一种鞘磷脂酶D突变体及其应用

    公开(公告)号:CN112662645B

    公开(公告)日:2022-04-22

    申请号:CN202110067084.0

    申请日:2021-01-19

    Abstract: 本发明属于酶的基因工程技术领域,本发明公开了一种鞘磷脂酶D突变体及其应用,所述的鞘磷脂酶D突变体是以来自Loxoscelesarizonica的鞘磷脂酶D(Laz‑SMD)(氨基酸序列SEQ ID NO:1)的亲本序列基础上突变第78位的半胱氨酸或第84位的半胱氨酸。本发明改造获得的Laz‑SMD突变体水解溶血磷脂底物改变了原有反应只产环状磷脂酸(cPA)的特点,转而只反应产生溶血磷脂酸,本发明提供了一种利用Laz‑SMD水解溶血磷脂生产溶血磷脂酸的方法,进一步提升了该酶在药物领域的利用价值。

    一种磷脂酶D突变体、重组基因工程菌及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN108118041A

    公开(公告)日:2018-06-05

    申请号:CN201711476894.1

    申请日:2017-12-29

    Abstract: 本发明公开了一种磷脂酶D突变体、重组基因工程菌及其制备方法和应用,所述的磷脂酶D突变体是在氨基酸序列为SEQ ID NO:1的亲本序列基础上删除C末端12~47个氨基酸所得。本发明获得两个磷脂酶D突变体,实验测定突变体1的酶活力较野生型提高了3.7倍,同时最适反应温度由原来的45℃提高到50℃;突变体2的酶活力较野生型提高了6倍,同时最适反应温度由原来的45℃提高到60℃。本发明突变体在没有改变其最适作用pH的情况下,显著提高了其最适反应温度及其自身酶活力,催化性能的提升进一步提升了该酶的工业利用价值。

    一种脂肪酶重组大肠杆菌表达菌株、重组脂肪酶和应用

    公开(公告)号:CN107245470A

    公开(公告)日:2017-10-13

    申请号:CN201710375132.6

    申请日:2017-05-24

    Abstract: 本发明公开了一种脂肪酶重组大肠杆菌表达菌株、重组脂肪酶和应用,方法如下:(1)将脂肪酶GZEL基因克隆到pFL‑B62cl表达载体上,构建得到重组质粒;所述脂肪酶GZEL基因的碱基序列如SEQ ID NO:2所示;(2)将所得的重组质粒转化大肠杆菌Shuffle T7感受态细胞,挑选阳性克隆,获得重组大肠杆菌表达菌株。以获得的重组大肠杆菌表达菌株为发酵菌株进行液体发酵,制备重组脂肪酶。本发明酶来源方便,发酵工艺简单、成本低;本发明同时公开了该酶在植物油酶法脱胶中的应用。将所制备的重组脂肪酶在30℃条件下脱胶反应3h即可将毛油中的磷含量降低到10mg/kg以下,与传统酶法脱胶工艺相比,能降低反应能耗。

    一种甘油二酯的生产方法
    89.
    发明公开

    公开(公告)号:CN104830920A

    公开(公告)日:2015-08-12

    申请号:CN201510167583.1

    申请日:2015-04-09

    CPC classification number: C12P7/6445

    Abstract: 本发明公开了一种甘油二酯的生产方法,包括以下步骤:(1)采用脂肪酶对油脂在容器I中进行甘油解反应;(2)将步骤(1)反应物分离甘油和脂肪酶后的油相输送到容器II中,容器II内油脂的温度为60~150℃,油脂在容器II中的停留时间为1~12hr,然后降温至甘油解反应的温度,返回至容器I中,添加甘油和脂肪酶,继续步骤(1)的甘油解反应;(3)重复上述反应,使得油脂发生1~10次循环,得到富含甘油二酯的反应产物。本发明通过升温或者化学催化的方法对反应产物中的甘油二酯进行构型转化,从而得到甘油二酯含量更高的反应产物。该方法提高了甘油二酯转化率,而且易于操作。

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