公开(公告)号：CN102559927A

公开(公告)日：2012-07-11

申请号：CN201110440713.6

申请日：2011-12-23

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 崔立 ,  朱爱玲 ,  杨曦 ,  华修国

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种犬星状病毒的半套式RT-PCR检测方法，包括如下步骤：1.以犬星状病毒基因的保守片段为靶目标设计引物，2.将检测样品处理后提取总RNA，3.将总RNA逆转录到cDNA，四、通过半套式RT-PCR方法检测样品中的犬星状病毒。本发明克服了传统技术中的不足之处，具有灵敏度高、特异性好、简便、快速等特点，适用于犬星状病毒的病原学诊断和流行病学研究。

公开(公告)号：CN102703491A

公开(公告)日：2012-10-03

申请号：CN201210162640.3

申请日：2012-05-23

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 严亚贤 ,  孙建和 ,  杨曦

IPC: C12N15/70 ,  A61K38/16 ,  A61P31/04 ,  C12R1/19 ,  C12R1/92

Abstract: 本发明公开了一种高效裂解大肠杆菌的裂菌制剂及其裂解方法、用途。设计引物，采用PCR扩增溶原性大肠杆菌中诱导的裂解性噬菌体的裂解酶基因，获得目的片段，再将目的片段与pET-28a（+）载体连接，得到重组表达质粒，导入大肠杆菌BL21（DE3）表达，获得阳性转化子，通过诱导，表达重组的融合蛋白，纯化诱导得纯化的重组蛋白，筛选具有裂解活性的重组表达蛋白，即得所述裂菌制剂。所述裂解方法为pH 8.0，37℃，采用的还原剂为质量百分比浓度为0.8%的β-巯基乙醇或10mM的半胱氨酸，缓冲液为20mM pH5.2醋酸钠缓冲液。本发明获得的裂菌制剂对多种血清型大肠杆菌的裂解特异性强、裂解效率高，可有效杀灭大肠杆菌。