黑曲霉连续发酵生产柠檬酸的方法

    公开(公告)号:CN104087624B

    公开(公告)日:2017-08-08

    申请号:CN201410329786.1

    申请日:2014-07-11

    Abstract: 一种黑曲霉连续发酵生产柠檬酸的方法,包括以下步骤:(1)黑曲霉经过逐级扩大培养,获得成熟的孢子;(2)孢子液接种至种子培养基,培养成为成熟的种子液;(3)成熟的种子液转接至发酵培养基F1;(4)发酵培养后,分割发酵液为两部分;其中一部分发酵液继续发酵完毕,获得柠檬酸;(5)分割出的另一部分发酵液经分散器分散处理,获得分散菌丝的发酵液;(6)将分散菌丝发酵液接入发酵培养基F2;发酵培养后,回到步骤(4),如此重复实现连续发酵。本发明显著降低生产成本与运行成本,显著缩短生产周期,提高生产效率;同时提高设备利用率,降低劳动强度,过程简便易操作,可以广泛应用于柠檬酸的生产。

    一株产纤维素酶的地衣芽孢杆菌及其应用

    公开(公告)号:CN106479912A

    公开(公告)日:2017-03-08

    申请号:CN201610812192.5

    申请日:2016-09-08

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一株产纤维素酶的地衣芽孢杆菌,以及包含该地衣芽孢杆菌的微生态制剂、该微生态制剂在促进秸秆腐熟中的应用,属于微生物技术领域。该菌种已于2016年4月18日保藏于中国典型培养物保藏中心,菌种保藏号是CCTCC No.M 2016202,其采用液态发酵、离心、喷雾干燥工艺获得单菌粉,与枯草芽孢杆菌CCTCC No.M 2011443、凝结芽孢杆菌CCTCC No.M 2015273、黑曲霉按一定比例混合,并添加辅料从而制得秸秆腐熟剂。本发明添加了地衣芽孢杆菌CCTCC No.M 2016202的秸秆腐熟剂能原位降解农作物秸秆、促进秸秆还田,尤其在秋冬季节温度较低的条件下仍能发挥作用。

    一种生物有机肥的制备方法

    公开(公告)号:CN106467419A

    公开(公告)日:2017-03-01

    申请号:CN201610812131.9

    申请日:2016-09-08

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: Y02W30/43 C05F3/00 C05F17/00 C05F11/00 C05F11/08

    Abstract: 本发明涉及一种生物有机肥的制备方法,将禽畜粪便、秸秆混匀之后拌入微生物菌剂,堆置发酵,至彻底腐熟之后进行干燥、造粒,从而得到生物有机肥成品。其中所使用的微生物菌剂由微生物单菌粉及辅料组成,微生物单菌粉包括地衣芽孢杆菌CCTCC No.M 2016202、枯草芽孢杆菌CCTCC No.M 2011443、凝结芽孢杆菌CCTCC No.M 2015273、黑曲霉、酿酒酵母。所得生物有机肥产品有效期长达12个月以上,远超过现行生物有机肥标准NY 884-2012所规定的不低于6个月;有机肥生产厂家可以在需求淡季进行制备、仓储来满足旺季需求,不需要在短时间内满负荷甚至超负荷运转,有利于平稳生产。

    鼠灰链霉菌AMP脱氨酶基因的毕赤酵母真核表达方法

    公开(公告)号:CN103805629B

    公开(公告)日:2016-10-05

    申请号:CN201410042060.X

    申请日:2014-01-28

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开一种鼠灰链霉菌AMP脱氨酶基因的毕赤酵母真核表达方法。该方法以鼠灰链霉菌基因组为模板,设计特异性引物扩增AMP脱氨酶基因序列,在其两端加入酶切位点和组氨酸标签,并亚克隆至组成型表达载体pGAP9K以构建重组质粒,酶切线性化后电转化毕赤酵母,筛选阳性克隆转化子,接种至发酵培养基进行液体发酵培养,取发酵液上清,即得AMP脱氨酶表达产物。本发明首次在毕赤酵母中成功表达了鼠灰链霉菌来源的AMP脱氨酶,实验结显示该重组酶具有较高的酶活,且酶活性稳定,易于纯化,可应用于食品、医药等领域,为AMP脱氨酶的工业化生产奠定了基础。

