公开(公告)号：CN108103011A

公开(公告)日：2018-06-01

申请号：CN201810134698.4

申请日：2018-02-09

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 张景程 ,  张涌 ,  马晓楠 ,  张敏 ,  王勇胜

IPC: C12N5/075

CPC classification number: C12N5/0609 ,  C12N2500/25 ,  C12N2501/11 ,  C12N2501/115 ,  C12N2501/21 ,  C12N2501/31 ,  C12N2501/392

Abstract: 本发明提供一种牛卵母细胞体外成熟培养液及培养方法，成熟培养液包括10％的胎牛血清和1％的ITS‑G，并含有0.075IU/mL的HMG、1μg/mL的17β‑雌二醇、10ng/mL的EGF、2.2mg/mL的bFGF和50ng/mL的CXCL12。利用上述培养液进行牛卵母细胞体外成熟培养，可以提高牛卵母细胞体外培养的成熟质量、体外受精胚胎发育率和体细胞核移植胚胎发育率和囊胚质量。

公开(公告)号：CN107619837A

公开(公告)日：2018-01-23

申请号：CN201710855259.8

申请日：2017-09-20

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 张涌 ,  袁梦珂 ,  高元鹏 ,  韩静 ,  马晓楠 ,  吴腾

IPC: C12N15/867 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种利用Cas9切割核酸酶介导Ipr1定点插入获取转基因牛胎儿成纤维细胞的方法，本发明通过电穿孔的方法将供体载体和针对打靶位点的CRISPR/Cas9表达载体共转染牛胎儿成纤维细胞，供体载体中MSR1启动子可以使Ipr1实现在专职吞噬性细胞中的特异性表达，嘌呤霉素药物筛选后，经过PCR鉴定获得打靶的阳性克隆细胞。以该转基因阳性克隆细胞为核供体，获得转基因克隆胚胎，进一步将转基因克隆胚胎移植到发情的受体牛子宫内，最终获得成活的Ipr1定点插入转基因克隆牛。

公开(公告)号：CN108103011B

公开(公告)日：2019-02-01

申请号：CN201810134698.4

申请日：2018-02-09

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 张景程 ,  张涌 ,  马晓楠 ,  张敏 ,  王勇胜

IPC: C12N5/075

Abstract: 本发明提供一种牛卵母细胞体外成熟培养液及培养方法，成熟培养液包括10％的胎牛血清和1％的ITS‑G，并含有0.075IU/mL的HMG、1μg/mL的17β‑雌二醇、10ng/mL的EGF、2.2mg/mL的bFGF和50ng/mL的CXCL12。利用上述培养液进行牛卵母细胞体外成熟培养，可以提高牛卵母细胞体外培养的成熟质量、体外受精胚胎发育率和体细胞核移植胚胎发育率和囊胚质量。