一种牛DDX58基因的单碱基/氨基酸突变在抗结核病中的应用

    公开(公告)号:CN118621023A

    公开(公告)日:2024-09-10

    申请号:CN202410819599.5

    申请日:2024-06-24

    Abstract: 本发明公开了一种牛DDX58基因的单碱基/氨基酸突变在抗结核病中的应用,属于牛结核病防治技术领域,一种牛DDX58基因的单碱基突变在抗结核病中的应用,所述牛DDX58基因的CDS序列如SEQ ID NO.1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述单碱基突变位于牛基因组ARS‑UCD1.2版本参考序列8号染色体上5′端起第11603839个核苷酸。本发明提供的牛DDX58基因的单碱基突变对I型干扰素的生成量以及巨噬细胞对结核分枝杆菌的清除效果具有显著影响,与牛抗结核病性状高度连锁;提供的牛DDX58基因的单碱基/氨基酸突变可以作为牛结核病抗性连锁位点,用于牛结核病抗性育种中基因型选育,进而简化选育方法、缩短选育时间。

    一种提高牛体外受精胚的发育质量的培养液和培养方法

    公开(公告)号:CN109628382B

    公开(公告)日:2019-10-29

    申请号:CN201910049351.4

    申请日:2019-01-18

    Abstract: 本发明公开了一种提高牛体外受精胚的发育质量的培养液,培养液中包括以下添加剂:胰岛素‑转铁蛋白‑硒添加剂、β‑巯基乙醇、亚牛磺酸、1‑油酰基‑sn‑甘油‑3‑磷酸钠盐和红景天苷。并且公开了使用该培养液提高牛体外受精胚的发育质量的培养方法。应用本发明培养液及培养方法有效提高牛体外受精胚胎的发育率和发育质量。

    一种牛的胚胎移植液及其使用方法

    公开(公告)号:CN110331129A

    公开(公告)日:2019-10-15

    申请号:CN201910551211.7

    申请日:2019-06-24

    Abstract: 本发明公开了一种牛的胚胎移植液及其使用方法,牛的胚胎移植液包括SOF基础培养基,还包括以下添加剂:4-羟乙基哌嗪乙磺酸、碳酸氢钠、胰岛素-转铁蛋白-硒添加剂、β-巯基乙醇、亚牛磺酸、1-油酰基-sn-甘油-3-磷酸钠盐、L-瓜氨酸和红景天苷。采用本发明的胚胎移植液可有效提高牛胚胎移植后的怀孕率。

    一种同时定点整合FAD3和FABP4基因的载体及重组细胞

    公开(公告)号:CN110283847A

    公开(公告)日:2019-09-27

    申请号:CN201910482661.5

    申请日:2019-06-04

    Abstract: 本发明公开了一种同时定点整合FAD3和FABP4基因的载体及重组细胞,利用电穿孔的方法将靶向Rosa26基因的Cas9切割载体和打靶载体共转染鲁西黄牛胎儿成纤维细胞,实现将FAD3和FABP4基因同时定点插入到鲁西黄牛胎儿成纤维细胞基因组中;通过Junction PCR筛选和验证获得了打靶阳性克隆细胞;以本发明定点插入外源基因的阳性细胞为供核细胞移入去核的牛成熟卵母细胞中,获得转基因克隆胚胎,进一步将克隆胚胎移植到受体牛体内,可获得所期望的转基因牛。本发明为快速、高效研制优质转基因肉牛育种新材料提供了供核细胞和技术方法。

    一种基于TALEN介导的Sp110巨噬细胞特异打靶载体及重组细胞

    公开(公告)号:CN104293833B

    公开(公告)日:2017-10-10

    申请号:CN201410528091.6

    申请日:2014-10-09

    Abstract: 本发明公开了一种基于TALEN介导的Sp110巨噬细胞特异打靶载体及重组细胞,对牛胎儿成纤维细胞进行基因打靶获得的M‑S位点定点敲入Sp110基因的牛胎儿成纤维细胞。利用打靶载体中的MSR1启动子,使得定点敲入的Sp110在且仅在牛的外周血巨噬细胞中正常转录和表达。本发明利用电穿孔的方法将打靶载体和TALEN位点特异性核酸切割酶表达载体共转染牛胎儿成纤维细胞,通过PCR和Southern Blotting筛选和验证获得了打靶的阳性克隆细胞。以该阳性克隆细胞为核供体移入牛去核卵母细胞,获得转基因克隆胚胎。将转基因克隆胚胎移植到发情的受体牛子宫中,最终生产成活的转基因克隆牛。

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