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公开(公告)号:CN116751770A
公开(公告)日:2023-09-15
申请号:CN202310911305.7
申请日:2023-07-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种基于遗传密码子扩展技术和生物正交翻译系统在脯氨酰寡肽酶(POP)的特定氨基酸残基定点引入非天然氨基酸修饰的方法。所述方法包括使用遗传密码子扩展技术在POP蛋白基因编码区引入提前终止密码子,利用生物正交翻译系统通读琥珀终止密码子UAG,在非天然氨基酸存在的条件下,将非天然氨基酸定点引入POP蛋白,不仅可以条件性的控制POP蛋白的表达,还可利用含特殊基团的非天然氨基酸特异性标记POP蛋白,通过光照交联在与细胞内相互作用的蛋白质间形成稳定共价键,为细胞内POP蛋白质相互作用的研究提供有力的手段;也可用于POP蛋白功能及翻译后修饰研究。
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公开(公告)号:CN115725724B
公开(公告)日:2023-09-05
申请号:CN202211375093.7
申请日:2022-11-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 郝荣增 , 茹毅 , 卢炳州 , 杨洋 , 赵要风 , 马坤 , 刘恬然 , 李亚军 , 毛玉涵 , 王凌云 , 李丹 , 张克山 , 田宏 , 刘华南 , 张贵财 , 张越 , 陈娇 , 吴秀萍 , 任蕊芳
IPC: C12Q1/6883 , C12Q1/37 , C12N15/113 , A61K45/00 , A61K31/713 , A61K48/00 , A61K38/46 , A61P31/14 , C12N15/867 , C12N5/10 , C12N7/00 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种POP基因或蛋白为靶点在筛选抑制小RNA病毒科病毒复制药物中的应用。具体为:①本发明发现抑制/沉默POP基因/蛋白能够抑制小RNA病毒的复制,可作为靶点用于筛选抑制小RNA病毒复制的药物;②以POP为靶点的小干扰RNA能够干扰小RNA病毒的复制;③靶向POP的sgRNA结合CRISPR‑Cas9技术实现了POP的完全敲除,获得的细胞系对小RNA病毒具有抗性表型,为研究POP在细胞内的分子机制提供研究工具和材料;④过表达POP可以显著促进小RNA病毒的表达和复制,即POP蛋白可作为病毒/病毒疫苗表达增效剂或生产增效剂的应用,构建的POP过表达细胞系可作为病毒/病毒疫苗生产细胞系。
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公开(公告)号:CN114835782A
公开(公告)日:2022-08-02
申请号:CN202210570210.9
申请日:2022-05-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/18 , C12N15/40 , C12N15/85 , A61K39/187 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种猪瘟病毒E0截短蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种猪瘟病毒E0截短蛋白,显著促进了E0蛋白的表达,产量可达0.38 mg/ml,而且不影响E0蛋白的免疫原性,可用于猪瘟亚单位疫苗的制备;在上述猪瘟病毒E0截短蛋白的基础上,本发明发现,将E0截短蛋白的第160位、162位、165位和166位氨基酸均突变为甘氨酸G,能够使E0截短蛋白的表达量进一步提升30%以上,且不影响其免疫原性。
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公开(公告)号:CN116731127A
公开(公告)日:2023-09-12
申请号:CN202310911311.2
申请日:2023-07-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , C12N15/85 , C12N5/10 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/68 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种基于遗传密码子扩展技术在口蹄疫病毒VP1蛋白的特定氨基酸残基定点引入提前终止密码子,利用生物正交翻译系统通读琥珀终止密码子UAG,在非天然氨基酸存在或不存在的条件下,不仅可以条件性的控制VP1蛋白的表达,将非天然氨基酸定点引入口蹄疫病毒VP1蛋白,还可利用含特殊基团的非天然氨基酸特异性标记口蹄疫病毒VP1蛋白,通过光照交联在与细胞内相互作用的蛋白质间形成稳定共价键,为口蹄疫病毒与宿主蛋白质相互作用研究提供有力的手段;也可用于制备VP1蛋白特定位点突变的复制缺陷型重组口蹄疫病毒及疫苗。
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公开(公告)号:CN116751770B
公开(公告)日:2025-04-15
申请号:CN202310911305.7
申请日:2023-07-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种基于遗传密码子扩展技术和生物正交翻译系统在脯氨酰寡肽酶(POP)的特定氨基酸残基定点引入非天然氨基酸修饰的方法。所述方法包括使用遗传密码子扩展技术在POP蛋白基因编码区引入提前终止密码子,利用生物正交翻译系统通读琥珀终止密码子UAG,在非天然氨基酸存在的条件下,将非天然氨基酸定点引入POP蛋白,不仅可以条件性的控制POP蛋白的表达,还可利用含特殊基团的非天然氨基酸特异性标记POP蛋白,通过光照交联在与细胞内相互作用的蛋白质间形成稳定共价键,为细胞内POP蛋白质相互作用的研究提供有力的手段;也可用于POP蛋白功能及翻译后修饰研究。
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公开(公告)号:CN114805609B
公开(公告)日:2023-10-31
申请号:CN202210571519.X
