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公开(公告)号：CN112725467A
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN202110232856.1
申请日：2021-03-03
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种与抗禽致病性大肠杆菌相关的NLR信号通路及其应用，提供一种与抗禽致病性大肠杆菌相关的遗传标记，所述遗传标记为NLR信号通路。同时提供检测本发明第一方面所述的遗传标记的试剂在制备用于鉴定待测鸡抗禽致病性大肠杆菌的试剂盒的应用。以及提供一种用于鉴定抗禽致病性大肠杆菌的试剂盒，提供一种筛选抗禽致病性大肠杆菌的商品肉鸡的方法。通过本发明。利用与禽致病性大肠杆菌相关的标记基因进行标记辅助选择，能够有效提供家禽免疫能力。提供了NLR信号通路基因的序列及鉴定方法，通过通路基因的引物，可利用Sanger测序法建立高效准确快速的分子标记辅助育种技术，使免疫力提高，可在早期进行选育，降低育种成本，提高生产效益。
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公开(公告)号：CN111763691A
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN202010684844.8
申请日：2020-07-16
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/867
Abstract: 本发明涉及一种新的慢病毒载体导入鸡胚的方法，包括以下步骤：（1）对孵化48-58h的早期胚蛋（13-17 HH）取出后在无菌条件下使用镊子轻轻敲击蛋壳钝端开口，找到胚胎位置后，使用眼科镊轻轻剥去胚胎上层覆盖的外壳膜，露出胚胎；（2）将导入的慢病毒载体使用细胞培养基或细胞缓冲液稀释到固定滴度，对准暴露出的胚胎轻轻滴加，使慢病毒溶液覆盖胚胎；（3）滴加结束后加入200ul青链霉素至注射部位，然后使用医用胶带封口，完成慢病毒载体导入鸡胚。封口严实后继续放入孵化箱，根据下一步要求在不同阶段取出检测。通过本发明，可用于鸡胚外源基因导入、外源基因敲低或敲除和转基因鸡等生产研究。
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公开(公告)号：CN107389884B
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN201710607530.6
申请日：2017-07-24
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及食品学和畜牧学领域，具体涉及一种雪山鸡肉品质综合评价的方法。该方法是测定鸡肉样品的ATP、IMP、屠宰后1小时的pH值、系水力、剪切力、肉色和IMF这7个肉品质评价指标，分别将每个肉品质指标测得数据的平均值转换成对应等级的指标值，代入公式，计算出肉品质性状的适宜选择指数MQI值，依据MQI值得分确定鸡肉品质的优劣。本发明方法选定了7个主要的肉品质评价指标，规范了它们的测定方法，从而能够获得更加准确、可靠地实验数据；通过对各评价指标进行相关性分析，确定它们之间的相互关系，从而为建立统一的评价方法与标准提供参考。
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公开(公告)号：CN110283894A
公开(公告)日：2019-09-27
申请号：CN201910563547.5
申请日：2019-06-26
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6869 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种通过羽色结合分子遗传标记鉴别PGC移植后代鸡的鉴定方法，属于生物技术领域。为了解决PGC移植后代的鉴别问题，本发明采用后代鸡羽色和微卫星标记分析的方法成功对后代鸡的遗传来源进行鉴别。本发明适用于禽类的种质资源的保护和物种复原，本发明可行性强，鉴定准确，成本低。能够有效鉴别后代鸡的遗传组成，为基因编辑模型鸡生产提供技术支持。
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公开(公告)号：CN110205299A
公开(公告)日：2019-09-06
申请号：CN201910514421.9
申请日：2019-06-14
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/10
Abstract: 本发明涉及一种新型鸡CEF重编程为PGC的诱导体系的建立方法，属于生物技术领域。在分离的原代CEF中，慢病毒外源导入OCT4,SOX2,NANOG,LIN28重编程因子，连续培养21天后，利用SSEA-1抗体进行iPSC细胞株鉴定，鉴定为阳性的细胞株进行更换为BMP4/BMP8b/EGF诱导体系，诱导成为iPGC。本发明解决了濒危品种鸡PGC获取的数量低的问题，实现了濒危鸡品种的种质资源保护和物种复原工作。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107723313A
公开(公告)日：2018-02-23
申请号：CN201711031012.0
申请日：2017-10-30
