靶向小鼠血小板膜糖蛋白GPIbα的肿瘤转移抑制剂及其鉴定方法

    公开(公告)号:CN108341874A

    公开(公告)日:2018-07-31

    申请号:CN201810191281.1

    申请日:2018-03-08

    Abstract: 本发明涉及一种靶向小鼠血小板膜糖蛋白GPIbα的肿瘤转移抑制剂,所述的肿瘤转移抑制剂为单克隆抗体1D12或2B4。本发明还涉及一种用于鉴定所述的靶向小鼠血小板膜糖蛋白GPIbα的肿瘤转移抑制剂的方法。本发明中通过建立的靶向血小板膜蛋白GPIbα肿瘤转移抑制剂的验证模型验证其靶向性及功能性,通过四个验证模型的验证,从确定靶向小鼠血小板GPIbα单克隆抗体1D12及2B4可以有效抑制肿瘤细胞转移而不影响正常血小板功能。为以后GPIbα在肿瘤转移过程中具体作用机制的研究提供可能性。

    一种含有MRP-2基因3′UTR和报告基因的重组质粒及其应用

    公开(公告)号:CN102492712B

    公开(公告)日:2014-05-07

    申请号:CN201110437408.1

    申请日:2011-12-23

    Abstract: 本发明公开了一种含有MRP-2基因3′UTR和报告基因的重组质粒及其应用,将构建的MRP-2基因3′UTR报告基因载体与pRL-SV40载体及所需筛选的microRNA共转染到耐药型的结肠癌细胞系中,通过同时检测萤火虫和海肾荧光素酶的活性来反应microRNA对于MRP-2基因3′UTR区的抑制活性,从而建立靶向筛选逆转肿瘤多药耐药的microRNA的方法。该方法在筛选逆转肿瘤多药耐药的microRNA、研究逆转肿瘤多药耐药与microRNA之间的作用机理以及研究肿瘤细胞多药耐药microRNA水平的机制方面有极佳的应用前景。

    一种含有MRP-2基因3′UTR和报告基因的重组质粒及其应用

    公开(公告)号:CN102492712A

    公开(公告)日:2012-06-13

    申请号:CN201110437408.1

    申请日:2011-12-23

    Abstract: 本发明公开了一种含有MRP-2基因3′UTR和报告基因的重组质粒及其应用,将构建的MRP-2基因3′UTR报告基因载体与pRL-SV40载体及所需筛选的microRNA共转染到耐药型的结肠癌细胞系中,通过同时检测萤火虫和海肾荧光素酶的活性来反应microRNA对于MRP-2基因3′UTR区的抑制活性,从而建立靶向筛选逆转肿瘤多药耐药的microRNA的方法。该方法在筛选逆转肿瘤多药耐药的microRNA、研究逆转肿瘤多药耐药与microRNA之间的作用机理以及研究肿瘤细胞多药耐药microRNA水平的机制方面有极佳的应用前景。

    靶向血小板膜糖蛋白GPIbα的抑制肿瘤转移的单克隆抗体及其筛选方法

    公开(公告)号:CN107082809B

    公开(公告)日:2020-11-10

    申请号:CN201710445691.X

    申请日:2017-06-13

    Abstract: 本发明涉及一种靶向血小板膜糖蛋白GPIbα的抑制肿瘤转移的单克隆抗体,所述的单克隆抗体为特异性结合血小板膜蛋白GPIbα的单克隆抗体。本发明还涉及一种用于筛选靶向血小板膜糖蛋白GPIbα的肿瘤转移抑制剂的方法,分为五部分:第一部分是利用酶联免疫吸附测定建立的初步筛选模型,第二部分是利用免疫印迹法建立的二次筛选模型,第三、四、五部分是利用流式细胞仪及连续光谱荧光仪建立的功能检测模型。本发明中建立的筛选模型可显著减少在获得靶向血小板膜糖蛋白GPIbα抑制剂过程中对人源血小板的需求,并最大程度在体外实验中活化肿瘤细胞,模拟了肿瘤细胞微环境,提高了筛选准确性,所获得的抗体YQ3具有很好地临床应用前景。

    包载基因药物的靶向EpCAM脂质体纳米颗粒及制备方法、应用

    公开(公告)号:CN110522724A

    公开(公告)日:2019-12-03

    申请号:CN201910853380.6

    申请日:2019-09-10

    Abstract: 本发明涉及一种具有EpCAM主动靶向功能的可包载基因药物的脂质体纳米颗粒的制备方法,包括步骤:(1)将DOTAP、HSPC、Chol、DSPE-PEG2000-COOH按预设配比共同溶于有机溶剂中;(2)减压蒸发除去有机溶剂,得到透明均匀的脂质体膜;(3)使脂质体膜水化,并挤出成膜,形成空白脂质体纳米颗粒;(4)将EDC、NHS加入所述的空白脂质体纳米颗粒中,以活化所述的空白脂质体纳米颗粒表面的羧基,将NH2-修饰的EpCAM核酸适配体储存液加入活化的空白脂质体纳米颗粒中,孵育,以将所述的空白脂质体纳米颗粒进行EpCAM核酸适配体修饰,而获得所述的脂质体纳米颗粒。

    用于构建结肠癌细胞腹膜转移体外三维模型的方法

    公开(公告)号:CN108795867A

    公开(公告)日:2018-11-13

    申请号:CN201810570405.7

    申请日:2018-06-05

    Abstract: 本发明涉及一种用于构建结肠癌细胞腹膜转移体外三维模型的方法,包括步骤:(1)将成纤维细胞悬浮液与I型胶原混合,混匀后立即加到培养器皿中;(2)将培养器皿在室温下放置20分钟,随后放置在细胞培养箱中2~4小时后凝固,继续将间皮细胞铺入板中18~38小时;(3)将结肠癌细胞铺入板中,完成体外3D模型的构建。采用了本发明的用于构建结肠癌细胞腹膜转移体外三维模型的方法,可以模拟生理微环境,用于更好地理解结直肠癌转移过程中粘附和侵袭能力的变化,将完善现用于研究结直肠癌癌转移的体外细胞培养模型,且有助于增强对结直肠癌癌早期转移过程的总体理解。

    靶向血小板膜糖蛋白GPIbα的抑制肿瘤转移的单克隆抗体及其筛选方法

    公开(公告)号:CN107082809A

    公开(公告)日:2017-08-22

    申请号:CN201710445691.X

    申请日:2017-06-13

    CPC classification number: C07K16/2896 C07K2317/76 G01N33/6854

    Abstract: 本发明涉及一种靶向血小板膜糖蛋白GPIbα的抑制肿瘤转移的单克隆抗体,所述的单克隆抗体为特异性结合血小板膜蛋白GPIbα的单克隆抗体。本发明还涉及一种用于筛选靶向血小板膜糖蛋白GPIbα的肿瘤转移抑制剂的方法,分为五部分:第一部分是利用酶联免疫吸附测定建立的初步筛选模型,第二部分是利用免疫印迹法建立的二次筛选模型,第三、四、五部分是利用流式细胞仪及连续光谱荧光仪建立的功能检测模型。本发明中建立的筛选模型可显著减少在获得靶向血小板膜糖蛋白GPIbα抑制剂过程中对人源血小板的需求,并最大程度在体外实验中活化肿瘤细胞,模拟了肿瘤细胞微环境,提高了筛选准确性,所获得的抗体YQ3具有很好地临床应用前景。

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