发酵液与乙酸乙酯混匀,静置进行双液相萃取,收集乙酸乙酯相;将所述收集到的乙酸乙酯相和pH为7~11水相混匀,进行反萃取,回收水相即为纯化的楸灵素水溶液。与现有技术相比,本发明利用楸灵素的弱酸性,在保证80%以上的楸灵素收率的条件下,经过一次简单的萃取反萃过程,分离除去发酵液中的亲水杂质和疏水杂质,将楸灵素的纯度提高10倍以上,分离过程中乙酸乙酯可以悬蒸回收后重复利用,分离成本低,环境压力小。
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公开(公告)号:CN103333166A
公开(公告)日:2013-10-02
申请号:CN201310261417.9
申请日:2013-06-26
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07D461/00
Abstract: 本发明公开了一种利用固体酸碱催化合成长春西汀的方法,所述方法包括如下步骤:步骤1,固体碱水解:将长春胺乙醇溶液送入固体碱水解柱中,进行水解反应;步骤2,分子筛脱水:将水解后的长春胺乙醇溶液通过分子筛脱水柱,进行脱水反应;步骤3,固体酸脱水酯化:脱水后的料液进入固体酸脱水酯化柱,进行固体酸脱水酯化,即可。本发明采用强碱代替氢氧化钠催化长春胺水解,固体强酸代替浓硫酸进行脱水、酯化得到长春西汀,本方法所用催化剂可以和产物方便的分离,降低生产成本;本发明方法生产过程中不产生酸碱废水,环保性好,更适于工业化生产;可重复使用,有效的降低生产成本,所用固体酸碱对设备无腐蚀,不产生酸碱废水,绿色环保。
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