多基因载体的构建方法与应用

    公开(公告)号:CN1263860C

    公开(公告)日:2006-07-12

    申请号:CN02134869.3

    申请日:2002-09-30

    Inventor: 刘耀光

    CPC classification number: C12N15/10 C12N15/64 C12N15/66

    Abstract: 本发明提供了一个多基因组装载体系统及其多基因组装方法。本载体系统由1个接受载体和至少2个供给载体组成,利用特异重组方法使不同的供给载体交替地和接受载体进行多轮的基因组装,构建成多基因载体。本发明解决了用现有方法构建多基因载体的技术障碍,可应用于基因工程领域中的多基因载体和大型载体的构建,用于多个基因的转化以获得多种基因工程产物和多基因表达性状。

    多基因载体的构建方法与应用

    公开(公告)号:CN1427079A

    公开(公告)日:2003-07-02

    申请号:CN02134869.3

    申请日:2002-09-30

    Inventor: 刘耀光

    CPC classification number: C12N15/10 C12N15/64 C12N15/66

    Abstract: 本发明提供了一个多基因组装载体系统及其多基因组装方法。本载体系统由1个接受载体和至少2个供给载体组成,利用特异重组方法使不同的供给载体交替地和接受载体进行多轮的基因组装,构建成多基因载体。本发明解决了用现有方法构建多基因载体的技术障碍,可应用于基因工程领域中的多基因载体和大型载体的构建,用于多个基因的转化以获得多种基因工程产物和多基因表达性状。

    一种靶向编辑水稻OsPLATZ1基因在改良水稻粒型和产量中的应用

    公开(公告)号:CN118910148A

    公开(公告)日:2024-11-08

    申请号:CN202411325470.5

    申请日:2024-09-23

    Abstract: 本发明属于基因工程育种技术领域,具体公开了一种靶向编辑水稻OsPLATZ1基因在改良水稻粒型和产量中的应用,利用CRISPR/Cas基因组编辑技术对水稻OsPLATZ1基因的启动子区和5’UTR区部分进行位点特异性突变,创建水稻OsPLATZ1基因表达水平改变的突变系,改变了水稻突变系的穗发育相关OsPLATZ1基因相对表达量。与野生型籼稻品种华光相比,快速有效地获得了粒长、长宽比、每穗粒数和千粒重均有改变的水稻新品系;满足了人们对水稻粒型的偏好性,同时打破了水稻粒型和粒数的相互制约,获得产量大幅度提高的优良株系,在育种应用方面紧扣产量难题看,为水稻的高产育种提供重要的种质资源。

    优化的玉米rZmG2基因及其在提高植物遗传转化效率中的应用

    公开(公告)号:CN114736912B

    公开(公告)日:2023-05-26

    申请号:CN202210296049.0

    申请日:2022-03-24

    Abstract: 本发明公开了经密码子优化的玉米rZmG2基因及其在提高植物遗传转化效率中的应用,并基于此提供了一种提高植物遗传转化效率的技术体系,包括含有所述优化rZmG2基因的重组载体、表达盒或重组菌在提高植物转化效率的应用。本发明同时提供了包含rZmG2基因的热激诱导的自删除载体结构,其为基于Cre/loxP的基因删除重组载体、表达盒或重组菌,用于删除转基因植株中的rZmG2基因和潮霉素筛选标记,或其他外源基因和筛选标记。本发明将优化的rZmG2基因通过植物表达载体以基因工程手段整合到植物染色体上,能显著提高植物的遗传转化效率。且利用本发明技术体系获得的转基因植株,可通过热激诱导的Cre/loxp基因删除系统自动删除rZmG2基因和筛选标记基因,从而避免转基因对植株后续生长发育的可能影响。

