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公开(公告)号：CN102550594A
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201110273637.4
申请日：2011-09-15
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 用RNAi抑制昆虫及蜘蛛类有害生物的HMG-CoA还原酶表达，进行有效防治的方法，用注射的方式将大于20bp针对有害生物HMG-CoA还原酶基因(HMGR基因)双链RNA序列导入有害生物体内，抑制其HMG-CoA还原酶的表达，从而抑制保幼激素合成，导致其死亡或绝育，达到防治有害生物的目的。注射时，提取昆虫或蜘蛛类物种总RNA，反转录全部mRNA为cDNA，根据已知HMGR基因设计特异性引物，PCR扩增特异片段，获得HMG-CoA还原酶基因片段，连接到T载体上，转化扩增培养，PCR扩增获得两端带有启动子的HMG-CoA还原酶基因片段，体外合成HMG-CoA还原酶基因特异dsRNA片段，配制注射液从雌性成虫虫体第3和第4腹节节间膜处注射入虫体。采用本发明，抑制有害生物保幼激素合成，既可以使有害生物致死，也可以使其绝育。
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公开(公告)号：CN101358193B
公开(公告)日：2011-01-12
申请号：CN200810048734.1
申请日：2008-08-08
Applicant: 华中农业大学
CPC classification number: C12N15/8225 , C12N15/8266
Abstract: 本发明属于植物基因工程领域。从水稻中克隆到三个叶片衰老特异性诱导表达的启动子PSAG39、PSAG39-1600和PSAG39-493，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1，SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：5所示；所述启动子在成熟水稻叶片中有一定的表达，随着叶片衰老程度加深其表达量逐步变强，当叶片衰老程度到达晚期时表达活性达到顶点。本发明还公开了这三个启动子及其相应表达载体的制备方法，以及通过农杆菌介导的转基因方法导入水稻的应用。
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公开(公告)号：CN101402953A
公开(公告)日：2009-04-08
申请号：CN200810197565.8
申请日：2008-11-10
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域。具体涉及一种频率可控的GC特异性DNA诱变方法。先用氢氧化钠将待诱变基因变性为单链，再用对苯二酚和亚硫酸氢钠处理，使DNA链中的C脱氨基成为U；以修饰过的DNA为模板，PCR扩增使U跟A配对，后续扩增中，A继续与T配对，从而使原始DNA链中的GC向AT方向转换，获得突变DNA分子；将突变的DNA分子装载到表达载体，即可构建成DNA分子突变文库。随着亚硫酸氢钠处理时间的延长，DNA的最终突变频率也逐渐增大，最终可得突变频率达5％左右的DNA，从而克服一些常规随机诱变方法中诱变频率过低的问题。本发明是针对DNA分子中的GC碱基，GC突变占总突变率的90％以上，尤其适用于富含GC基因的诱变。本发明可用于DNA分子体外改良。
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公开(公告)号：CN101358193A
公开(公告)日：2009-02-04
申请号：CN200810048734.1
申请日：2008-08-08
Applicant: 华中农业大学
CPC classification number: C12N15/8225 , C12N15/8266
Abstract: 本发明属于植物基因工程领域。从水稻中克隆到三个叶片衰老特异性诱导表达的启动子PSAG39、PSAG39－1600和PSAG39－493，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1，SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：5所示；所述启动子在成熟水稻叶片中有一定的表达，随着叶片衰老程度加深其表达量逐步变强，当叶片衰老程度到达晚期时表达活性达到顶点。本发明还公开了这三个启动子及其相应表达载体的制备方法，以及通过农杆菌介导的转基因方法导入水稻的应用。
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公开(公告)号：CN1924008A
公开(公告)日：2007-03-07
申请号：CN200610141702.7
申请日：2004-06-24
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明属于新植物技术领域。具体涉及一种适用于籼稻离体培养的分化培养基的制备及应用。本发明的特征是，在离体条件下先诱导籼稻外植体得到愈伤组织、再通过继代培养，最后将继代的愈伤组织转移到本发明所述的分化培养基，进而分化为完整的植株。培养基组分如下：KNO32800－3000mg/L，(NH4)2SO4350－450mg/L，KH2PO4300－400mg/L，MgSO4·7H2O180－200mg/L，CaCl2·2H2O 170－200mg/L，FeSO4·7H2O 45－55mg/L，60－74mg/L Na2EDTA，MnSO4·4H2O 80－100mg/L，ZnSO4·7H2O 15－25mg/L，H3BO325－30mg/L，KI 6.0－8.0mg/L，CuSO4·5H2O 0.2－0.3mg/L，Na2MoO4·2H2O 2.0－3.0mg/L，CoCl2·6H2O 0.2－0.3mg/L，甘氨酸2.0－3.0mg/L，VB10.5－1.0mg/L，VB61.0－1.5mg/L，烟酸1.0－1.5mg/L，肌醇100－150mg/L，谷氨酰胺300－500mg/L，脯氨酸500－800mg/L，麦芽糖30－50g/L，6－苄基氨基嘌呤2mg/L，激动素2mg/L，吲哚乙酸0.2mg/L，萘乙酸0.2mg/L，植物胶5g/L，pH为6.0。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1244697C
