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公开(公告)号:CN115671127A
公开(公告)日:2023-02-03
申请号:CN202211353862.3
申请日:2022-11-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K31/7084 , A61K39/135 , A61P37/04
Abstract: 本发明属于兽用疫苗领域,具体涉及一种环鸟苷单磷酸腺苷单磷酸类似物在制备免疫增强剂或疫苗增效剂中的应用。首先,本发明意外发现了一种稳定的环鸟苷单磷酸腺苷单磷酸(cGAMP)类似物,可用于口蹄疫疫苗中的免疫增强剂,能够提高口蹄疫疫苗免疫抗体水平及延长免疫持续期。其次,将所述的环鸟苷单磷酸腺苷单磷酸(cGAMP)类似物添加到口蹄疫疫苗抗原中,经过乳化制备成口蹄疫疫苗,能够显著增强疫苗免疫效果,能提高口蹄疫疫苗免疫后的抗体水平及延长抗体在动物机体的持续时间,具有极高的应用前景和经济效益。
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公开(公告)号:CN114853912A
公开(公告)日:2022-08-05
申请号:CN202210571495.8
申请日:2022-05-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种牛病毒性腹泻病毒E2‑E0融合蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种将牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白与牛病毒性腹泻病毒E2蛋白融合,不仅能够促进E0蛋白的表达,而且不影响E0蛋白的免疫原性,可用于牛病毒性腹泻亚单位疫苗的制备;在上述牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白的基础上,本发明发现,将牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白的160‑162位氨基酸由IAA突变为GGG,能够使E2‑E0融合蛋白的表达量进一步提升18%以上,且不影响其免疫原性。
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公开(公告)号:CN114806994A
公开(公告)日:2022-07-29
申请号:CN202210629321.2
申请日:2022-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物医药领域,涉及一种表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的枯草芽孢杆菌及应用。本发明将表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的重组质粒转化至枯草芽孢杆菌WB800N,获得了一种表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的重组枯草芽孢杆菌;所述重组枯草芽孢杆菌在高效表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的同时,具有良好的免疫反应性,能够诱导机体产生体液免疫应答和细胞免疫应答。还可以作为黏膜疫苗,经口服免疫后,产生较高水平的抗原特异性IgG抗体及黏膜sIgA抗体,升高外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞的比例,刺激脾脏淋巴细胞增殖,并促进细胞因子IFN‑γ、IL‑2和IL‑4的表达。
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公开(公告)号:CN114276446A
公开(公告)日:2022-04-05
申请号:CN202210011200.1
申请日:2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨洋 , 茹毅 , 秦晓东 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及A型口蹄疫病毒结构蛋白VP2的抗体m12、制备方法及应用。本发明筛选获得一株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,并获得了一种鼠单克隆抗体m12。所述单克隆抗体m12与结构蛋白VP2特异性反应,对A型谱系代表毒株具有广谱反应性,而不和O型谱系代表毒株反应。利用鼠单克隆抗体m12和A型结构蛋白兔抗血清建立A型口蹄疫病毒结构蛋白固相竞争ELISA检测试剂盒,相较于现有抗体,具有更好的灵敏度和特异性,适用于A型口蹄疫感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测,同时,也是一种监测口蹄疫非免疫地区感染情况的新方法。
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公开(公告)号:CN105567872B
公开(公告)日:2019-10-22
申请号:CN201610034074.6
申请日:2016-01-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明公开了一种快速检测小反刍兽疫病毒的RT‑RPA检测试剂盒及其用途。所述试剂盒包括有一对引物和一条探针,所述引物的序列如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示,所述探针的序列如SEQ ID NO.3所示。实验证明本发明的试剂盒能够特异性的检测小反刍兽疫病毒,并且在同等条件下对绵羊痘病毒、山羊痘病毒、羊口疮病毒以及口蹄疫病毒等其他重要的羊感染病毒没有扩增,说明该方法具有很好的特异性。灵敏度实验表明本发明所设计的用于检测小反刍兽疫病毒的RT‑RPA引物和探针能够在40℃下,扩增20min的条件下最少可检出150个拷贝的模板,且与RT‑qPCR具有很高的符合度。因此,本发明的试剂盒能够快捷、高效、灵敏的检测小反刍兽疫病毒,为小反刍兽疫病毒的鉴别诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号:CN105567871B
公开(公告)日:2018-12-07
