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公开(公告)号：CN104371994A
公开(公告)日：2015-02-25
申请号：CN201410550898.X
申请日：2014-10-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明阐述了一种新型结合诱变与高通量筛选高产重组酶菌株的方法，属于基因工程、酶学及发酵技术领域。采用ARTP诱变技术对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WB600宿主进行诱变，利用筛选平板初筛、96孔板高通量复筛、摇瓶发酵筛选验证的方式获得一株高产重组酶的突变株。以碱性淀粉酶为筛选模式酶，高通量筛选出产酶酶活力较高的突变株B.subtilis WB600-mutl2，发酵得酶活力为186.4U/mL，为出发株酶活的130.3％。过氧化氢酶在B.subtilis WB600-mut12中异源表达后，酶活力提高至出发宿主酶活的135.0％。该发明具有重要的实用与经济价值。
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公开(公告)号：CN102676438B
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201210189014.3
申请日：2012-06-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 一株产α-酮戊二酸的菌株及用其发酵生产α-酮戊二酸的方法，属于微生物基因工程技术领域。本重组菌命名为大肠杆菌（Escherichiacoli）B0013-090A，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC NO：M 2012173，该菌株由大肠杆菌（Escherichiacoli）B0013-070B（保藏编号CCTCC NO：M 2012071）经基因工程改造获得。用其动态调控发酵生产α-酮戊二酸，发酵36~48h产α-酮戊二酸水平达到9%，且所产α-酮戊二酸化学纯度达到95%以上。该工艺以葡萄糖或淀粉、糖蜜或生物柴油副产甘油为原料，工业化生产α-酮戊二酸，其使用价值非常巨大。本发明发酵培养基简单清洁，既有利于降低生产成本，也有利于简化后提取步骤获得高品质产品。操作工艺简单易行，有利于在工业化规模生产中推广使用。
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公开(公告)号：CN101993887B
公开(公告)日：2013-04-17
申请号：CN201010252742.5
申请日：2010-08-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种芽孢杆菌高效分泌表达载体及其构建方法，属于微生物、基因工程技术领域。芽孢杆菌分泌表达载体pCHA03，其核苷酸序列为SEQ ID NO：2，该芽孢杆菌分泌型表达载体的大肠杆菌转化子JM109/pCHA03已保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC M 2010199。本发明主要利用我国中温α-淀粉酶生产菌株(B.myloliquefaciens)CICIM B4311α-淀粉酶基因的启动子和信号肽编码区构建适合在芽孢杆菌中分泌表达外源蛋白的载体pCHA03。本发明实施后获得的分泌表达载体可以实现多种外源蛋白在芽孢杆菌宿主中的高效分泌表达，在酶制剂生产、多肽类药物生产等领域具有应用前景。
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公开(公告)号：CN101130781A
公开(公告)日：2008-02-27
申请号：CN200710024145.5
申请日：2007-07-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 根癌农杆菌介导zeocin抗性基因转化工业化产甘油假丝酵母，将外源基因整合到宿主染色体上，属于基因工程中转化技术领域。本发明通过构建质粒pCAM3300－zeocin，将其电击转化根癌农杆菌。通过将含有目的质粒pCAM3300－zeocin的根癌农杆菌和产甘油假丝酵母共培养，利用zeocin抗性基因为筛选标记，实现了pCAM3300－zeocin对产甘油假丝酵母的转化。根据根癌农杆菌的生长特性，对转化条件进行了优化，在共培养时间为24h，细胞比例为1∶500－1000时最高转化率达到2个转化子/104个酵母细胞。初步建立了根癌农杆菌介导转化工业化产甘油假丝酵母的转化方法，为进一步研究产甘油假丝酵母打下基础。
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公开(公告)号：CN101063125A
公开(公告)日：2007-10-31
申请号：CN200710020892.1
申请日：2007-04-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 人甲状旁腺激素(PTH)与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白的制备方法及产品，属于长效重组融合蛋白药物技术领域。本发明利用重叠PCR技术，将HAS cDNA和PTH cDNA进行拼接，中间不加入任何连接肽，得到的PTH－HSA cDNA融合基因被整合到宿主的染色体中，在宿主系统中进行表达。本发明的融合蛋白包括与人血清白蛋白至少85％序列同源的第一区和与人甲状旁腺激素至少85％序列同源的第二区。该融合蛋白可以在不改变融合蛋白特性的前提下，进行个别氨基酸残基的取代、缺失或加入。本发明的融合蛋白在保持了人甲状旁腺激素生理特性的基础上，延长其在体内的半衰期，改善其溶解度，在药学领域有良好的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119752753A
