一种甘蓝型油菜核不育基因Bnms4b及制备方法和应用

    公开(公告)号:CN105441456A

    公开(公告)日:2016-03-30

    申请号:CN201510067850.8

    申请日:2015-02-09

    Abstract: 本发明公开了一种甘蓝型油菜核不育基因Bnms4b及制备方法和应用,其步骤:A、利用该基因的CDS核苷酸序列,或启动子核苷酸序列,或者编码的氨基酸序列设计开发出能扩增出该基因的引物,合成。B、利用合成的引物,从基因组、mRNA和cDNA中扩增得到本发明的基因或任何感兴趣的一段核苷酸或与其同源的一段多核苷酸。采用已经克隆的多核苷酸作探针,从cDNA和基因组文库中筛选得到本发明的基因或同源基因。方法易行,操作简便,利用引物扩增该基因,将其克隆到各种载体中,转化到甘蓝型油菜可导致稳定彻底的雄性不育并进行育种利用,利用该基因本身的序列设计特异引物,用于分子标记辅助选择,具有快速,经济,有效和准确的特点。

    一种甘蓝型油菜育性相关BnCP20基因及其应用

    公开(公告)号:CN104561061A

    公开(公告)日:2015-04-29

    申请号:CN201410828940.X

    申请日:2014-12-25

    Abstract: 本发明属于油菜基因工程技术领域,与分子育种领域有关,具体涉及一种甘蓝型油菜育性相关BnCP20基因及应用。本发明克隆得到一种花药雄性不育的甘蓝型油菜BnCP20基因,将其在拟南芥和油菜中表达,后代为雄性不育。发明特征为,扩增甘蓝型油菜总DNA,确定扩增片段序列与拟南芥中半胱氨酸蛋白酶CP基因为同源性序列,通过分离甘蓝型油菜花蕾不同时期BnCP20基因,RT-PCR检测,发现该基因只在可育的花蕾中表达。利用花药特异表达基因A9启动子构建表达载体,通过农杆菌介导的遗传转化将表达载体转化野生型拟南芥或甘蓝型油菜,得到了完全不育的转基因植株。本发明对油菜杂种优势利用具有开发利用价值。

    不结球白菜细胞质雄性不育系的选育、繁殖和制种方法

    公开(公告)号:CN103329793A

    公开(公告)日:2013-10-02

    申请号:CN201310258116.0

    申请日:2013-06-25

    Abstract: 本发明公开了一种不结球白菜细胞质雄性不育系的选育方法,它包括以下步骤:1)利用芥菜型油菜细胞质雄性不育材料hau CMS为母本,以不结球白菜自交不亲和系“矮脚黄”为父本,进行远缘杂交,分离杂交株并胚挽救培养后移栽大田获得种间杂种F1;2)选择种间杂种F1中的不育株为母本, 以“矮脚黄”为轮回亲本连续回交6代,得到不结球白菜细胞质雄性不育系。本发明选育得到的不结球白菜细胞质雄性不育系具有不育性稳定,且不受环境和遗传背景的影响等特点,连续5年10代种植并进行育性鉴定,该不育系的不育度和不育株率均为100%。

    一种甘蓝型油菜低亚麻酸分子标记及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN102433331B

    公开(公告)日:2013-05-08

    申请号:CN201110389151.7

    申请日:2009-12-28

    Abstract: 本发明属于油菜分子育种技术领域,具体涉及一种与甘蓝型油菜亚麻酸含量紧密连锁的共显性SNP分子标记的制备,及其作为标记在辅助选择低亚麻酸甘蓝型油菜中的应用。用引物扩增低亚麻酸甘蓝型油菜品系甲A254和高亚麻酸甘蓝型油菜品系甲A177基因组DNA,分别得到两个DNA扩增片段,然后对所述4个DNA扩增片段进行克隆、测序、核苷酸序列比对;根据序列的差异,将正向引物和反向引物的3’端的第2个碱基同时进行错配处理,设计了引物对YQ-fad32-1和YQ-fad32-2。将引物对YQ-fad32-1和YQ-fad32-2进行PCR扩增,PCR扩增和群体检测效果分析,进而得到与甘蓝型油菜低亚麻酸基因连锁的共显性SNP分子标记,本发明的为油菜分子育种提供了一种新标记,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:7和8所示。

