公开(公告)号：CN102257139B

公开(公告)日：2014-06-25

申请号：CN200980151805.3

申请日：2009-10-21

Applicant: 一般财团法人化学及血清疗法研究所 ,  帝人制药株式会社

Inventor： 中武博 ,  米田明广 ,  末永清刚 ,  平岛正树 ,  前田浩明

IPC: C12N15/09

CPC classification number: C12N9/6491 ,  C07K2319/02 ,  C12P21/02

Abstract: 本发明公开了一种制备能够形成包含体的蛋白的方法。具体公开了一种核酸片段，其包含：编码修饰的碱性磷酸酶信号肽(修饰的APSP)的核苷酸序列，在修饰的APSP中SEQ？ID？NO：1氨基酸序列第13位的亮氨酸由脯氨酸置换和/或第21位的丙氨酸由其他氨基酸置换；以及目的蛋白的基因的核苷酸序列，其连接于所述核苷酸序列下游。还具体公开了一种制备包含体形成蛋白的方法，其包括以下步骤：(1)制备表达载体，其中整合的核酸片段包含编码修饰的信号肽的核苷酸序列和结合于其下游的编码目的蛋白的基因的核苷酸序列，(2)制备表达载体转化的产生包含体形成蛋白的宿主细胞，和(3)从培养产生包含体形成蛋白的宿主细胞得到的培养物中纯化包含体形成蛋白。上述其他氨基酸选自天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、组氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸。

公开(公告)号：CN102257139A

公开(公告)日：2011-11-23

申请号：CN200980151805.3

申请日：2009-10-21

Applicant: 一般财团法人化学及血清疗法研究所 ,  帝人制药株式会社

Inventor： 中武博 ,  米田明广 ,  末永清刚 ,  平岛正树 ,  前田浩明

IPC: C12N15/09 ,  C12N1/21 ,  C12P21/02 ,  C12N9/64

CPC classification number: C12N9/6491 ,  C07K2319/02 ,  C12P21/02

Abstract: 本发明公开了一种制备能够形成包含体的蛋白的方法。具体公开了一种核酸片段，其包含：编码修饰的碱性磷酸酶信号肽(修饰的APSP)的核苷酸序列，在修饰的APSP中SEQ ID NO：1氨基酸序列第13位的亮氨酸由脯氨酸置换和/或第21位的丙氨酸由其他氨基酸置换；以及目的蛋白的基因的核苷酸序列，其连接于所述核苷酸序列下游。还具体公开了一种制备包含体形成蛋白的方法，其包括以下步骤：(1)制备表达载体，其中整合的核酸片段包含编码修饰的信号肽的核苷酸序列和结合于其下游的编码目的蛋白的基因的核苷酸序列，(2)制备表达载体转化的产生包含体形成蛋白的宿主细胞，和(3)从培养产生包含体形成蛋白的宿主细胞得到的培养物中纯化包含体形成蛋白。上述其他氨基酸选自天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、组氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸。