微生物转化异丁香酚制备香草醛的菌种和方法

    公开(公告)号:CN1712518A

    公开(公告)日:2005-12-28

    申请号:CN200510064494.0

    申请日:2005-04-19

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一株从土壤中筛选获得的纺锤芽孢杆菌(Bacillus fusiformis)CGMCC1347(SW-B9)及其培养发酵,并用于转化异丁香酚制备香草醛的方法。在优化条件下发酵培养,发酵液或游离细胞或其固定化细胞用于异丁香酚转化24~96小时,转化液中含香草酸2~4g/L;在水-有机溶剂双相体系中进行转化反应72小时,有机相中香草醛浓度达到最高32.5g/L。转化液中的香草醛用树脂吸附和乙酸乙酯等溶剂萃取,得到淡黄色粉状结晶香草醛,提取得率为87%,产品纯度为98.1%。用树脂吸附和正己烷洗脱方法回收未反应的异丁香酚,回收率为93.4%。

    一种甘蔗渣微晶纤维素固定化酶聚砜膜填充床反应器

    公开(公告)号:CN119685158A

    公开(公告)日:2025-03-25

    申请号:CN202411887147.7

    申请日:2024-12-20

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种甘蔗渣微晶纤维素固定化酶聚砜膜填充床反应器,属于生物技术领域。本发明的固定化D‑泛解酸内酯水解酶填充床反应器不采用商品化固定化酶,依靠酶与吸附剂发生物理吸附作用或弱化学吸附作用,有效提高酶活性,并且反应中酶不易漏出,也不造成额外的环境污染。此外,原酶反应装置和外循环准固定化酶反应装置可同时反应,不改变已有的所有工艺参数,极大的提高反应速度。反应器在重复使用10次后保留28%以上的水解率,固定化酶在4℃储存180d后保留90%以上的初始酶活。本发明使生产成本大幅降低,无需反复拆卸安装,因而也节约了拆装时间,提高了生产效率,产生良好的经济和社会效益。

    一种方解石形碳酸钙原位固定化酶的制备方法

    公开(公告)号:CN114634924A

    公开(公告)日:2022-06-17

    申请号:CN202210361465.4

    申请日:2022-04-07

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提供了一种方解石形碳酸钙原位固定化酶的制备方法。本发明的具体方法为:(1)将酶溶液和氯化钙水溶液搅拌混合,同时以2‑8mL/min的速度加入碳酸钠水溶液;(2)将步骤(1)中混合溶液的搅拌速度提高至300‑600r/min,继续搅拌,随后进行离心;(3)待步骤(2)离心结束取固相1,并将所得固相1清洗3‑5次,得到共沉淀颗粒;(4)将步骤(3)中所得共沉淀颗粒重悬至交联剂中,之后离心取固相2,即得到固定化酶微粒;(5)向步骤(4)得到固定化酶微粒加入模板去除剂,震荡洗涤,随后离心取固相3并清洗,最终实现方解石形碳酸钙原位固定化酶。制备路线易操作、具有通用性,所制得固定化酶形态均匀。

    一种耐热植酸酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN112626048B

    公开(公告)日:2022-02-01

    申请号:CN202011519196.7

    申请日:2020-12-21

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种耐热植酸酶突变体及其应用,属于酶工程领域。通过随机突变的方法对来源于大肠杆菌Escherichia coli植酸酶基因appA进行改造,多轮筛选得到一种突变体蛋白,其氨基酸序列为SEQ ID NO:3。本发明筛选得到的植酸酶突变体appA‑M最适pH为4.5,最适温度为65℃,在90℃处理10min后保留30%的酶活。与野生酶相比,植酸酶突变体appA‑M的热稳定性得到显著提高。所述植酸酶突变体可以广泛应用于猪禽饲料中,从而有利于减少饲料制粒过程中酶活力的损失,降低饲料成本,同时还能降低磷排放对环境的污染。

    一种拟无枝酸菌的基因工程菌及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN113061560A

    公开(公告)日:2021-07-02

    申请号:CN202110263396.9

    申请日:2021-03-11

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种拟无枝酸菌的基因工程菌及其构建方法与应用,属于基因工程技术领域。本发明利用CRISPR/Cas9编辑系统,在产香草醛的拟无枝酸菌中进行基因敲除的方法,该方法将含有Vdh基因同源臂的CRISPR/Cas9编辑质粒pLYZYP01引入拟无枝酸菌CCTCCM 2011265中,实现vdh基因敲除,所获基因工程菌株Amycolatopsis sp.Δvdh在添加12g/L底物阿魏酸的情况下,香兰素产量达到9.19g/L,摩尔转化率97.7。表现出良好的工业应用价值。

    黑曲霉、其α-L-鼠李糖苷酶制备方法及质粒载体及重组菌

    公开(公告)号:CN108587926B

    公开(公告)日:2021-02-23

    申请号:CN201810437103.2

    申请日:2018-05-09

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了黑曲霉、其α‑L‑鼠李糖苷酶制备方法及质粒载体及重组菌,所述α‑L‑鼠李糖苷酶来源于所述黑曲霉,所述α‑L‑鼠李糖苷酶核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过筛选获得水解柚皮苷的菌株黑曲霉WDQ‑1,并从其中获取了编码α‑L‑鼠李糖苷酶的基因,通过毕赤酵母高密度发酵,获得大量的α‑L‑鼠李糖苷酶,本发明构建重组菌毕赤酵母GS115/pPIC9K‑rha和GS115‑rha+vgb‑3,在3‑L发酵罐高密度发酵,发酵液产酶活性达到19000U/mL以上,展现良好的工业化前景。

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