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公开(公告)号：CN113684209A
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN202110756558.2
申请日：2021-07-05
Applicant: 吉林大学重庆研究院
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/64 , A01K67/027
Abstract: 本发明提供一条能有效敲除猪PCBP1基因的sgRNA，其特征在于：所述sgRNA特异性靶向猪PCBP1基因的第485位到504位的序列，其编码基因的核苷酸序列如SEQID NO.1所示。本发明利用CRISPR/Cas9技术，成功地在PK15细胞系中敲除了PCBP1基因，结果显示该敲除细胞系能够在一定程度上抑制CSFV在细胞中的增殖，为制备PCBP1敲除的具有先天的抗CSFV能力的基因编辑猪提供了可能，对于抗猪瘟病毒药物靶点筛选研究及抗病毒猪的遗传育种具有重要意义。
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公开(公告)号：CN113604606A
公开(公告)日：2021-11-05
申请号：CN202110784583.1
申请日：2021-07-12
Applicant: 吉林大学重庆研究院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了非洲猪瘟LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法，根据P54基因的相对保守区为靶序列设计了6组引物组P1‑P6，其中部分引物引入简并碱基，使用其中任一组均能检出国内外的变异株，检出率和特异性大大提高，对于非洲猪瘟病毒的早期检测和早期预防具有很好的应用价值，所述的检测方法具有操作简单、成本低廉和反应周期短等优点。
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公开(公告)号：CN105087563B
公开(公告)日：2019-01-15
申请号：CN201510503913.X
申请日：2015-08-17
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/11 , C12N15/10 , C12Q1/6888
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种动物转基因标签的可视化检测方法。本发明设计、筛选出转基因猪标记基因(Neo)LAMP特异性引物，并优化LAMP反应体系中Mg2+、Betaine、dNTPs、Bst DNA polymerase的浓度以及外引物内引物浓度比，确定了LAMP反应的最适反应条件。建立了可视化LAMP检测方法，可在65℃恒温条件下对不同浓度的转基因猪基因组进行检测，LAMP法检测的灵敏度为2pg/μl，而PCR法仅能检测至2ng/μl。LAMP法检测转基因猪样本准确性达98％。
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公开(公告)号：CN109055385A
公开(公告)日：2018-12-21
申请号：CN201810952139.4
申请日：2018-08-21
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/12 , C12N15/10 , C12N15/85 , A01K67/027
CPC classification number: C07K14/70596 , A01K67/0276 , A01K2207/15 , A01K2227/108 , A01K2267/02 , C12N15/10 , C12N15/85
Abstract: 本发明公开了一种有效抑制Ⅱ型PRRSV感染的基因序列，为一种替换猪CD163第七外显子后可有效抑制Ⅱ型PRRSV感染的基因序列，同时还公开了该序列在抗病研究中的应用，利用CRISPR/Cas9技术；将基因序列如SEQ ID 1所示的猪CD163第五外显子基因序列成功地替换猪CD163第七外显子的基因序列，并获得了CD163基因序列如SEQ ID 2的阳性克隆猪的肺泡巨噬细胞；可用于阐明PRRSV感染的分子机制及为后续获得有效抑制PRRSV感染的猪种群提供了理论基础，减少因PRRSV给养猪业带来的巨大损失。
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公开(公告)号：CN106957846A
公开(公告)日：2017-07-18
申请号：CN201710341094.2
申请日：2017-05-16
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/113 , A61K31/713 , A61P31/20
CPC classification number: C12N15/113 , C12N2310/14 , C12N2320/30
Abstract: 本发明提供了有效抑制猪瘟病毒复制和增殖的siRNA及用途，涉及抑制猪瘟病毒复制及增殖的2条siRNA及其序列，其可以用于针对猪瘟病毒的生物制剂的研发，同时可以结合基因编辑技术来制备和培育出携带有抗病基因的转基因动物，减少猪瘟病毒给养猪业造成的经济损失。
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公开(公告)号：CN105087563A
公开(公告)日：2015-11-25
申请号：CN201510503913.X
申请日：2015-08-17
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种动物转基因标签的可视化检测方法。本发明设计、筛选出转基因猪标记基因(Neo)LAMP特异性引物，并优化LAMP反应体系中Mg2+、Betaine、dNTPs、Bst DNA polymerase的浓度以及外引物内引物浓度比，确定了LAMP反应的最适反应条件。建立了可视化LAMP检测方法，可在65℃恒温条件下对不同浓度的转基因猪基因组进行检测，LAMP法检测的灵敏度为2pg/μl，而PCR法仅能检测至2ng/μl。LAMP法检测转基因猪样本准确性达98％。
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公开(公告)号：CN102634530A
公开(公告)日：2012-08-15
申请号：CN201210074432.8
申请日：2012-03-20
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及一种高表达赖氨酸的基因，属于生物工程技术领域。高表达赖氨酸的基因其核苷酸序列如SEQIDNO：1所述，该高表达赖氨酸的基因编码蛋白，其氨基酸序列如SEQIDNO：2所述。转基因小鼠奶中表达赖氨酸含量高的蛋白产物，使奶中赖氨酸含量显著提高。赖氨酸转基因小鼠的研究可以为我们进一步了解乳腺外源蛋白特别是本研究所选高赖氨酸含量外源蛋白的分泌机制，为转赖氨酸基因牛奶的研制奠定基础。
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公开(公告)号：CN101892257A
公开(公告)日：2010-11-24
申请号：CN201010185086.1
申请日：2010-05-28
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/63
Abstract: 本发明涉及一种表达猪源Cre重组酶载体pCEP4-Cre的构建，其特征在于：首先采用基因工程的方法构建pCEP4-Cre质粒，并用载体pCEP4-Cre与载体pEF-stop-eGFP共转染进入细胞，在表达Cre重组酶的情况下，将转入到细胞中的载体pEF-stop-eGFP中的Loxp卯定的终止子删除，使后接的报告基因eGFP得以表达，从而用于剪切条件性表达绿色荧光蛋白载体中的LoxP元件；其应用基因工程技术构建了一个表达Cre重组酶的质粒，并且重组质粒pCEP4-Cre可以在药物压力下独立于细胞染色体外存在，并在撤去药物压力后以每代10％的速率丢失；可有效的防止细胞基因组因插入外源基因而导致的基因突变；其使用的简便性和安全性可被广泛的应用，为人类Cre重组酶系统的检测发展起到积极的推动作用。
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