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公开(公告)号：CN116515828A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310277225.0
申请日：2023-03-21
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明涉及转基因领域，具体涉及一种提高转Cry1C基因水稻的二化螟抗性的方法。根据本申请的提高转Cry1C基因水稻的二化螟抗性的方法，在表达Cry1C蛋白的转基因水稻中表达阻断二化螟防御Cry1C途径的dsRNA，增强Cry1C杀灭二化螟效果。其中，水稻中阻断二化螟抵御Cry1C毒力途径的dsRNA是在二化螟p38的编码序列上501‑868bp的368nt核苷酸序列形成的dsRNA，其核苷酸序列如SEQ IDNo.2所示，所述dsRNA导入Cry1C水稻中，抑制p38表达，抑制参与防御Cry1C毒力的p38蛋白合成，增强Cry1C抗虫性，实现增强Cry1C杀灭二化螟目的。
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公开(公告)号：CN110563828B
公开(公告)日：2022-07-08
申请号：CN201910725667.0
申请日：2019-08-07
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/113 , A01N57/16 , A01P7/04
Abstract: 本发明属于农业生物技术领域，具体涉及二化螟雄性特异性致死相关蛋白MSL3及其编码基因、dsRNA干扰序列和应用。二化螟雄性特异性致死相关蛋白MSL3，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明首次发现Male‑specific lethal‑3(MSL3)基因参与二化螟的生长发育过程，其表达缺失可显著提高二化螟幼虫的死亡率，最终抑制种群的发展，可用于开发防治螟蛾科二化螟昆虫产品。
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公开(公告)号：CN110951770B
公开(公告)日：2021-11-30
申请号：CN201911205309.3
申请日：2019-11-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/82
Abstract: 本发明提供一种简单快速高效的CRISPR/Cas9载体构建方法及应用，包括：构建骨架载体并对骨架载体进行线性化处理得到线性化的骨架载体，制备靶点引物后将所述靶点引物接入所述线性化的骨架载体中得到连接产物，将所述连接产物转接至大肠杆菌后得到阳性CRISPR/Cas9载体；其中，所述骨架载体连接有OsU3启动子或OsU6b启动子、gRNA1及Bsa I酶切位点，所述gRNA1上5’端的碱基5’‑gtttt‑3’被删除；所述靶点引物可包含一个或多个靶点引物片段，并通过粘性末端设计与骨架载体连接。本发明的有益效果是该方法适用于单双靶点CRISPR/Cas9载体的构建；利用Bsa I线性化的载体和酶切回收的外源片段可以长期存放于，用于大量CRISPR/Cas9载体构建。本载体系统构建CRISPR/Cas9降低了外源片段突变概率，可以确保重组质粒测序正确率为100％。
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公开(公告)号：CN111041011B
公开(公告)日：2021-04-27
申请号：CN201910851757.4
申请日：2019-09-10
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程及分子生物学技术领域，具体涉及一种经定向进化技术人工改造的可显著提高草甘膦降解性能的草甘膦氧化酶突变体，并进一步公开了该突变体及其编码基因在新型耐草甘膦作物的培育以及草甘膦污染生物降解领域中的应用。本发明所述方案通过DNA改组技术(DNA shuffling)，基于已知的草甘膦氧化酶突变体，构建得到草甘膦氧化酶突变体库，并从大量的突变体中筛选得到了两个对草甘膦催化效率提高的突变体B5R18和B5R26。本发明所述突变体B5R18和B5R26具有很高的的草甘膦降解活性，有效解决了现有草甘膦氧化酶活性低的缺陷，在草甘膦抗性作物培育及草甘膦污染的降解处理等方面具有很大的潜在应用价值。
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公开(公告)号：CN108546704B
公开(公告)日：2021-01-15
申请号：CN201810368609.2
申请日：2018-04-23
