变异黄嘌呤脱氢酶及其应用

    公开(公告)号:CN108624568B

    公开(公告)日:2021-09-14

    申请号:CN201710152663.9

    申请日:2017-03-15

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种变异黄嘌呤脱氢酶及其应用。本发明的变异黄嘌呤脱氢酶是将野生变异黄嘌呤脱氢酶进行如下任一突变后获得的:1)在野生变异黄嘌呤脱氢酶的α亚基的D358与E359位之间插入一段长度由QDISAVCYKLSKRFE组成的15各氨基酸多肽片段;2)将野生变异黄嘌呤脱氢酶的α亚基进行F270L突变;3)将野生变异黄嘌呤脱氢酶的α亚基进行S362A突变。本发明的变异黄嘌呤脱氢酶的黄嘌呤氧化酶活性显著增强,与野生型黄嘌呤脱氢酶相比,利用空气中氧气作为电子受体,催化氧化黄嘌呤底物的活性分别增加2125倍,63倍和122倍,可降低生产成本,更加适用于工业化生产应用。

    一种DNA检测方法
    74.
    发明公开

    公开(公告)号:CN112941153A

    公开(公告)日:2021-06-11

    申请号:CN202011434917.4

    申请日:2020-12-10

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明涉及一种DNA检测方法,包括:利用含有Cas12a/crRNA复合物的反应体系与含有待测dsDNA的样品进行反应,所述dsDNA含有PAM序列;将与所述样品反应后的反应体系添加至经非目标ssDNA连接的磁颗粒体系;检测磁颗粒体系磁信号的变化,其中,待测dsDNA特异性识别Cas12a/crRNA复合物从而激活Cas12a/crRNA复合物的切割非目标ssDNA的活性。本发明所涉及的方法将CRISPR‑Cas12a的精准靶向能力和TMR生物传感器的超高灵敏度的优点相结合,克服了传统方法中光学信号抗干扰能力差的缺点,且获得了更高的灵敏度。此外,由于crRNA的设计中与靶序列互补的20个碱基是可编程的,TMR传感器的样品需求量小,成本低。因此,具有很高的应用和商业价值。

    一种黄嘌呤脱氢酶及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN105734027B

    公开(公告)日:2019-03-05

    申请号:CN201410764840.5

    申请日:2014-12-11

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种黄嘌呤脱氢酶及其编码基因与应用。本发明公开一种蛋白,该蛋白是由如下(1)所示的蛋白质和/或(2)所示的蛋白质组成:(1)SEQ ID No.4所示的蛋白质或将SEQ ID No.4所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白质;(2)SEQ ID No.5所示的蛋白质或将SEQ ID No.5所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白质。本发明公开的黄嘌呤脱氢酶有利于与其他酶类联用进一步开发新的应用领域,尤其适合于样品检测和工业化应用等商业化应用的需求。

    变异黄嘌呤脱氢酶及其应用

    公开(公告)号:CN108624568A

    公开(公告)日:2018-10-09

    申请号:CN201710152663.9

    申请日:2017-03-15

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种变异黄嘌呤脱氢酶及其应用。本发明的变异黄嘌呤脱氢酶是将野生变异黄嘌呤脱氢酶进行如下任一突变后获得的:1)在野生变异黄嘌呤脱氢酶的α亚基的D358与E359位之间插入一段长度由QDISAVCYKLSKRFE组成的15各氨基酸多肽片段;2)将野生变异黄嘌呤脱氢酶的α亚基进行F270L突变;3)将野生变异黄嘌呤脱氢酶的α亚基进行S362A突变。本发明的变异黄嘌呤脱氢酶的黄嘌呤氧化酶活性显著增强,与野生型黄嘌呤脱氢酶相比,利用空气中氧气作为电子受体,催化氧化黄嘌呤底物的活性分别增加2125倍,63倍和122倍,可降低生产成本,更加适用于工业化生产应用。

    精品硫酸软骨素A和C和制备精品硫酸软骨素A和C的方法

    公开(公告)号:CN104140472B

    公开(公告)日:2017-11-28

    申请号:CN201410190564.6

    申请日:2014-05-07

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明涉及一种精品硫酸软骨素A和C和制备精品硫酸软骨素A和C的方法。其中制备精品硫酸软骨素A和C的方法包括:向含硫酸软骨素A和C成分的硫酸软骨素混合物的溶液中加入硫酸软骨素酶B,使其与含硫酸软骨素A和C的硫酸软骨素混合物中的硫酸皮肤素成分反应。

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