一株L-瓜氨酸合成菌的构建及其应用方法

    公开(公告)号:CN104195162A

    公开(公告)日:2014-12-10

    申请号:CN201410191483.8

    申请日:2014-05-08

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明敲除钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)SYPA5-5中编码精胺琥珀酸合成酶(Argininosuccinate synthase,ASS)的argG基因,对获得的重组菌株进行发酵产L-瓜氨酸的研究,属于生物技术领域。首先,构建argG基因内缺失片段(△argG),连接至pK18mobsacB中获得重组质粒pK18mobsacB△argG,将其电转入SYPA5-5中,经两次同源重组,筛选获得重组菌株SYPA5-5△argG。其次,考察不同浓度L-精氨酸对重组菌株生长及发酵产L-瓜氨酸的影响,发现添加L-精氨酸有利于菌体生长但不利于L-瓜氨酸积累。在不添加L-精氨酸条件下,重组菌株利用糖质原料,发酵96h,可积累15.2g/LL-瓜氨酸,糖酸转化效率为0.15g(L-citrulline)/g(glucose)。

    过量共表达磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶提高钝齿棒杆菌精氨酸产量

    公开(公告)号:CN104031934A

    公开(公告)日:2014-09-10

    申请号:CN201410249910.3

    申请日:2014-06-05

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)SYPA5-5是通过传统诱变育种手段获得的高产精氨酸菌株,该菌株具有独立知识产权。本专利以SYPA5-5基因组DNA为模板,扩增得到编码磷酸果糖激酶的基因pfk和丙酮酸激酶的基因pyk,将两者串联到表达载体pDXW-10上,电击转化到C.crenatum SYPA5-5中,构建得到基因工程菌SYPA5-5/pDXW-10-pfk-pyk。该工程菌中磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶同时得到加强表达,提高了EMP途径代谢强度,增加了葡萄糖消耗,工程菌在5L发酵罐发酵96h精氨酸产量为48.7g·L-1,比原始菌提高了27.5%。这是首次在钝齿棒杆菌中通过串联加强表达磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶提高精氨酸的发酵产量。

    一株L-鸟氨酸合成菌的构建及其应用方法

    公开(公告)号:CN104031933A

    公开(公告)日:2014-09-10

    申请号:CN201410191782.1

    申请日:2014-05-08

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明敲除钝齿棒杆菌(Corynebacteriumcrenatum)SYPA5-5中编码鸟氨酸乙酰转移酶(Ornithinecarbamoyltransferase,OTC)的argF基因,对获得的重组菌株进行发酵产L-鸟氨酸的研究,属于生物技术领域。首先,构建argF基因内缺失片段(△argF),连接至pK18mobsacB中获得重组质粒pK18mobsacB△argF,将其电转入SYPA5-5中,经两次同源重组,筛选获得重组菌株SYPA5-5△argF。其次,考察不同营养条件对重组菌株生长及L-鸟氨酸积累的影响,发现添加0.3g/LL-精氨酸可满足SYPA5-5△argF的生长及L-鸟氨酸积累所需,利用糖质原料,发酵96h,L-鸟氨酸产量可达21.5g/L,糖酸转化效率为0.17g(L-ornithine)/g(glucose)。

    一种苦味酸天狼猩红染色法及其在筛选抗肝纤维化化合物中的应用

    公开(公告)号:CN103234928A

    公开(公告)日:2013-08-07

    申请号:CN201310143535.X

    申请日:2013-04-24

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及利用胶原纤维的苦味酸天狼猩红染色法高通量筛选抗肝纤维化的有效化合物,所用细胞为肝星状细胞系CFSC-8B。转化生长因子TGF-β-1在剂量为10ng/mL,作用时间48h时可显著诱导CFSC-8B细胞分泌胶原,利用苦味酸天狼猩红染色法可有效检测TGF-β1诱导CFSC-8B细胞胶原的分泌。使用胶原纤维的苦味酸天狼猩红染色法筛选樟芝,灵芝,虫草头孢,虫草被孢,天麻蜜环和猴头菌粉不同极性提取物中具有抗肝纤维化活性的化合物,试验表明樟芝正己烷和氯仿提取物,虫草被孢乙酸乙酯提取物,天麻蜜环正己烷、氯仿、乙酸乙酯提取物可显著抑制TGF-β1诱导CFSC-8B细胞胶原的分泌,且具有剂量依赖关系,差异显著,具有抗肝纤维化作用,而其他提取物无显著性抑制效应。

    一种用于肠道菌群培养的反应器

    公开(公告)号:CN209113909U

    公开(公告)日:2019-07-16

    申请号:CN201821706571.7

    申请日:2018-10-22

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本实用新型公开了一种用于肠道菌群培养的反应器,属于微生物学技术领域。本实用新型反应器包括保温装置、发酵装置、进料装置、出料装置;发酵装置置于保温装置内;发酵装置包括小肠模拟管道、盲肠模拟管道、结肠模拟管道和直肠模拟管道,小肠模拟管道和结肠模拟管道为螺旋状中空管道,小肠模拟管道的一端连接有第一混合池,第一混合池与进料装置通过相连接,小肠模拟管道、盲肠模拟管道和结肠模拟管道通过第二混合池相连通,结肠模拟管道与直肠模拟管道相连通;直肠模拟管道另一端与出料装置相连接。经检测表明人或动物(小鼠)的肠道菌群不仅能在系统中稳定生长,且优势菌占比和主要的代谢产物(SCFA)的浓度也与原接种物相似。(ESM)同样的发明创造已同日申请发明专利

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