公开(公告)号：CN106497956A

公开(公告)日：2017-03-15

申请号：CN201610938377.0

申请日：2016-10-25

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 黄娟 ,  徐沁 ,  洪亮

IPC: C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/66 ,  C12N9/02

CPC classification number: C12N15/70 ,  C12N9/0077 ,  C12N15/66 ,  C12Y114/15001

Abstract: 本发明涉及CYP101酶重组载体及构建方法、CYP101酶高效表达纯化方法，属于生物技术领域。本发明中构建了PET28a-CYP101的高效表达载体，并将其转化于BL21 plysS菌株中，诱导表达后，利用简单两步纯化方法：即亲和层析和离子交换层析，得到纯度大于95％的高纯酶。与现有技术相比，本发明对CYP101生产简单高效，成本低廉，纯化方便，每升培养基可获得23mg纯度95％以上的目的蛋白。本发明可用于CYP101酶的表达纯化，极大地提高了实验室生产的效率，同时极大的降低了实验成本。对于大规模生产纯化CYP101酶具有很好的应用前景。