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公开(公告)号：CN101386878B
公开(公告)日：2012-02-15
申请号：CN200810225314.6
申请日：2008-10-29
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种利用整细胞生物转化再生氧化型辅酶I的方法。本发明的再生氧化型辅酶I的方法，是在缓冲溶液中，以还原型辅酶I为底物利用产气肠杆菌将还原型辅酶I转化为氧化型辅酶I。所述缓冲溶液的pH为4.0-9.0。所述缓冲溶液中所述还原型辅酶I的浓度为0.02mM-10mM。本发明的再生氧化型辅酶I的方法可将NADH转化为NAD+，转化率达到72％。
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公开(公告)号：CN101633691B
公开(公告)日：2011-09-14
申请号：CN200810116975.5
申请日：2008-07-22
Applicant: 清华大学
IPC: C07K14/195 , C12N15/31 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12P3/00 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种产氢相关蛋白及其编码基因与应用。本发明公开的蛋白，是(a)或(b)的蛋白质：(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与产氢相关的由序列1衍生的蛋白质。将本发明提供的产氢相关蛋白命名为LdhD，灭活E.aerogenes IAM1183中所述蛋白的编码基因1dhd得到了一株工程菌。本发明获得的工程菌对环境适应性强、底物范围广、利用底物能力强、产氢效率高，可应用于生物制氢，对利用产气肠杆菌制氢具有巨大的指导意义。
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公开(公告)号：CN101608180B
公开(公告)日：2011-08-10
申请号：CN200910090169.X
申请日：2009-07-29
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种融合肝素酶。该融合肝素酶是如下a)或b)的蛋白：a)序列表中序列1的第8-1016所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)在序列表中序列1的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且具有肝素酶活性的由a)衍生的蛋白质。上述蛋白的编码基因也属于本发明的保护范围之内。本发明产生的三重融合蛋白的酶活通过摇瓶培养可达660.3IU/L培养基，比酶活可达1.931IU/mg蛋白。本发明可以利用GFP蛋白实现菌体浓度和酶活的快速在线检测。
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公开(公告)号：CN101549936B
公开(公告)日：2011-06-29
申请号：CN200910083386.6
申请日：2009-05-04
Applicant: 清华大学 , 北京思清源生物科技有限公司
CPC classification number: Y02W30/47
Abstract: 本发明属于水处理技术领域的一种利用白腐真菌和载体处理难降解废水的方法。先利用载体吸附废水中的COD，后利用载体给白腐真菌提供纤维素刺激性底物诱发其产酶，处理载体吸附的难降解物质，选用不同天然物作为载体的核心材料，经NaOH处理后制成载体包被，处理废水时，调节废水的初始pH、投加载体、加入白腐真菌、取水样到锥形瓶中；置入温度35-60℃、摇速170rpm摇床进行处理。本发明处理过程仅需调节初始pH，中间过程不用操作，无需再次调节即可进行后续处理；且所用的载体来源广泛，使用后可连同菌体直接做肥料处理，不产生二次污染；处理后脱色效果明显，脱色率90％以上。
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公开(公告)号：CN101597624B
公开(公告)日：2011-05-18
申请号：CN200910088486.8
申请日：2009-07-02
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种细菌发酵生产氢气的方法。本发明的生产氢气的方法是在如下(1)或(2)的条件下，在添加磷酸根离子的基础培养基中培养产氢微生物生产氢气：(1)完全厌氧培养；(2)先在氧气体积百分比浓度为0.1-7.6％培养，然后在完全厌氧条件下培养。所述磷酸根离子为H2PO4-、HPO42-、PO43-、焦磷酸根或聚磷酸根离子。所述磷酸根离子的浓度为0.01-0.15mol/L所述基础培养基。所述产氢微生物为产气肠杆菌。所述产气肠杆菌为产气肠杆菌或过表达聚磷酸激酶的产气肠杆菌。本发明的生产氢气的方法可提高氢气的转化得率，降低生产成本。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101560507B
公开(公告)日：2011-04-27
申请号：CN200810104087.1
申请日：2008-04-15
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种磷酸转移酶及其编码基因以及携带编码基因的表达载体和用该表达载体转化宿主得到的基因工程菌。本发明公开的蛋白为：a)由序列1自氨基末端第11-248位氨基酸序列组成的蛋白质；b)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；c)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有磷酸转移酶活性的由序列1衍生的蛋白质。将上述蛋白基因与pMKL-C2X相连，可构建融合表达载体，转化不同宿主。本发明提供的磷酸转移酶和工程菌可用于生产5′呈味核苷酸，生产率和转化速率高，水解活性低，且最适pH值近中性。本发明技术具有很高的实际应用价值和广阔的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN101613671A
公开(公告)日：2009-12-30
申请号：CN200910088344.1
申请日：2009-06-26
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种产氢工程菌。该工程菌是在氢气产生菌中过量表达与烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)再生相关的基因和/或敲除氢气产生菌中消耗烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的代谢路径实现的。通过对产氢细菌的NADH产氢路径进行代谢操作，敲除消耗NADH的代谢路径和使细胞产生更多的NADH，从而使细胞内最重要的辅因子之一NADH重新分布，进而促进更多的代谢流进入产氢路径，提高细胞的氢气产生率。培养本发明的工程菌，可以大大提高氢气的产生速率，单位体积的氢气产量是原始菌的2.2倍，而且消耗单位质量的葡萄糖的产氢率提高了86.8％，基本上接近微生物产氢的理论得率。
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公开(公告)号：CN101608194A
公开(公告)日：2009-12-23
申请号：CN200810115176.6
申请日：2008-06-18
Applicant: 清华大学
CPC classification number: Y02E50/343
Abstract: 本发明公开了一种降解木质纤维生物质的方法。该方法是对待降解的木质纤维生物质进行蒸汽爆破处理，向得到的蒸汽爆破处理物中接入厌氧污泥进行厌氧发酵。降解过程改变了木质素和纤维素、半纤维素的空间结构，并将大部分可利用糖都被降解出来。而且，降解得到的糖有较少的抑制物产生，非常有利于下一步生物燃料的生物转化生成，在工业上有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN101560507A
公开(公告)日：2009-10-21
申请号：CN200810104087.1
申请日：2008-04-15
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种磷酸转移酶及其编码基因以及携带编码基因的表达载体和用该表达载体转化宿主得到的基因工程菌。本发明公开的蛋白为：a)由序列1自氨基末端第11－248位氨基酸序列组成的蛋白质；b)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；c)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有磷酸转移酶活性的由序列1衍生的蛋白质。将上述蛋白基因与pMKL－C2X相连，可构建融合表达载体，转化不同宿主。本发明提供的磷酸转移酶和工程菌可用于生产5′呈味核苷酸，生产率和转化速率高，水解活性低，且最适pH值近中性。本发明技术具有很高的实际应用价值和广阔的工业应用前景。
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