    一种甘蓝型油菜粒重性状的分子标记及制备方法与应用

    公开(公告)号:CN102703438A

    公开(公告)日:2012-10-03

    申请号:CN201110374200.X

    申请日:2010-05-04

    Abstract: 本发明属于油菜分子育种领域,涉及一种甘蓝型油菜粒重的特异性分子标记及制备方法与应用。以甘蓝型油菜甲A254为母本与甘蓝型油菜甲A177为父本杂交构建双单倍体群体(DH),对该DH群体基因型和千粒重数据进行分析,获得粒重性状的QTLs位点。通过同源序列法克隆了甲A254和甲A177的MINI3和TTG2基因,根据序列差异位点设计MINI3和TTG2基因的特异分子标记MINI3a和TTG2a,将分子标记MINI3a和TTG2a定位在A5连锁群的二个粒重QTLs位点上,进行了相关的验证和应用,证明本发明制备的分子标记是一种新的遗传标记。本发明为油菜粒重的分子育种提供了新的遗传标记。

    一种甘蓝型油菜低亚麻酸分子标记及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN102433331A

    公开(公告)日:2012-05-02

    申请号:CN201110389151.7

    申请日:2009-12-28

    Abstract: 本发明属于油菜分子育种技术领域,具体涉及一种与甘蓝型油菜亚麻酸含量紧密连锁的共显性SNP分子标记的制备,及其作为标记在辅助选择低亚麻酸甘蓝型油菜中的应用。用引物扩增低亚麻酸甘蓝型油菜品系甲A254和高亚麻酸甘蓝型油菜品系甲A177基因组DNA,分别得到两个DNA扩增片段,然后对所述4个DNA扩增片段进行克隆、测序、核苷酸序列比对;根据序列的差异,将正向引物和反向引物的3’端的第2个碱基同时进行错配处理,设计了引物对YQ-fad32-1和YQ-fad32-2。将引物对YQ-fad32-1和YQ-fad32-2进行PCR扩增,PCR扩增和群体检测效果分析,进而得到与甘蓝型油菜低亚麻酸基因连锁的共显性SNP分子标记,本发明的为油菜分子育种提供了一种新标记,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:7和8所示。

    甘蓝型油菜低亚麻酸分子标记及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN101818196B

    公开(公告)日:2012-02-08

    申请号:CN200910273437.1

    申请日:2009-12-28

    Abstract: 本发明属于油菜分子育种技术领域,具体涉及一种与甘蓝型油菜亚麻酸含量紧密连锁的共显性SNP分子标记的制备,及其作为标记在辅助选择低亚麻酸甘蓝型油菜中的应用。用引物扩增低亚麻酸甘蓝型油菜品系甲A254和高亚麻酸甘蓝型油菜品系甲A177基因组DNA,分别得到两个DNA扩增片段,然后对所述4个DNA扩增片段进行克隆、测序、核苷酸序列比对;根据序列的差异,将正向引物和反向引物的3’端的第2个碱基同时进行错配处理,设计了引物对YQ-fad31-1、YQ-fad31-2、YQ-fad32-1和YQ-fad32-2。将引物对YQ-fad31-1、YQ-fad31-2、YQ-fad32-1和YQ-fad32-2进行PCR扩增,PCR扩增和群体检测效果分析,进而得到与甘蓝型油菜低亚麻酸基因连锁的共显性SNP分子标记,本发明为油菜分子育种提供了一种新标记。本发明还第一次将引物3’端错配策略应用于甘蓝型油菜SNP多态性标记的开发和检测,并第一次利用正向引物和反向引物同时错配手段在异源多倍体作物甘蓝型油菜中开发出基于PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳SNP标记。同时本发明公开了制备所述分子标记的方法及应用。