公开(公告)日：2006-03-08
申请号：CN02139000.2
申请日：2002-09-04
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 一种改造合成的苏云金芽胞杆菌杀虫蛋白DNA序列Cry2A。其特征在于：设计并合成了苏云金芽胞杆菌杀虫蛋白DNA序列Cry2A；与原始Cry2A DNA序列比较，该DNA序列编码蛋白的氨基酸组成不变，植物偏爱性密码子的使用频率较高，消除了原始DNA序列中的富含AT序列和存在的反向重复序列以及不明确的真核DNA序列内含子序列，C+G含量为59.04%，与原始DNA序列的同源性为69.45%。在编码序列的5’端添加有引导序列和3’端添加加尾识别信号序列。本发明的DNA序列可在植物细胞种表达，并可应用于转基因抗虫植物的育种上。
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公开(公告)号：CN1483823A
公开(公告)日：2004-03-24
申请号：CN02139081.9
申请日：2002-09-20
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 一个改造合成的编码苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白的基因CrylC*。其特征在于：通过系列方法，设计并合成一个苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因CrylC*；与原CrylCa5基因的5’端1890个核苷酸的序列比较，该基因编码蛋白的氨基酸组成不变，植物偏爱性密码子的使用频率如图2所示，消除了原始基因中的富含AT序列和存在的反向重复序列以及不明确的真核基因内含子序列，C+G含量为44.64％，与原始序列的同源性为84.0％，编码序列的5’端添加有引导序列(SEQ ID NO：3)和3’端添加加尾识别信号序列(SEQ ID NO：4)。
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公开(公告)号：CN1480533A
公开(公告)日：2004-03-10
申请号：CN02139000.2
申请日：2002-09-04
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 一种改造合成的苏云金芽胞杆菌杀虫蛋白DNA序列Cry2A。其特征在于：设计并合成了苏云金芽胞杆菌杀虫蛋白DNA序列Cry2A；与原始Cry2A DNA序列比较，该DNA序列编码蛋白的氨基酸组成不变，植物偏爱性密码子的使用频率较高，消除了原始DNA序列中的富含AT序列和存在的反向重复序列以及不明确的真核DNA序列内含子序列，C+G含量为59.04％，与原始DNA序列的同源性为69.45％。在编码序列的5’端添加有引导序列和3’端添加加尾识别信号序列。本发明的DNA序列可在植物细胞种表达，并可应用于转基因抗虫植物的育种上。
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公开(公告)号：CN1112098C
公开(公告)日：2003-06-25
申请号：CN99116561.6
申请日：1999-07-23
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 一种提高水稻产量潜力的方法，属于植物新品种选育技术领域。其特征在于：采用转基因方法将自我调节叶片抑制基因(PSAG12-IPT)导入水稻，借助报告基因、聚合酶链式反应(PCR)检测和分子杂交鉴定出转基因植株，考查后代光合性能和农艺性状，选育叶片衰老明显延缓、光合性能显著改善、单株产量较大提高的转基因株系，培育高产品种和创造育种新资源。
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公开(公告)号：CN119662698A
公开(公告)日：2025-03-21
申请号：CN202311218326.7
申请日：2023-09-19
Applicant: 华中农业大学 , 湖北洪山实验室 , 湖北稻道鸿业生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一种提高普通稻米和转基因黄金大米中类胡萝卜素含量的方法，涉及育种技术领域。本发明利用黑米作为育种材料，可以获得叶黄素和β‑胡萝卜素含量远高于一般白米或红米品种的水稻品种。利用黑米材料作为受体，将控制类胡萝卜素合成的基因转入后获得的黑色黄金大米，叶黄素和β‑胡萝卜素含量显著提高。转基因黄金大米家系Ky1‑4作为供体，黑米品种“黑帅”(HS)作为受体，进行杂交、回交和自交，获得了一个种皮为黑色的GR家系—GRB，与供体相比，GRB的糙米中β‑胡萝卜素和叶黄素的含量均显著提高，与仅优先积累β‑胡萝卜素的GR不同，GRB积累了更多的β‑胡萝卜素和叶黄素。
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