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公开(公告)号：CN112575016B
公开(公告)日：2022-09-06
申请号：CN201910929503.X
申请日：2019-09-29
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种原核生物大肠杆菌中无膜细胞器的构建及应用，通过构建由如Seq ID No.1所示络新妇蜘蛛(Nephila clavipes)牵引丝蛋白MaSp1的重复肽段单体的串联体构成的蛋白质和由如Seq ID No.2所示的MaSp2重复肽段单体的串联体构成的蛋白质的重组蛛丝蛋白或类节肢弹性蛋白的表达载体并导入表达宿主中，经过诱导表达后形成可溶蛋白富集相，即无膜区室；无膜区室的组分蛋白以可溶状态存在，最大限度的保留了其生物活性。本发明首次通过大肠杆菌内的无膜细胞器生产1,3‑丙二胺，并首次在无膜细胞器内合成纳米颗粒，比起化学方法合成更加的温和与环保。
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公开(公告)号：CN114480269A
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202210113285.4
申请日：2022-01-30
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种基于重组蛋白质水凝胶的培养支架及其制备方法，通过构建融合精‑甘‑天冬三肽(RGD)序列的类节肢蚕丝重组蛋白表达载体，并将其导入表达宿主细胞中，经重组表达、分离纯化和温度刺激处理后，通过与海藻酸钠混合并经酶催化交联以及氯化钙和柠檬酸钠循环处理，得到用于干细胞三维培养的动态纤维网水凝胶支架。本发明通过构建融合RGD序列的类节肢蚕丝重组蛋白，利用其温敏性成纤维自组装行为，制备适用于三维培养的重组蛋白质水凝胶基质，可有效调控间充质干细胞(BMSCs)的粘附、增殖、延展及分化等生命过程。
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公开(公告)号：CN106399343B
公开(公告)日：2019-07-05
申请号：CN201510456365.X
申请日：2015-07-29
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种戊二酸生物改进合成方法，通过在重组宿主大肠杆菌中表达2‐羟基戊二酸脱氢酶，戊烯二酰辅酶A转移酶，2‐羟基戊二酰辅酶A脱水酶，反‐烯酰辅酶A还原酶以及硫酯酶实现。通过对表达上述基因的重组大肠杆菌进行发酵生产，成功在发酵液中检测到目标产物戊二酸以及副产物戊烯二酸，2‐羟基戊二酸的生成。本发明所构建的生物合成途径为利用可再生资源合成戊二酸提供了一种新的方法。
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公开(公告)号：CN106399343A
公开(公告)日：2017-02-15
申请号：CN201510456365.X
申请日：2015-07-29
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种戊二酸生物改进合成方法，通过在重组宿主大肠杆菌中表达2‐羟基戊二酸脱氢酶，戊烯二酰辅酶A转移酶，2‐羟基戊二酰辅酶A脱水酶，反‐烯酰辅酶A还原酶以及硫酯酶实现。通过对表达上述基因的重组大肠杆菌进行发酵生产，成功在发酵液中检测到目标产物戊二酸以及副产物戊烯二酸，2‐羟基戊二酸的生成。本发明所构建的生物合成途径为利用可再生资源合成戊二酸提供了一种新的方法。
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公开(公告)号：CN111363022B
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202010259753.X
申请日：2020-04-03
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07K14/435 , C07K1/36 , C07K1/34 , C07K1/30 , D01F4/00
Abstract: 一种高浓度重组蛛丝蛋白纺丝液的制备方法及其纺丝，该重组蛛丝蛋白的分子结构为NTD‑(RP)n‑CTD，其中整数n代表RP重复结构域的重复次数，每个RP重复结构域的氨基酸序列如Seq ID No.1或Seq ID No.2所示。本发明能够高效、低成本的制备高浓度重组蛛丝蛋白纺丝液并得到易于修饰和改性且力学性能优良的人造蜘蛛丝。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112575016A
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201910929503.X
申请日：2019-09-29
