公开(公告)号：CN114875007B

公开(公告)日：2023-09-05

申请号：CN202210748649.6

申请日：2022-06-29

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 张勇 ,  高雪纯 ,  陈润莎 ,  刘慧侠 ,  吴金鸿 ,  延泉德

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供了一种热与有机溶剂综合稳定性提高的糖基转移酶突变体。本发明基于酶结构解析及蛋白稳定性计算辅助设计，将糖基转移酶UGT109A3野生型基因序列编码的氨基酸置换Ser203Cys、Asn304Trp、Ala45Leu、Cys127Tyr，Thr229Ile得到糖基转移酶UGT109A3m(S203C/N304W)双位点及UGT109A3m(A45L/C127Y/T229I)三位点突变体，其中所获得的最优突变体的热稳定性Tm值提高了7.1℃，且在50％(v/v)DMSO反应体系中，相对催化活性由60％提升到91％,这一结果提升了糖基转移酶的实际应用价值。

公开(公告)号：CN114875007A

公开(公告)日：2022-08-09

申请号：CN202210748649.6

申请日：2022-06-29

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 张勇 ,  高雪纯 ,  陈润莎 ,  刘慧侠 ,  吴金鸿 ,  延泉德

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供了一种热与有机溶剂综合稳定性提高的糖基转移酶突变体。本发明基于酶结构解析及蛋白稳定性计算辅助设计，将糖基转移酶UGT109A3野生型基因序列编码的氨基酸置换Ser203Cys、Asn304Trp、Ala45Leu、Cys127Tyr，Thr229Ile得到糖基转移酶UGT109A3m(S203C/N304W)双位点及UGT109A3m(A45L/C127Y/T229I)三位点突变体，其中所获得的最优突变体的热稳定性Tm值提高了7.1℃，且在50％(v/v)DMSO反应体系中，相对催化活性由60％提升到91％,这一结果提升了糖基转移酶的实际应用价值。