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/29 , C12Q1/6895 , A01H1/02 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明涉及植物育种领域，具体涉及一种无功能的OsC1基因及其应用。本发明所述无功能的OsC1基因的基因型为Hap 2，在OsC1基因的第791‑800bp位置发生10bp缺失。本发明还提供了上述无功能OsC1基因在去除叶片花青素中的应用，利用分子标记技术结合常规育种流程，将无功能的OsC1基因导入叶片中含花青素的黑米品种中，可以特异性去除叶片中花青素的积累，但不影响黑米种子中花青素的含量。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110272880B
公开(公告)日：2021-01-01
申请号：CN201910428622.7
申请日：2019-05-22
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种通过定点突变技术获得的对草甘膦催化活性和底物特异性提高的草甘膦降解酶突变体。本发明所述的草甘膦降解酶突变体B4S7‑F63X，在现有草甘膦降解酶B4S7的基础上，改造后的草甘膦降解酶在其第63位的苯丙氨酸进行突变为丙氨酸或组氨酸。对比现有的文献报道和专利数据，B4S7‑F63A对草甘膦具有最高的催化效率，B4S7‑F63H对草甘膦具有最高的底物特异性，所述草甘膦降解酶编码基因导入植物后，有望赋予植物抗草甘膦的同时，实现草甘膦的高效分解，解决草甘膦在植物中的残留问题，在培育新型耐草甘膦作物及培育能够降解草甘膦的新型抗除草剂植物领域具有极大的应用潜力。
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公开(公告)号：CN109112117B
公开(公告)日：2020-11-27
申请号：CN201710786843.2
申请日：2017-09-04
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于昆虫基因工程技术领域，具体涉及一种分离的二化螟CYP15C1基因及其编码蛋白。本发明分离的二化螟CYP15C1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，其编码的蛋白质序列如SEQ ID NO：2所示。本发明还包括二化螟CYP15C1基因RNA干扰序列如SEQ ID NO：3的应用，所述的序列对二化螟CYP15C1基因具有良好的沉默效果。涂抹饲喂该干扰序列，显著提高了二化螟幼虫的死亡率，抑制了二化螟的变态发育，最终导致二化螟的畸形，从而可以有效的控制其种群的发展。进一步，本发明的基因及蛋白可用于转基因抗虫植物的开发以及二化螟的生物防治。
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公开(公告)号：CN107129993B
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN201610317483.7
申请日：2016-05-14
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种修饰的抗草甘膦基因及抗草甘膦水稻的培育方法。本发明包括草甘膦基因的修饰、抗草甘膦基因的植物表达载体的构建和抗草甘膦转基因水稻的培育方法。人工合成了修饰的抗草甘膦基因为目标基因，其序列如SEQ ID NO：1所述，采用农杆菌介导的遗传转化法，将目标基因导入水稻受体，获得高抗草甘膦的转基因水稻GT28。通过有性杂交和体细胞杂交技术将GT28的抗草甘膦基因重组到新的水稻种质中，育成水稻抗草甘膦新品种(系)。
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公开(公告)号：CN111607573A
公开(公告)日：2020-09-01
申请号：CN202010286083.0
申请日：2020-04-13
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种具有草甘膦降解能力的氨膦氧化还原酶，并进一步公开所述氨膦氧化还原酶及其编码基因在新型耐草甘膦作物的培育以及草甘膦污染生物降解领域中的应用。本发明所述具有草甘膦降解能力的氨膦氧化还原酶，具有全新的草甘膦分解机制，可以特异性切割草甘膦中磷酰基甲基与甘氨酸连接的C-N键，进而产生甘氨酸及其它无毒产物，将该酶编码基因导入大肠杆菌细胞能赋予其对草甘膦较高的抗性，该酶及其编码基因无论在草甘膦污染的降解修复还是在基于遗传工程进行抗草甘膦植物的培育研究中，都具有极大的应用潜力。
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公开(公告)号：CN108085325B
公开(公告)日：2020-07-03
申请号：CN201810092753.8
申请日：2018-01-31
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明提供了一种抗草甘膦基因及其在调控烟草对草甘膦抗性中的应用。所述基因的核苷酸序列如Seq ID No.1所示。本发明提供了一种转基因抗草甘膦烟草的培育方法，转基因抗草甘膦烟草pLSZ1#1植株达到了同质化，且获得的性状能够稳定的遗传，使用该方法获得的转基因抗草甘膦烟草pLSZ1#1抗性显著提高40倍以上，可以耐受11mmol/L草甘膦。
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