公开(公告)日：2025-04-04
申请号：CN202411968119.8
申请日：2024-12-30
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N9/00 , C12N9/02 , C12N9/10 , C12N9/12 , C12N9/06 , C12N9/24 , C12N9/88 , C12N9/16 , C12N15/52 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/55 , C12N15/56 , C12N15/60 , C12N15/70 , C12P17/10 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种代谢工程改造大肠杆菌高效生产麦角硫因的方法及应用，属于生物技术领域。采用本发明提供的重组大肠杆菌EGT‑1‑B*能够实现将葡萄糖转化为麦角硫因；因此本发明的原材料廉价易得，无危害人体健康的添加剂、重金属，为后期的产物提纯奠定良好的基础，更能够达到商业应用的要求。并且本发明中在重组大肠杆菌EGT‑1‑B*中进一步过表达与组氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、S腺苷甲硫氨酸代谢相关的基因，以提升麦角硫因合成的前体氨基酸含量，同时在敲除基因yqaB后发现麦角硫因产量进一步提升，葡萄糖到麦角硫因的利用率能进一步提高，麦角硫因产量能达到140.29mg/L。
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公开(公告)号：CN119662475A
公开(公告)日：2025-03-21
申请号：CN202411891454.2
申请日：2024-12-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株有利于菌体回收的凝结芽孢杆菌及其在乳酸发酵中的应用，属于微生物、发酵工程技术领域。本发明从变质牛乳中分离出一批耐热型细菌，菌体少量培养后加入絮凝剂观察沉降情况，选出沉降速度最快的菌株，经鉴定选出其中的凝结芽孢杆菌。进一步筛选到一株细胞沉降快同时发酵所产L‑乳酸光学纯度高的菌株XQ20249。进一步采用亚硝基胍诱变并筛选得到细胞沉降更快的突变株，其中编号为LL08的突变株絮凝性上升幅度大同时在乳酸发酵条件下生长速度和乳酸发酵速度均快于其它突变株。LL08菌株用于乳酸发酵时发酵结束后可以通过菌体沉降的方法收集菌体进行二次发酵，可以大幅度减少有机氮源的使用量。
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公开(公告)号：CN118685377A
公开(公告)日：2024-09-24
申请号：CN202410963340.8
申请日：2024-07-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种7β‑羟基类固醇脱氢酶组合突变体及其应用。所述的7β‑HSDH突变体在SEQ ID NO.1所示的野生型上进行突变获得突变体T189V/V207M，在此基础上进一步筛选出25个氨基酸残基位点，通过定点饱和突变，筛选出提高7β‑HSDH的催化效率以及明显提高热稳定性的突变体T189V/V207M/V91P。本发明构建的突变后的7β‑HSDH突变体相较于出发7β‑HSDH酶活力提高了3.5倍，突变后的7β‑HSDH突变体在50℃下保温后残留酶活仍高达91.2％，具有工业化生产前景。
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公开(公告)号：CN118389381A
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202311745118.2
申请日：2023-12-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一株缩短色氨酸发酵周期的抗噬菌体大肠杆菌及其应用，属于发酵工程技术领域。其公开了一株快速生长的高产色氨酸同时具有抗噬菌体能力的大肠杆菌，已保藏于中国典型培养物保藏中心，分类命名为大肠杆菌DS0938(Escherichia coli DS0938)，保藏日期2023年09月04日，保藏编号CCTCC NO：M 20231588。将该菌株应用于色氨酸的摇瓶发酵或发酵罐发酵获取色氨酸。本发明提供的菌株同时具有高产色氨酸和抗噬菌体的能力，发酵速度快，发酵过程不易发生杂菌污染或噬菌体侵染。
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公开(公告)号：CN118308342A
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202410594022.9
申请日：2024-05-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了纤维二糖差向异构酶突变体及其在乳果糖生产中的应用，属于生物酶工程技术领域。本发明在SEQ ID NO.1所示的纤维二糖差向异构酶的基础上进行定点饱和突变和迭代饱和突变，获得了催化能力提高的纤维二糖差向异构酶突变体。本发明构建的突变体S173Y/S192A/Y193G比酶活力提高了2.00倍，达到14.18U/mg。在20U/mL加酶量、pH 7.5、75℃的催化条件下，可以催化500g/L的乳糖生成372.15g/L的乳果糖，转化率达74.43％，转化率提高了9.53％，有工业化应用前景。
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