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种原核生物大肠杆菌中无膜细胞器的构建及应用，通过构建由如Seq ID No.1所示络新妇蜘蛛(Nephila clavipes)牵引丝蛋白MaSp1的重复肽段单体的串联体构成的蛋白质和由如Seq ID No.2所示的MaSp2重复肽段单体的串联体构成的蛋白质的重组蛛丝蛋白或类节肢弹性蛋白的表达载体并导入表达宿主中，经过诱导表达后形成可溶蛋白富集相，即无膜区室；无膜区室的组分蛋白以可溶状态存在，最大限度的保留了其生物活性。本发明首次通过大肠杆菌内的无膜细胞器生产1,3‑丙二胺，并首次在无膜细胞器内合成纳米颗粒，比起化学方法合成更加的温和与环保。
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公开(公告)号：CN108728472A
公开(公告)日：2018-11-02
申请号：CN201710269401.0
申请日：2017-04-24
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/12 , C07K14/435 , C08J3/075
Abstract: 一种类节肢蚕丝蛋白嵌段共聚物及其水凝胶的制备方法，通过构建类节肢蚕丝蛋白基因单体RXSY的表达载体，并将其导入表达宿主细胞中，得到目标蛋白，再利用温度刺激、光刺激或温度和氧化还原的组合刺激制备得到水凝胶。本发明制备形成的水凝胶不仅具有多肽类水凝胶的生物相容性、可降解性、细胞毒性低等优势，同时兼具温度、光和氧化还原刺激响应性以及可调的力学性能，这将为该种水凝胶在组织工程，药物传输等医学工程中的应用提供更好的选择。
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公开(公告)号：CN103937841A
公开(公告)日：2014-07-23
申请号：CN201410200482.5
申请日：2014-05-13
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种烯酰辅酶A水合酶在己二酸生物合成中的应用，本发明所采用的烯酰辅酶A水合酶不仅具有催化3‐羟基己二酰辅酶A向2,3‐烯‐己二酰辅酶A转化的活性，它在己二酸合成途径中还具有更好的催化能力。通过将其替换已有烯酰辅酶A水合酶(Crt)，大肠杆菌内己二酸的产量提高了数倍。本发明所鉴定的烯酰辅酶A水合酶从一定程度克服了现有己二酸生物合成途径效率不高的瓶颈，为己二酸以及类似化合物的生物合成提供了更大的潜力。
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公开(公告)号：CN119592598A
公开(公告)日：2025-03-11
申请号：CN202411789365.7
申请日：2024-12-06
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种无细胞系统内多无膜区室间物质可控递送的应用，通过利用蛋白质表达载体的蛋白表达和组氨酸标签(His Tag)蛋白的添加，在优化的无细胞系统内快速形成两种独立共存的蛋白富集相，即多无膜区室后，进行多无膜区室间小分子物质和大分子物资的可控递送。本发明构建得到的多无膜区室可以将无细胞系统中特定的活性组分、生化反应可控地富集至区室中并与其他复杂代谢反应分隔，由于区室的高动态性还能够实现生物分子与外界环境、多区室间的可控交流，进而大幅提高代谢反应的精准性及可控性，为无细胞系统在复杂代谢通路探索、多酶催化、药物递送等方面的应用奠定坚实基础。
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公开(公告)号：CN117802137B
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410182756.6
申请日：2024-02-19
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N15/70 , C07K14/78 , C07K14/435 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/12 , C12N1/20 , C12N1/38 , C12N1/06 , C12R1/19
Abstract: 一种活细胞内原位自聚合水凝胶的构建及提取方法，通过构建类节肢弹性蛋白的表达载体，或重组类节肢弹性蛋白与贻贝足蛋白融合的表达载体，分别导入酪氨酸营养缺陷型表达宿主中，经过培养基中限制性底物酪氨酸和多巴的更替并提高温度后，在活细胞内合成的多巴引入重组蛋白自聚合形成原位水凝胶。本发明在模式生物大肠杆菌中将多巴引入到典型的内在无序结构蛋白中，利用多巴残基介导的多种共价和非共价交联化学反应，直接得到胞内原位自聚合蛋白水凝胶。
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