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公开(公告)号：CN103424478B
公开(公告)日：2015-03-04
申请号：CN201310159490.5
申请日：2013-05-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明属于兽药残留分析领域，具体涉及一种吡利霉素的残留检测方法。采用仲胺基化合物氢取代衍生反应高效液相色谱柱前衍生化反应分析。在室温下，衍生化试剂氯甲酸-9-芴基甲酯的浓度为10-2mol/L，将0.1mol/L的硼酸缓冲液调至pH为9，该反应为即时反应，由于只有一个仲胺作为单一的反应位点，不需加反应终止剂即可达到衍生化的目的，衍生产物稳定。衍生产物经高效液相色谱检测，衍生产物的紫外检测波长为266nm时有最大紫外强度，最小检出量为5μg/L，在20～4000μg/L范围内对峰面积呈线性响应，结果重现性良好，3个浓度、15次重复的变异系数小于8％。
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公开(公告)号：CN103288963B
公开(公告)日：2014-10-15
申请号：CN201210049826.8
申请日：2012-02-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种吉他霉素残留检测用单克隆抗体及制备方法和应用，杂交瘤细胞KA/2A9，CCTCC，NO:C201184。步骤：A、将半抗原吉他霉素与牛血清白蛋白偶联得到免疫原；B、将半抗原吉他霉素与卵清蛋白偶联得到包被原；C、利用免疫原制备得到杂交瘤细胞株KA/2A9所分泌的单克隆抗体；D、用包被原包被固相载体；E、将待测样品用偏磷酸/乙醇下提取、乙酸乙酯反萃取，氮气吹干、样品稀释液得到待测物；F、对待测物进行酶联免疫检测。一种吉他霉素残留检测的试剂盒及应用，包括：包被有包被原kitasamycin-AOAA-OVA的酶标板；吉他霉素标准品溶液；辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG抗体工作液；浓缩磷酸盐缓冲液；浓缩洗涤液；底物混合液；终止液。方法具有简便、快速、灵敏、准确的特点。
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公开(公告)号：CN102608320B
公开(公告)日：2014-02-05
申请号：CN201210045217.5
申请日：2012-02-27
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种能识别孔雀石绿、无色孔雀石绿、无色结晶紫的单克隆抗体和一种用于检测孔雀石绿、无色孔雀石绿、无色结晶紫的酶联免疫检测方法与试剂盒。本发明的单克隆抗体是由杂交瘤细胞4B10所分泌的，该杂交瘤细胞保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：C201143。本发明的酶联免疫检测方法包括免疫原、包被原、抗体的制备以及样品的处理和检测等步骤。与现有技术相比，本发明制备的单克隆抗体可以同时识别无色结晶紫、孔雀石绿、无色孔雀石绿，本发明的检测方法和试剂盒具有简便、快速、灵敏、准确等优点。
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公开(公告)号：CN103424484A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310163174.5
申请日：2013-05-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明属于药物残留标示物的分析方法。具体涉及一种甲脒类残留标示物(七氟丁酸酐)衍生化反应与气相色谱检测联测的分析方法。甲脒类残留标示物和七氟丁酸酐可以发生反应，所得到的含氟产物更容易气化，检测信号更强。优化了反应条件，碱性条件下，65～75℃恒温干燥箱中，甲脒类化合物水解40～60min，在55～75℃恒温干燥箱中甲脒类水解产物和七氟丁酸酐反应80～100min，冷却至室温后，加饱和NaHCO3中和，干燥后直接进行气相色谱分析。最小检出量为5μg/L，结果重现性良好，3个浓度，5次单独重复的变异系数小于15％。各项指标均能满足该药物残留量分析要求。
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公开(公告)号：CN103424480A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310161090.8
申请日：2013-05-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明为可食性动物组织中红霉素残留检测方法，属于兽药残留检测技术领域，具体涉及动物组织中红霉素残留高效液相色谱柱前衍生化反应分析方法。红霉素药物含有羟基基团与9-芴代甲氧苯酰氯发生反应，产物具有较高紫外信号响应。在偏碱性的磷酸二氢钾缓冲溶液中，用衍生化试剂9-芴代甲氧苯酰氯在水浴45℃下衍生红霉素1h，反应结束后冷却至室温上HPLC分析检测，得到比较稳定的衍生产物，对红霉素标准衍生物溶液用二极管阵列检测器进行紫外光谱扫描，在264nm处有最大吸收。本方法的灵敏度为4μg/kg，在0.1～2μg/mL范围内对峰面积呈线性响应，结果重现性良好，批内、批间变异系数CV≤15％。本发明各项指标均能满足红霉素药物残留分析的要求，灵敏度有较大提高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103424479A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310159816.4
