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公开(公告)号：CN106167809A
公开(公告)日：2016-11-30
申请号：CN201610396756.1
申请日：2016-06-06
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明提供了一种海洋萎缩芽孢杆菌外源DNA的转入方法，包括如下步骤：对供体菌株、辅助菌株和受体菌株分别进行培养，并分别检测供体菌株培养液、辅助菌株培养液和受体菌株培养液的OD600；将前步骤中培养后的供体菌株、辅助菌株和受体菌株等量混匀，进行三亲本杂交，并筛选出杂交成功的菌株，记为三亲本杂交菌株；筛选出带有质粒菌株的萎缩芽孢杆菌C89/pRP1028；提取质粒pRP1028；将质粒pRP1028转化到大肠杆菌中，并提取大肠杆菌的质粒，进行测序验证。本发明具有如下的有益效果：对特殊培养和难于转化菌株的外源基因的转化带有借鉴意义。
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公开(公告)号：CN105463078A
公开(公告)日：2016-04-06
申请号：CN201510894975.8
申请日：2015-12-07
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种基因分析介导的芳香环聚酮化合物的寻找和鉴定方法，包括通过对待测菌株Ⅱ型聚酮酮合酶基因的扩增筛选具有芳香环聚酮合成潜力的菌株的步骤；通过对所述扩增产物读码的氨基酸序列进行比对、系统进化分析预测产物化学型的步骤；发酵所述菌株并于发酵液提取物中寻找、鉴定所述化学型产物的步骤。与现有技术相比，该方法可用于从野生型放线菌菌株的代谢产物中定向发现芳香环聚酮类化合物。
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公开(公告)号：CN102559780B
公开(公告)日：2014-06-18
申请号：CN201110311460.2
申请日：2011-10-14
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种海绵共生土曲霉发酵制备Terrein的培养基及其制备方法。所述培养基包括：葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、麦芽提取物、谷氨酸钠、氯化铵以及人工海水。优选方案为所述培养基具体为：当培养基中含有的人工海水为1L时，培养基含有葡萄糖28.41g、麦芽糖23.18g、甘露醇20.00g、麦芽提取物8.52g、谷氨酸钠10.00g、氯化铵10.00g。所述制备方法，包括以下步骤：第一步，配制人工海水；第二步，在配制好的人工海水中加入葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、麦芽提取物、谷氨酸钠和氯化铵并搅拌溶解，然后进行高温杀菌得到培养基。与现有技术相比，采用本发明方法成功的对海绵共生土曲霉产Terrein的培养基成分进行了优化，使得Terrein产量有明显提高。
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公开(公告)号：CN101880713B
公开(公告)日：2013-02-06
申请号：CN201010186101.4
申请日：2010-05-28
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及一种海绵细胞内共生放线菌的分子检测方法，采用机械法与化学法相结合，获取海绵单细胞，提取海绵细胞内内共生微生物总DNA；以提取的总DNA为模板，以放线菌种属特异性引物用聚合酶链式反应扩增放线菌16SrRNA基因片段；将扩增产物纯化后构建克隆文库，随机挑取阳性克隆进行测序至文库饱和，将测序结果及其最相近序列导入ARB序列分析软件包中进行系统发育分析，完成海绵细胞内共生放线菌的分子检测。本发明建立了一套较为全面、准确的海绵细胞内共生放线菌的分子检测方法。
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公开(公告)号：CN101974626B
公开(公告)日：2012-08-29
申请号：CN201010503053.7
申请日：2010-10-12
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种细菌检测技术领域的基于量子点荧光原位杂交的海绵细胞内共生细菌的检测方法，通过获取海绵单细胞，按照经典的荧光原位杂交方法，采用生物素标记的寡核苷酸探针对海绵单细胞内的微生物基因组DNA进行杂交，最后采用链亲和素标记的量子点进行孵育处理，得到在激发光为紫外区的荧光显微镜下呈现蓝色的海绵细胞以及呈现红色的细菌。本发明将机械法与化学法相结合，可以快速获取海绵细胞，避免海绵细胞自发荧光的干扰，成功探测到海绵细胞内的细菌。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101948891A
