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公开(公告)号:CN104163859A
公开(公告)日:2014-11-26
申请号:CN201410368059.6
申请日:2014-07-29
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/35 , G01N33/531
CPC classification number: C07K14/35 , G01N33/5695 , G01N33/6866
Abstract: 本发明提供了Mb1961c蛋白用于制备外周血γ-干扰素体外释放试验刺激剂的新用途。本发明的Mb1961c蛋白作为外周血γ-干扰素体外释放试验刺激剂的检查效果好于其它25种分枝杆菌抗原蛋白,与Prionics公司牛IFN-γ试剂盒的阳性和阴性符合率分别为79.4%和92.3%,总符合率为88.8%,显示出其作为牛结核病外周血γ-干扰素体外释放试验刺激剂的极高应用价值。
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公开(公告)号:CN102965343B
公开(公告)日:2014-05-07
申请号:CN201210433949.1
申请日:2012-11-02
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/24 , G01N33/577 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供了一种分泌牛γ干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞株、其单克隆抗体及其应用。本发明的分泌牛γ干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞株保藏号为CCTCC?NO:C2012107。本发明的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体具有效价高、特异性好、与天然抗原亲和力强的优势,基于此建立的BoIFN-γELISPOT检测试剂盒具有较好的灵敏度和特异性,用作牛机体免疫状态的评价及感染性疾病诊断相关的研究。
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公开(公告)号:CN103160610A
公开(公告)日:2013-06-19
申请号:CN201310124932.2
申请日:2013-04-11
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: Y02A50/451
Abstract: 本发明涉及一种用于检测弯曲菌的荧光定量PCR方法及其专用引物和探针,所述引物序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。探针序列为FAM-ACCACCAATTCCATCTGCCTCT-Eclipse。所述弯曲菌的荧光定量PCR检验方法,以样品总DNA为模板,利用上述的引物和探针进行荧光定量PCR,同时设立无模板对照和阳性对照,根据荧光信号到达设定域值时所经历的循环数Ct值判定结果。本发明具有灵敏度高、特异性强、重复性好的优点。
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公开(公告)号:CN102321589A
公开(公告)日:2012-01-18
申请号:CN201110306715.6
申请日:2011-10-10
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及表达牛γ干扰素的Flp-In-293细胞系,该细胞系命名为B1,含有编码牛γ干扰素的基因。构建细胞系B1的方法是:将序列正确的preBoIFN-γ片段构建成重组质粒pcDNA5/FRT-preBoIFN-γ-FLAG,采用脂质体转染法将重组质粒pcDNA5/FRT-preBoIFN-γ-FLAG与重组酶表达载体pOG44共转染Flp-In-293细胞,使用含120μg/mLHygromycinB的DMEM培养基进行阳性克隆筛选,扩大培养后采用有限稀释法进行亚克隆,通过鉴定后获得重组细胞系。细胞系B1分泌的牛γ干扰素具有极高的比活力和稳定性。
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公开(公告)号:CN101215610A
公开(公告)日:2008-07-09
申请号:CN200710302588.6
申请日:2007-12-27
Applicant: 扬州大学
Abstract: H5亚型禽流感病毒环介导等温扩增检测的试剂盒及其应用,属于生物技术领域,特别涉及H5亚型禽流感病毒的检测技术领域。由反应液A和反应液B组成,将2μl待检RNA溶液加入装有反应液A的反应管中,放置于60~65℃恒温水浴箱中,经90min后在上述反应管中再加入1μl反应液B,用肉眼观察颜色变化,如颜色变为绿色,则样品为H5亚型禽流感病毒;如果颜色为黄色,则待检样品不是H5亚型禽流感病毒。本试剂盒可提供简便、快速的H5亚型禽流感病毒检测。
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公开(公告)号:CN101182568A
