公开(公告)号：CN104031934A

公开(公告)日：2014-09-10

申请号：CN201410249910.3

申请日：2014-06-05

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  徐美娟 ,  许正宏 ,  张显 ,  杨套伟 ,  耿燕 ,  卢妍

IPC: C12N15/77 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  C12P13/10 ,  C12R1/15

Abstract: 钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)SYPA5-5是通过传统诱变育种手段获得的高产精氨酸菌株，该菌株具有独立知识产权。本专利以SYPA5-5基因组DNA为模板，扩增得到编码磷酸果糖激酶的基因pfk和丙酮酸激酶的基因pyk，将两者串联到表达载体pDXW-10上，电击转化到C.crenatum SYPA5-5中，构建得到基因工程菌SYPA5-5/pDXW-10-pfk-pyk。该工程菌中磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶同时得到加强表达，提高了EMP途径代谢强度，增加了葡萄糖消耗，工程菌在5L发酵罐发酵96h精氨酸产量为48.7g·L-1，比原始菌提高了27.5％。这是首次在钝齿棒杆菌中通过串联加强表达磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶提高精氨酸的发酵产量。