公开(公告)日：2011-01-19
申请号：CN201010278110.6
申请日：2010-09-10
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种细菌培养技术领域的发酵萎缩芽孢杆菌制备Bacillamide C的培养基及其制备及应用方法，该培养基的组分及含量为：3.64g/L玉米淀粉、6.0g/L胰蛋白胨、6.29g/L碳酸钙、4.0g/L大豆蛋白胨、0.10g/L半胱氨酸和0.02g/L色氨酸，溶剂为人工海水。本发明不仅能满足摇瓶实验的需要，亦能满足发酵罐发酵大量制备Bacillamide C的要求。
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公开(公告)号：CN1309840C
公开(公告)日：2007-04-11
申请号：CN200510029322.X
申请日：2005-09-01
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/04
Abstract: 一种海绵中具有抗菌活性协同增强效应的组合菌筛选方法。首先采用海绵浸泡液稀释涂平板和海绵碎块直接培养两种途径分离微生物，经单菌落反复划线得到纯菌株；以标准致病菌为指标菌，采用抑菌圈法进行抗菌活性菌筛选；对得到的活性菌进行组合，通过对比单菌的抗菌活性变化得到抗菌功能协同增强的活性菌组合；将活性菌组合的发酵液的乙酸乙酯萃取物添加到指标菌的培养基中，通过观测指标菌细胞浓度与生长曲线的变化对活性菌组合进一步确认；最后采用形态学观察、生理生化分析与16S rDNA序列信息相结合的方法对活性菌组合的组成菌进行种属鉴定。本发明可以得到单菌所不具备的抗菌效果，从而实现多菌协同诱导产生的活性物质的制备。
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公开(公告)号：CN118388604A
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202410497051.3
申请日：2024-04-24
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种从殷格翰篮状曲霉中提取分离具有抗疟原虫活性环卤代环五肽类化合物的方法，通过从深海真菌殷格翰篮状曲霉(Hamigera ingelheimensis MSC5)的发酵产物中提取得到，具体为：将深海真菌殷格翰篮状曲霉(Hamigera ingelheimensis MSC5)进行规模化发酵培养，将发酵产物通过萃取和细致逐级分离得到。该卤代环五肽化合物结构式为：#imgabs0#
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公开(公告)号：CN111850066A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010686630.4
申请日：2020-07-16
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12P17/16 , C12N1/20 , C07D417/12 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一种前体指导的Bacillamide卤代类似物的制备方法，包括如下步骤：将海洋来源萎缩芽孢杆菌Bacillus atrephaeus C89经菌种活化，种子培养后用于摇瓶发酵，在菌株摇瓶发酵的5-7h添加终浓度为0.2-0.6mM的6-氯-色氨酸，在发酵48h后终止发酵，发酵培养液经分离纯化后获得6-Cl-Bacillamide C。本发明方法利用微生物胞内酶的底物宽泛性，将色氨酸的衍生物6-氯-色氨酸添加到培养基中，通过生物合成的方法将氯元素引入到了天然产物中。
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公开(公告)号：CN106167809B
公开(公告)日：2019-11-01
申请号：CN201610396756.1
申请日：2016-06-06
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明提供了一种海洋萎缩芽孢杆菌外源DNA的转入方法，包括如下步骤：对供体菌株、辅助菌株和受体菌株分别进行培养，并分别检测供体菌株培养液、辅助菌株培养液和受体菌株培养液的OD600；将前步骤中培养后的供体菌株、辅助菌株和受体菌株等量混匀，进行三亲本杂交，并筛选出杂交成功的菌株，记为三亲本杂交菌株；筛选出带有质粒菌株的萎缩芽孢杆菌C89/pRP1028；提取质粒pRP1028；将质粒pRP1028转化到大肠杆菌中，并提取大肠杆菌的质粒，进行测序验证。本发明具有如下的有益效果：对特殊培养和难于转化菌株的外源基因的转化带有借鉴意义。
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