公开(公告)日:2008-05-21
申请号:CN200710191236.8
申请日:2007-12-07
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/04
CPC classification number: Y02A50/451
Abstract: 一种空肠弯曲菌、结肠弯曲菌检验的方法,涉及细菌鉴定技术,特别是鉴定空肠弯曲菌、结肠弯曲菌的检测方法。先将待检测样品用PBS预处理;再用含抗生素、生长促进剂和鸡血清浓度为10%的布氏肉汤进行选择性增菌;经一次性PCR扩增弯曲菌、空肠弯曲菌和结肠弯曲菌基因片段后;进行选择性培养基分离,最后特异性生化鉴定。本发明能形成大量的基因复制片段,方便比较,一次就能鉴定是否为空肠弯曲菌、结肠弯曲菌,较经典方法的细菌分离、鉴定方法快速、准确。
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公开(公告)号:CN100352513C
公开(公告)日:2007-12-05
申请号:CN200410064940.3
申请日:2004-10-10
Applicant: 扬州大学
Abstract: 新城疫粘膜DNA疫苗及其构建方法,涉及一种新城疫疫苗以及构建的方法,先通过反转录-聚合酶链式RT-PCR反应,扩增出新城疫病毒融合蛋白F基因;再将F基因与质粒pVAX1进行连接反应,构建DNA疫苗pVAX1-F;最后将质粒pVAX1-F转化进减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207中,最终获得DNA长度为4647bp的新城疫病毒DNA疫苗。本发明采用以减毒鼠伤寒沙门氏菌运送新城疫病毒DNA疫苗,构建新城疫新型粘膜疫苗SL7207(pVAX1-F)。通过口服方式(饮水或拌料)对家禽(鸡、鹅、鸽等)直接进行免疫,较传统的新城疫弱毒疫苗安全,且较传统的新城疫油乳剂灭活疫苗使用方便,可克服母源抗体干扰以及油乳剂灭活疫苗不能产生粘膜免疫应答的缺陷,并能提供对新城疫病毒强毒攻击的保护。
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公开(公告)号:CN1616108A
公开(公告)日:2005-05-18
申请号:CN200410064940.3
申请日:2004-10-10
Applicant: 扬州大学
Abstract: 新城疫新型粘膜疫苗及其构建方法,涉及一种新城疫疫苗以及构建的方法,先通过反转录—聚合酶链式RT-PCR反应,扩增出新城疫病毒融合蛋白F基因;再将F基因与质粒pVAX1进行连接反应,构建DNA疫苗pVAX1-F;最后将质粒pVAX1-F转化进减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207中,最终获得DNA长度为4647bp的新城疫病毒DNA疫苗。本发明采用以减毒鼠伤寒沙门氏菌运送新城疫病毒DNA疫苗,构建新城疫新型粘膜疫苗SL7207(pVAX1-F)。通过口服方式(饮水或拌料)对家禽(鸡、鹅、鸽等)直接进行免疫,较传统的新城疫弱毒疫苗安全,且较传统的新城疫油乳剂灭活疫苗使用方便,可克服母源抗体干扰以及油乳剂灭活疫苗不能产生粘膜免疫应答的缺陷,并能提供对新城疫病毒强毒攻击的保护。
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公开(公告)号:CN119842940A
公开(公告)日:2025-04-18
申请号:CN202510110347.X
申请日:2025-01-23
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种检测贝利不动杆菌的特异性引物及其应用,特异性引物包括:baylyi‑F和baylyi‑R。使用本发明的引物进行PCR扩增,经1.2%琼脂糖凝胶电泳和Sanger测序,存在370 bp、清晰且单一的DNA条带。对贝利不动杆菌进行菌液PCR检测,准确率为100%,耗时仅3 h,且成功应用于贝利不动杆菌ADP1的接合转移实验。采用本发明提供的贝利不动杆菌特异性引物检测贝利不动杆菌的方法操作简单、高效且准确率高。
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公开(公告)号:CN118745477A
公开(公告)日:2024-10-08
申请号:CN202410945795.7
申请日:2024-07-15
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种tet(X)阳性艾米斯不动杆菌特异性检测引物、检测方法和应用,特异性引物包括amyesii‑6712F/amyesii‑6712R和ase‑F/ase‑R。使用其对tet(X)阳性艾米斯不动杆菌基因组DNA或单菌落进行PCR扩增,条带大小均分别为690bp和318bp,tet(X)阳性艾米斯不动杆菌检测的准确率均为100%,可见其准确度高,最低检测限DNA浓度仅为0.003ng/μL,可见其灵敏度高。其中,挑取菌落进行检测的总耗时仅约2.5h。对于tet(X)阳性艾米斯不动杆菌,基于特异性PCR引物进行检测的方法有着操作简单、准确和快捷等特点,具有广阔的应用前景和经济价值。
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