申请日:2022-05-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种猪瘟病毒E2‑E0融合蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种猪瘟病毒E0截短蛋白与猪瘟病毒E2蛋白的E2‑E0融合蛋白,不仅能够促进E0蛋白的表达,而且不影响E0蛋白和E2蛋白的免疫原性,可用于猪瘟亚单位疫苗的制备;在上述猪瘟病毒E0截短蛋白的基础上,本发明发现,将猪瘟病毒E0截短蛋白的第160位、162位、165位和166位氨基酸均突变为甘氨酸G,能够使E2‑E0融合蛋白的表达量进一步提升20%以上,且不影响其免疫原性。
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公开(公告)号:CN115813914B
公开(公告)日:2023-07-18
申请号:CN202211375192.5
申请日:2022-11-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 郝荣增 , 茹毅 , 卢炳州 , 杨洋 , 李亚军 , 李丹 , 张克山 , 田宏 , 刘华南 , 毛玉涵 , 王凌云 , 张贵财 , 张越 , 陈娇 , 吴秀萍 , 任蕊芳
IPC: A61K31/4025 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种化合物KYP‑2047在制备抗病毒药物中的应用。本发明意外发现,化合物KYP‑2047能够降低口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制水平,抑制口蹄疫病毒和塞内卡病毒结构蛋白的表达,具有抑制口蹄疫病毒和塞内卡病毒感染的作用,可用于制备抗口蹄疫病毒和塞内卡病毒感染的药物或佐剂,用于抑制口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制。但本发明并不局限于口蹄疫病毒和塞内卡病毒,在本发明所述的化合物KYP‑2047能够抑制口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制的基础上,同样也能抑制小RNA病毒科其他病毒的复制,也可用于抑制其他病毒的复制,制备抗病毒感染的药物,或佐剂。
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公开(公告)号:CN114773438B
公开(公告)日:2023-06-13
申请号:CN202210571389.X
申请日:2022-05-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白,显著促进了E0蛋白的表达,产量可达0.35mg/ml,而且不影响E0蛋白的免疫原性,可用于牛病毒性腹泻亚单位疫苗的制备;在上述牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白的基础上,本发明发现,将E0截短蛋白的160‑162位氨基酸由IAA突变为GGG,能够使E0截短蛋白的表达量进一步提升30%以上,且不影响其免疫原性。
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公开(公告)号:CN115813914A
公开(公告)日:2023-03-21
申请号:CN202211375192.5
申请日:2022-11-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 郝荣增 , 茹毅 , 卢炳州 , 杨洋 , 李亚军 , 李丹 , 张克山 , 田宏 , 刘华南 , 毛玉涵 , 王凌云 , 张贵财 , 张越 , 陈娇 , 吴秀萍 , 任蕊芳
IPC: A61K31/4025 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种化合物KYP‑2047在制备抗病毒药物中的应用。本发明意外发现,化合物KYP‑2047能够降低口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制水平,抑制口蹄疫病毒和塞内卡病毒结构蛋白的表达,具有抑制口蹄疫病毒和塞内卡病毒感染的作用,可用于制备抗口蹄疫病毒和塞内卡病毒感染的药物或佐剂,用于抑制口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制。但本发明并不局限于口蹄疫病毒和塞内卡病毒,在本发明所述的化合物KYP‑2047能够抑制口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制的基础上,同样也能抑制小RNA病毒科其他病毒的复制,也可用于抑制其他病毒的复制,制备抗病毒感染的药物,或佐剂。
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公开(公告)号:CN115725724A
公开(公告)日:2023-03-03
申请号:CN202211375093.7
申请日:2022-11-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 郝荣增 , 茹毅 , 卢炳州 , 杨洋 , 赵要风 , 马坤 , 刘恬然 , 李亚军 , 毛玉涵 , 王凌云 , 李丹 , 张克山 , 田宏 , 刘华南 , 张贵财 , 张越 , 陈娇 , 吴秀萍 , 任蕊芳
IPC: C12Q1/6883 , C12Q1/37 , C12N15/113 , A61K45/00 , A61K31/713 , A61K48/00 , A61K38/46 , A61P31/14 , C12N15/867 , C12N5/10 , C12N7/00 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种POP基因或蛋白为靶点在筛选抑制小RNA病毒科病毒复制药物中的应用。具体为:①本发明发现抑制/沉默POP基因/蛋白能够抑制小RNA病毒的复制,可作为靶点用于筛选抑制小RNA病毒复制的药物;②以POP为靶点的小干扰RNA能够干扰小RNA病毒的复制;③靶向POP的sgRNA结合CRISPR‑Cas9技术实现了POP的完全敲除,获得的细胞系对小RNA病毒具有抗性表型,为研究POP在细胞内的分子机制提供研究工具和材料;④过表达POP可以显著促进小RNA病毒的表达和复制,即POP蛋白可作为病毒/病毒疫苗表达增效剂或生产增效剂的应用,构建的POP过表达细胞系可作为病毒/病毒疫苗生产细胞系。
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