    一种从油菜籽中检测蛋白质和氨基酸的方法

    公开(公告)号:CN101936893A

    公开(公告)日:2011-01-05

    申请号:CN201010242857.6

    申请日:2010-07-30

    Abstract: 本发明公开了一种油菜籽中蛋白质及氨基酸的快速检测方法,其步骤是:A、将收获的油菜籽放入烘箱中烘干,湿度控制在103-108℃干燥,时间控制在3-5小时,然后冷却至室温;B、将冷却后的油菜籽放入近红外仪的样品盘中扫描近红外光谱,每次样品重复装样2-4次;C、将样品的2-4次测量光谱平均化计算其平均光谱;D、将样品的平均光谱代入模型中,计算出样品的粗蛋白和氨基酸的含量。方法易行,操作简便,样品前处理简单。对于油菜籽生产企业,将收获后的油菜籽在一定温度和时间快速测定。快速无损。近红外光谱的采集时间非常短,模型计算的时间基本可以忽略。多成分同时测量。可同时测量出油菜籽中粗蛋白和其他氨基酸的含量。

    甘蓝型油菜隐性上位互作核不育系的分子标记与应用

    公开(公告)号:CN101880658A

    公开(公告)日:2010-11-10

    申请号:CN201010153408.4

    申请日:2010-04-21

    Abstract: 本发明属于油菜分子标记制备领域,具体涉及甘蓝型油菜隐性核不育基因连锁的分子标记及与核不育系同源的临保系的选育。特征是,以甘蓝型油菜雄性不育两型系7-7365AB、甘蓝型油菜7-749和临保系材料7-7365C为材料构建了BnMs3,BnMs4和BnRf三个基因的近等基因系7-7365AB,7-736512AB和7-7365AC,通过筛选SSR引物和AFLP引物及转化SCAR标记,得到了与BnMs3连锁的共显性SSR分子标记SR12384;与BnMs4连锁的显性SCAR标记SM129、SM98、SM113及共显性SCAR标记SM25和H3;与BnRf连锁的共显性SSR标记D1。可用于该隐性核不育的标记辅助选择和育种,还可用于不育基因的精细定位和克隆中。

    甘蓝型油菜低亚麻酸分子标记及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN101818196A

    公开(公告)日:2010-09-01

    申请号:CN200910273437.1

    申请日:2009-12-28

    Abstract: 本发明属于油菜分子育种技术领域,具体涉及一种与甘蓝型油菜亚麻酸含量紧密连锁的共显性SNP分子标记的制备,及其作为标记在辅助选择低亚麻酸甘蓝型油菜中的应用。用引物扩增低亚麻酸甘蓝型油菜品系甲A254和高亚麻酸甘蓝型油菜品系甲A177基因组DNA,分别得到两个DNA扩增片段,然后对所述4个DNA扩增片段进行克隆、测序、核苷酸序列比对;根据序列的差异,将正向引物和反向引物的3’端的第2个碱基同时进行错配处理,设计了引物对YQ-fad31-1、YQ-fad31-2、YQ-fad32-1和YQ-fad32-2。将引物对YQ-fad31-1、YQ-fad31-2、YQ-fad32-1和YQ-fad32-2进行PCR扩增,PCR扩增和群体检测效果分析,进而得到与甘蓝型油菜低亚麻酸基因连锁的共显性SNP分子标记,本发明为油菜分子育种提供了一种新标记。本发明还第一次将引物3’端错配策略应用于甘蓝型油菜SNP多态性标记的开发和检测,并第一次利用正向引物和反向引物同时错配手段在异源多倍体作物甘蓝型油菜中开发出基于PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳SNP标记。同时本发明公开了制备所述分子标记的方法及应用。

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