毕赤酵母工程菌及生产偏甘油酯脂肪酶的方法

    公开(公告)号:CN118755597A

    公开(公告)日:2024-10-11

    申请号:CN202410861203.3

    申请日:2024-06-28

    Abstract: 本发明公开了一株毕赤酵母工程菌及生产偏甘油酯脂肪酶的方法,毕赤酵母工程菌Pichiapastoris YM‑L001,其保藏编号为GDMCC No:62669,将所述毕赤酵母工程菌的二级种子液接种至改良BSM培养基中,在24℃~32℃下,控制溶氧大于30%,搅拌发酵;发酵18~20h后,调节pH至5.8~7.0,补加甘油补料培养基,并添加表面活性剂;在24℃~32℃下继续发酵;结束发酵,离心收集发酵上清液。本发明利用毕赤酵母工程菌Pichiapastoris YM‑L001生产偏甘油酯脂肪酶的方法,发酵过程控制简单,能够稳定、高效、安全的生产偏甘油酯脂肪酶,具有重要的工业应用潜力。

    一种高纯度甘油磷酸二酯的制备方法

    公开(公告)号:CN112877377B

    公开(公告)日:2023-02-14

    申请号:CN202110053622.0

    申请日:2021-01-15

    Abstract: 本发明属于酶的基因工程技术领域,公开了一种高纯度甘油磷酸二酯的制备方法,以溶血磷脂为原料,以金属离子螯合剂处理的pfGDPD为催化剂,在水相体系中水解溶血磷脂,得到甘油磷酸二酯产物;所述pfGDPD的氨基酸序列为SEQID No:1。本发明从溶血磷脂出发,通过单一酶法水解一步可制备获得高纯度的甘油磷酸二酯(如GPC,GPE,GPI等),转化率接近100%。本发明为甘油磷酸二酯的生产提供了一种新的思路和方法。

    一种亚硝酸盐还原酶突变体及其编码基因和应用

    公开(公告)号:CN114574456B

    公开(公告)日:2022-08-12

    申请号:CN202210271535.7

    申请日:2022-03-18

    Abstract: 本发明涉及一种亚硝酸盐还原酶突变体及其编码基因和应用,所述亚硝酸盐还原酶突变体是对植物乳杆菌的亚硝酸盐还原酶完整亲本序列基础上,删除蛋白序列中1‑16位氨基酸和533‑545位氨基酸且在原有亲本序列基础上通过突变引入二硫键所得,其氨基酸序列为SEQ ID NO:49,其对应编码基因序列为SEQ ID NO:50。本发明制备得到的亚硝酸盐还原酶突变体相比野生型酶蛋白酶活力分别提高10倍,且在该酶最适反应温度条件下的半衰期提高9倍,表达量提升2.5倍。在食品、环保等领域将具有广泛应用前景。

    酶法合成芳香族酮类香料化合物的方法

    公开(公告)号:CN114774479A

    公开(公告)日:2022-07-22

    申请号:CN202210575134.0

    申请日:2022-05-24

    Abstract: 本发明涉及一种酶法合成芳香族酮类香料化合物的方法,包括如下步骤:在氯化胆碱的存在下,芳香仲醇在非特异性过氧合酶和胆碱氧化酶的共同催化下进行氧化反应,即得所述芳香族酮类香料化合物。本发明的酶法合成芳香族酮类香料化合物的方法既能利用氯化胆碱原位产生H2O2,维持体系中H2O2浓度在可高效催化且不破坏酶活性的稳定水平;同时拓宽了UPO的催化应用范围,合成了一系列高价值的芳香族酮类香料化合物。本发明方法的反应条件温和,操作简单,且无需使用大量有毒有害有机试剂,副产物仅仅为水,绿色环保,为芳香族酮类香料的合成提供了一条全新的生物酶级联催化路径。

    一种酶法合成芳香族醛类香料化合物的方法

    公开(公告)号:CN114774478A

    公开(公告)日:2022-07-22

    申请号:CN202210573227.X

    申请日:2022-05-24

    Abstract: 本发明涉及一种酶法合成芳香族醛类香料化合物的方法,包括如下步骤:芳香醇在芳基醇氧化酶与非特异性过氧合酶的共同催化下进行氧化反应,即得所述芳香族醛类香料化合物。本发明首次将“PeAAOx偶联AaeUPO”级联催化反应应用于制备芳香族醛类香料化合物,该方法在消除H2O2潜在危害的同时,两种酶具有协同增效的作用,大大提高了酶催化效果,提高了底物转化率和产物醛的收率。本发明的酶法合成芳香族醛类香料化合物的方法在催化过程中不依赖于昂贵的烟酰胺辅助因子,而只需分子氧作为最终电子受体,副产物仅仅为水,反应条件温和,操作简单,且无需使用大量有毒有害有机试剂,绿色环保。

    一种亚硝酸盐还原酶突变体及其编码基因和应用

    公开(公告)号:CN114574456A

    公开(公告)日:2022-06-03

    申请号:CN202210271535.7

    申请日:2022-03-18

    Abstract: 本发明涉及一种亚硝酸盐还原酶突变体及其编码基因和应用,所述亚硝酸盐还原酶突变体是对植物乳杆菌的亚硝酸盐还原酶完整亲本序列基础上,删除蛋白序列中1‑16位氨基酸和533‑545位氨基酸且在原有亲本序列基础上通过突变引入二硫键所得,其氨基酸序列为SEQ ID NO:49,其对应编码基因序列为SEQ ID NO:50。本发明制备得到的亚硝酸盐还原酶突变体相比野生型酶蛋白酶活力分别提高10倍,且在该酶最适反应温度条件下的半衰期提高9倍,表达量提升2.5倍。在食品、环保等领域将具有广泛应用前景。

    一种鞘磷脂酶D突变体及其应用

    公开(公告)号:CN112662645B

    公开(公告)日:2022-04-22

    申请号:CN202110067084.0

    申请日:2021-01-19

    Abstract: 本发明属于酶的基因工程技术领域,本发明公开了一种鞘磷脂酶D突变体及其应用,所述的鞘磷脂酶D突变体是以来自Loxoscelesarizonica的鞘磷脂酶D(Laz‑SMD)(氨基酸序列SEQ ID NO:1)的亲本序列基础上突变第78位的半胱氨酸或第84位的半胱氨酸。本发明改造获得的Laz‑SMD突变体水解溶血磷脂底物改变了原有反应只产环状磷脂酸(cPA)的特点,转而只反应产生溶血磷脂酸,本发明提供了一种利用Laz‑SMD水解溶血磷脂生产溶血磷脂酸的方法,进一步提升了该酶在药物领域的利用价值。

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