申请日：2013-05-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明属于兽药残留分析技术领域，公开了一种羧基化合物聚醚药物氢取代衍生反应高效液相色谱柱前衍生化反应分析方法。所述的聚醚类药物含有羧基基团与荧光试剂1-溴乙酰芘发生反应，产物具有极强的荧光活性。优化反应条件：以18-冠醚-6溶液为相转移催化剂，1-溴乙酰芘溶液作为衍生化试剂，30～70℃水浴150min，待冷却后经高效液相色谱仪检测，衍生产物在激发波长为360nm，发射波长为420nm时有最大的荧光强度，最小检出量为50μg/L，在200～1600μg/L范围内对峰面积呈线性响应，结果重现性良好，3个浓度、15次重复的变异系数小于7.8％，各项指标均能满足莫能菌素、盐霉素和拉沙洛西三种聚醚类药物残留分析的要求。
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公开(公告)号：CN102585007B
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201210045212.2
申请日：2012-02-27
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N5/20 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种能识别β-胡萝卜素类色素的特异性单克隆抗体和一种用于检测β-胡萝卜素类色素的酶联免疫方法及试剂盒。本发明的单克隆抗体是由杂交瘤细胞DCC/C11所分泌的，该杂交瘤细胞保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：C201146。本发明的酶联免疫检测方法包括免疫原、包被原、抗体的制备以及样品的处理和检测等步骤。本发明的酶联免疫检测方法及试剂盒能一次性测出样品中斑蝥黄、β-胡萝卜素、β-阿朴-8’-胡萝卜素醛、叶黄素、辣椒红素、β-紫罗酮酸的总含量，缩短了检测时间，降低了检测成本，同时具有检测灵敏度高、精密度好、准确性好的特点。
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公开(公告)号：CN102585006B
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201210045202.9
申请日：2012-02-27
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N5/20 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种能识别新霉素、阿米卡星和巴龙霉素的特异性单克隆抗体和一种用于检测新霉素、阿米卡星和巴龙霉素的酶联免疫方法及试剂盒。本发明的单克隆抗体是由杂交瘤细胞EDC/5G04所分泌的，该杂交瘤细胞保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO：C201144。本发明的酶联免疫检测方法包括免疫原、包被原、抗体的制备以及样品的处理和检测等步骤。与现有技术相比，本发明制备的单克隆抗体可以同时识别新霉素、阿米卡星和巴龙霉素，提高了现有技术的检测效率；动物组织样品处理方法简单、时间短。本发明的酶联免疫方法及试剂盒还具有检测灵敏度高、精密度好、准确性好的特点。
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公开(公告)号：CN102552160A
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201010604172.1
申请日：2010-12-24
Applicant: 华中农业大学
IPC: A61K9/16 , A61K31/4709 , A61K47/36 , A61P31/04
Abstract: 本发明涉及一种兽用甲磺酸达氟沙星缓释微球制剂及其制备方法与应用。制剂中有效药物成分甲磺酸达氟沙星含量为11.45～21.01％，载体海藻酸钠多糖交联物含量为78.99～88.55％。该制剂采用乳化化学交联法制备，先将甲磺酸达氟沙星、海藻酸钠、抗氧化剂配成水相溶液，在乳化的条件下滴加交联剂，固化形成微球，然后通过洗涤、离心、过滤、干燥，得到平均粒径在8～9μm的甲磺酸达氟沙星缓释微球制剂。该制剂的制备工艺简单易行，所用原料具有很好的生物相容性、生物降解性和稳定性，制备的甲磺酸达氟沙星缓释微球制剂具有安全无毒、载药量高(11.45％～21.01％)、包封率高(59.54～88.20％)和长效缓释等特点，对猪肌内注射该制剂后可维持有效浓度数天，适用于治疗由敏感菌引起的畜禽呼吸道、消化道感染。
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公开(公告)号：CN101363061B
公开(公告)日：2011-08-10
申请号：CN200810197170.8
申请日：2008-10-07
Applicant: 华中农业大学
CPC classification number: Y02A50/451
Abstract: 本发明涉及一种检测食品沙门氏菌的Taqman探针荧光定量PCR方法。针对fimY基因设计引物和Taqman探针，荧光定量PCR。在优化的反应程序和反应体系下，以水煮裂解法提取的肠炎沙门氏菌标准菌株10倍系列稀释液的基因组DNA为模板，进行荧光定量PCR，绘制标准曲线，根据线性关系R2和扩增效率E来衡量重复样品数据是否一致和不同拷贝数的初始模板是否具有相同的扩增效率。应用本发明建立的方法，对人工污染的猪肌肉和鸡蛋样本进行检测，该方法能在最高浓度为14.8×108cfu/ml干扰菌的存在下，在1～3cfu/10g的接种浓度上检出阳性。本发明使用fimY基因特异引物和Taqman探针，在优化的反应条件下检测食品中污染的沙门氏菌时，具有更高的稳定性、特异性和灵敏性，是一种快速、准确的沙门氏菌检测方法。
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