    一种促进微生物产漆酶的方法

    公开(公告)号:CN105907731A

    公开(公告)日:2016-08-31

    申请号:CN201610507284.2

    申请日:2016-06-30

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种促进微生物产漆酶的方法,属于微生物发酵领域。本发明方法包括在阿魏蘑等高等真菌液态发酵过程中,添加β?胡萝卜素及其它部分类胡萝卜素物质或者产β?胡萝卜素微生物以及含有β?胡萝卜素及其它部分类胡萝卜素物质的提取物来提高漆酶的活性,提高幅度最高可达不添加的12倍。此方法简单、可提高漆酶活性的幅度较大,具有良好的应用前景。

    一种黑曲霉麸曲孢子活力的评价方法

    公开(公告)号:CN104789635A

    公开(公告)日:2015-07-22

    申请号:CN201510224891.3

    申请日:2015-05-05

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种黑曲霉麸曲孢子活力的评价方法:(1)取培养成熟的黑曲霉麸曲孢子,用磷酸缓冲液清洗,过滤,获得黑曲霉麸曲孢子悬液;(2)添加0.05%(v/v)的吐温80,超声波处理,获得分散均匀的单孢子悬液,调节孢子悬液浓度为106~107个/mL;(3)用磷酸缓冲液配置8~14mg/L浓度的亚甲基蓝溶液;(4)将步骤(2)与(3)的溶液按照v/v为1:1的比例于比色皿中混合均匀密封,反应420s,于663nm波长处扫描吸光度-时间曲线;(5)测定反应体系初始与反应结束的吸光度,以吸光度的变化表征细胞活力大小。本发明可以有效缩短成熟种子培养时间,提高原料利用率;其它微生物孢子活力评价,均适用本技术。

    一株能够利用木糖的酵母Spathasporapassalidarum的表达系统

    公开(公告)号:CN104630257A

    公开(公告)日:2015-05-20

    申请号:CN201510004921.X

    申请日:2015-01-06

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一株能够利用木糖的酵母Spathaspora passalidarum的表达系统,包括一种新型表达载体,其为环状,从5’-3’依次可操作性地连接有以下元件:pMD19-Tsimple质粒骨架、rDNA同源重组序列、外源基因表达盒和筛选标记基因表达盒;所述外源基因表达盒自上游至下游依次包括启动子、外源基因插入酶切位点以及转录终止子;所述筛选标记基因表达盒包括启动子、抗生素抗性基因、转录终止子。所述能够利用木糖的酵母为Spathaspora passalidarum。本发明的表达载体可实现在Spathaspora passalidarum中的整合型稳定表达,对木糖利用酵母Spathaspora passalidarum的基础理论研究及产品开发具有重要的意义。

    一株能够利用木糖的酵母Candidajeffriesii的表达系统

    公开(公告)号:CN104561082A

    公开(公告)日:2015-04-29

    申请号:CN201510006229.0

    申请日:2015-01-06

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一株能够利用木糖的酵母Candida jeffriesii的表达系统,包括一种表达载体,从5’-3’依次可操作性地连接有以下元件:pMD19-Tsimple质粒骨架、rDNA同源重组序列、外源基因表达盒和筛选标记基因表达盒;外源基因表达盒自上游至下游依次包括启动子、外源基因插入酶切位点以及转录终止子;筛选标记基因表达盒包括启动子、抗生素抗性基因、转录终止子。本发明的表达载体可实现在Candida jeffriesii中的整合型稳定表达,对木糖利用酵母Candida jeffriesii的基础理论研究及产品开发具有重要的意义。

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