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/89
CPC classification number: C12N15/89
Abstract: 本发明公开了一种外源物质导入鸡胚的方法，属于生物技术领域，具体包括如下步骤：（1）对孵育48-58h的13-17 HH早期胚蛋在无菌条件下开口，找到胚胎位置，剥去胚蛋外壳膜，露出胚胎血管；（2）将需要导入的外源物质注入到玻璃注射针中，通过显微注射仪注射到鸡胚血管中；（3）注射后加入青链霉素至注射部位，然后使用医用胶带封口。本发明旨在鸡胚早期（13-17 HH）通过血管注射导入外源物质，为鸡胚注射的广泛应用奠定基础。本方法适用于鸡胚外源基因或细胞导入，转基因鸡和嵌合体制备，操作简便快速，外源物质导入效率高。
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公开(公告)号：CN106834460A
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201710049896.6
申请日：2017-01-23
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12Q2600/124 , C12Q2565/125
Abstract: 本发明公开了一种新的鸡胚蛋性别快速鉴定方法：种蛋孵化至16、17或18日龄，通过1ml注射器于胚蛋尖端无菌获取尿囊液（10μL），取样后石蜡封口进行正常孵化；以取得的尿囊液为模板，设计CDH‑W特异性引物进行PCR扩增，通过凝胶电泳检测扩增产物并进行性别鉴定：雄性扩增为双带（600bp和450bp），雌性为单带（450bp）；正常孵化出雏后统计孵化率和死亡率并与对照组进行生物统计学分析；对比性别鉴定的结果和出雏后仔鸡的剖检结果，进行关联分析，统计性别鉴定的准确率（准确率达99%，视为100%有效）。
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公开(公告)号：CN105821116A
公开(公告)日：2016-08-03
申请号：CN201610237236.6
申请日：2016-04-15
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/66 , C12Q1/44 , G01N33/68 , G01N2333/47
Abstract: 本发明公开了一种应用CRISPR/Cas9技术对绵羊MSTN基因进行定向敲除，并验证其对骨骼肌卫星细胞分化影响效果的方法，具体内容如下：(1)目的基因克隆；(2)gRNA设计及合成；(3)CRISPR/Cas9基因敲除载体构建；(4)CRISPR/Cas9基因敲除载体外源活性检测；(5)CRISPR/Cas9基因敲除载体内源活性检测；(6)CRISPR/Cas9基因敲除载体敲除效果检测。本发明的优越性在于：1、实验周期较短速；2、方法简单易行，可重复性强，在普通实验室即可进行；3、运用该方法构建的活性载体，毒副作用小，可用于转基因动物的制备与生产；4、该方法非特异剪切较少，显著提高了基因靶向敲除效率高。5、该方法适用性高。
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公开(公告)号：CN104762265A
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201510195770.0
申请日：2015-04-22
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种获得山羊诱导性多能干细胞的新方法：本方法首先从山羊睾丸组织、皮肤组织和小肠组织中提取总RNA，反转录获得cDNA片段，并以此为模版克隆获得山羊的Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc多能性转录因子的编码序列。利用胰酶消化法获得山羊及小鼠的胎儿成纤维细胞，并制备饲养层细胞和配制细胞培养液。利用体外转录试验获得的各多能性转录因子的mRNA，经脂质体2000介导，转染山羊胎儿成纤维细胞，以制备山羊iPS细胞。克隆扁平、致密、核质比大、克隆边界清晰和折光性强的细胞集落判定为山羊iPS细胞集落。采用单克隆挑取，分别用胰酶消化，单独接种至新的接种有饲养层的培养孔板中继续培养，以获得山羊iPS细胞系。
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公开(公告)号：CN104745527A
公开(公告)日：2015-07-01
申请号：CN201510193606.6
申请日：2015-04-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种新的快速鸡胚盘的分离方法：首先将鸡胚钝端向上握在手中，用镊子尖头轻轻在受精蛋中部钻出一个小孔后，将镊子一端插入小孔，沿着赤道线方向，依次用镊子夹碎蛋壳，延赤道线分离蛋壳一圈后，轻轻的剥离钝端蛋壳，在此过程中应尽量保持鸡胚水平，防止卵黄随蛋清流出；剥离蛋壳后，用镊子将蛋清从卵黄中分离；使用镊子的侧面拨动卵黄，寻找胚盘；找到胚盘后，尽量将胚盘拨到正中央，用剪刀沿胚盘四周呈正方形剪开，此时，使用镊子夹住将含有胚盘的正方形卵黄膜一角，沿水平方向轻轻拉出来，将此卵黄膜放入37℃的PBS的培养皿中，轻轻晃动培养皿,使卵黄和卵黄膜从胚盘上脱离下来，从而获得了完整的胚盘。
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