    一个茎、茎尖和小穗强表达启动子Pssi的分离及其应用

    公开(公告)号:CN114350666B

    公开(公告)日:2023-05-16

    申请号:CN202210096617.2

    申请日:2022-01-26

    Abstract: 本发明提供了一个茎、茎尖和小穗强表达启动子Pssi的分离及其应用。本发明分离克隆了一个茎、茎尖和小穗强表达启动子Pssi并通过表达分析和组织染色对其启动子活性进行鉴定,进一步利用Pssi控制Cas9核酸酶的表达,开发出CRISPR/Cas9介导同源定向修复的无筛选标记系统。本发明表明,在转基因植物中,Pssi启动子可以驱动Cas9核酸酶在茎、茎尖和小穗高表达,而在愈伤组织、根、叶等器官中低表达或不表达;该系统能在单子叶植物中高效去除筛选标记基因,在T1代中即可获得大量的标记基因纯合删除植株,其筛选标记被完全删除的效率为55.6%,可以在转基因植物的后代中获取大量的无筛选标记基因植株。

    一种鉴定水稻育性恢复基因Rf4单倍型的SNP分子标记及其在恢复水稻育性中的应用

    公开(公告)号:CN115961077A

    公开(公告)日:2023-04-14

    申请号:CN202211566779.4

    申请日:2022-12-07

    Abstract: 本发明公开了一种鉴定水稻育性恢复基因Rf4单倍型的SNP分子标记及其在恢复水稻育性中的应用。本发明发现了水稻野败型细胞质雄性不育育性恢复基因Rf4存在拷贝数变异和序列碱基变异,共存在7种等位基因型序列,8种单倍型,其中包括5种单拷贝单倍型:rf4j,rf4i,rf4aus,Rf4aI,和Rf4bM,以及3种双拷贝单倍型:Rf4aI‑rf4b、rf4a‑Rf4bM和Rf4aM‑Rf4bM。本发明基于这些等位基因型序列及SNP变异,开发了一套分子标记,实现筛选和鉴定水稻品种目的,筛选含有Rf4aM‑Rf4bM双拷贝单倍型的强恢复力水稻,通过与不育系杂交,加速强恢复力恢复系的选育和鉴定。

    一种愈伤组织特异启动子Pcsp及其应用

    公开(公告)号:CN114657179B

    公开(公告)日:2022-11-15

    申请号:CN202210181702.9

    申请日:2022-02-25

    Abstract: 本发明提供了一种愈伤组织特异强启动子Pcsp,涉及植物生物技术及基因工程领域。本发明成功分离并克隆了一种愈伤组织特异强启动子Pcsp,克服了现有技术利用组成型启动子驱动标记基因,表达活性不高或特异性较低的不足。本发明还提供了在本启动子Pcsp的应用。该Pcsp启动子可以用来构建植物遗传转化和基因编辑载体,可以驱动标记基因、Cas核酸酶编码基因或特定功能基因在愈伤组织中特异高水平表达,表达水平约为组成型启动子P35S所驱动GUS的4倍;不影响转基因阳性植株正常生长的情况下,在植株组织器官中不表达,具有特异性,更安全,可解决生物安全方面的担忧;在基因编辑实验中周期短、成本低、灵敏度高,在植物遗传转化和基因工程领域具有很好的应用前景。

    一种新型水稻高温可逆不育系及两系杂交稻制种体系

    公开(公告)号:CN113728911B

    公开(公告)日:2022-05-31

    申请号:CN202110271745.1

    申请日:2021-03-12

    Abstract: 本发明公开了一种新型高温可逆不育水稻材料和高温可逆不育系的培育方法,以及基于此不育系创建的新型两系杂交稻制种体系及其应用。方案包括:(1)利用粳稻品种台中65(T65)与携带第1染色体籼型片段的导入系E4杂交,在其杂交后代选出籼粳重组体,其中携带籼粳重组型复合遗传位点htrms1的新种质T65rS表现为反向高温敏感雄性不育;(2)以T65rS为htrms1供体,与其它优良水稻品种(系)杂交和回交,选育新的高温可逆不育系;(3)选育携带籼型恢复位点HTRMS1的恢复系;(4)高温可逆不育系在高温条件下(孕穗期日平均温度32~35℃)可自交繁种;在中低温条件下(日平均温度25~31℃),高温可逆不育系表现雄性不育,可与恢复系杂交制种产生杂种F1。所得杂种F1可用于生产。本发明丰富了两系杂交育种材料,降低制种风险,扩大两系杂交稻应用范围。

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