申请号:CN201610029446.6
申请日:2016-01-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种快速检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的RT‑RPA检测试剂盒及其用途。所述试剂盒包括有一对引物和一条探针,所述引物的序列如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示,所述探针的序列如SEQ ID NO.3所示。实验证明本发明的试剂盒能够特异性的检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP‑PRRSV),与猪瘟病毒、C型‑猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪2型圆环病毒、猪伪狂犬病毒以及口蹄疫病毒等不反应。实验证明,本发明的试剂盒能够在40℃,扩增20min的条件下检出最少70个拷贝的模板,且与RT‑qPCR具有很高的符合度。由此说明,本发明的试剂盒能够快捷、高效、灵敏的检测HP‑PRRSV,本发明的提出为HP‑PRRSV的鉴别诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号:CN105567872A
公开(公告)日:2016-05-11
申请号:CN201610034074.6
申请日:2016-01-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速检测小反刍兽疫病毒的RT-RPA检测试剂盒及其用途。所述试剂盒包括有一对引物和一条探针,所述引物的序列如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示,所述探针的序列如SEQ ID NO.3所示。实验证明本发明的试剂盒能够特异性的检测小反刍兽疫病毒,并且在同等条件下对绵羊痘病毒、山羊痘病毒、羊口疮病毒以及口蹄疫病毒等其他重要的羊感染病毒没有扩增,说明该方法具有很好的特异性。灵敏度实验表明本发明所设计的用于检测小反刍兽疫病毒的RT-RPA引物和探针能够在40℃下,扩增20min的条件下最少可检出150个拷贝的模板,且与RT-qPCR具有很高的符合度。因此,本发明的试剂盒能够快捷、高效、灵敏的检测小反刍兽疫病毒,为小反刍兽疫病毒的鉴别诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号:CN105567871A
公开(公告)日:2016-05-11
申请号:CN201610029446.6
申请日:2016-01-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q2561/113 , C12Q2563/107 , C12Q2545/114 , C12Q2521/507 , C12Q2521/107 , C12Q2521/319
Abstract: 本发明公开了一种快速检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的RT-RPA检测试剂盒及其用途。所述试剂盒包括有一对引物和一条探针,所述引物的序列如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示,所述探针的序列如SEQ ID NO.3所示。实验证明本发明的试剂盒能够特异性的检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV),与猪瘟病毒、C型-猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪2型圆环病毒、猪伪狂犬病毒以及口蹄疫病毒等不反应。实验证明,本发明的试剂盒能够在40℃,扩增20min的条件下检出最少70个拷贝的模板,且与RT-qPCR具有很高的符合度。由此说明,本发明的试剂盒能够快捷、高效、灵敏的检测HP-PRRSV,本发明的提出为HP-PRRSV的鉴别诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号:CN116731127B
公开(公告)日:2025-04-15
申请号:CN202310911311.2
申请日:2023-07-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , C12N15/85 , C12N5/10 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/68 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种基于遗传密码子扩展技术在口蹄疫病毒VP1蛋白的特定氨基酸残基定点引入提前终止密码子,利用生物正交翻译系统通读琥珀终止密码子UAG,在非天然氨基酸存在或不存在的条件下,不仅可以条件性的控制VP1蛋白的表达,将非天然氨基酸定点引入口蹄疫病毒VP1蛋白,还可利用含特殊基团的非天然氨基酸特异性标记口蹄疫病毒VP1蛋白,通过光照交联在与细胞内相互作用的蛋白质间形成稳定共价键,为口蹄疫病毒与宿主蛋白质相互作用研究提供有力的手段;也可用于制备VP1蛋白特定位点突变的复制缺陷型重组口蹄疫病毒及疫苗。
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公开(公告)号:CN119345361A
公开(公告)日:2025-01-24
申请号:CN202311314168.5
申请日:2023-10-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及一种RSAD1基因/蛋白为靶点在筛选抑制小核糖核酸病毒科病毒感染药物中的应用。本发明意外发现沉默RSAD1基因能够显著抑制塞内卡病毒的复制,可作为靶点用于研发针对塞内卡病毒的抗病毒药物。本发明提供了靶向RSAD1基因的sgRNA序列,结合CRISPR‑Cas9基因编辑技术,沉默RSAD1基因,获得了RSAD1基因敲除的单克隆细胞系,所述细胞系能够显著抑制塞内卡病毒的复制,为进一步筛选抵抗塞内卡病毒复制的药物和试剂提供靶点;同时本发明发现,在宿主细胞中过表达RSAD1蛋白能够显著促进塞内卡病毒的复制,可作为塞内卡病毒或疫苗的生产细胞系,用于塞内卡病毒或疫苗的生产。
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