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公开(公告)号:CN102787114A
公开(公告)日:2012-11-21
申请号:CN201210284031.5
申请日:2012-08-11
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体为一种定向无缝DNA片段连接方法。本发明的连接引物两端要与待连接DNA片段2a和3a的待连接处两侧各有5-40个碱基的序列完全互补;由于引物的tm值随着碱基数量和GC含量的增加变高,而完成连接反应的TaqDNA连接酶活性的温度区间在65℃~50℃之间,所以连接引物1与单个待连接片段之间的互补碱基数量应使连接引物与单个待连接片段之间的tm值处于50℃~65℃之间;将片段先行磷酸化,或者将引物磷酸化,然后进行PCR扩增,以保证待连接片段的5’端带有磷酸基团。本发明的连接过程中不发生顺序错位,不产生串联寡聚体,不产生载体和片段的自连环化,操作自由度高,操作简单,周期短,价格低廉。
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公开(公告)号:CN101054571A
公开(公告)日:2007-10-17
申请号:CN200710038631.2
申请日:2007-03-29
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于细胞培养技术领域,具体为一种胰岛细胞体外增殖方法。本发明采用重组碱性成纤维细胞生长因子处理体外培养的胰岛细胞,使其大量增殖,传代可达20代以上,增殖时间超过两个月,并在一定的时间内保留胰岛内分泌的特征。经碱性成纤维细胞生长因子刺激的胰岛细胞经肝门静脉移植给链脲霉素诱导的糖尿病大鼠肝中,糖尿病症状在一周内完全恢复。在未经任何免疫抑止剂处理的情况下,接受移植的糖尿病大鼠在超过两个月的时间内血糖维持正常水平,体重逐渐上升,同时移植后二十天糖耐量实验证明移植大鼠对葡萄糖的响应得到明显的改善。依本发明所述方案增殖的胰岛细胞在植入糖尿病模型动物后,一方面在肝脏内表达胰岛素,另一方面具有明显促进胰岛再生的功能,并上述两方面达到治疗糖尿病的目的。
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公开(公告)号:CN1661082A
公开(公告)日:2005-08-31
申请号:CN200410016607.5
申请日:2004-02-27
Applicant: 复旦大学 , 上海人类基因组研究中心
Abstract: 本发明公开了一种检测原发性高血压易感性的方法,它包括检测个体的过氧化氢酶基因CAT、转录本和/或蛋白与正常相比是否存在变异,存在变异就表明该个体患原发性高血压的可能性大于正常人群。本发明还公开了相应的检测试剂盒。
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公开(公告)号:CN1661081A
公开(公告)日:2005-08-31
申请号:CN200410016606.0
申请日:2004-02-27
Applicant: 复旦大学 , 上海人类基因组研究中心
Abstract: 本发明公开了一种检测原发性高血压易感性的方法,它包括检测个体的过氧化氢酶基因CAT、转录本和/或蛋白与正常相比是否存在变异,存在变异就表明该个体患原发性高血压的可能性大于正常人群。本发明还公开了相应的检测试剂盒。
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公开(公告)号:CN1661072A
公开(公告)日:2005-08-31
申请号:CN200410016597.5
申请日:2004-02-27
Applicant: 复旦大学 , 上海人类基因组研究中心
Abstract: 本发明公开了一种检测原发性高血压易感性的方法,它包括检测个体的精氨酸升压素受体1A基因AVPR1A、转录本和/或蛋白与正常相比是否存在变异,存在变异就表明该个体患原发性高血压的可能性大于正常人群。本发明还公开了相应的检测试剂盒。
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公开(公告)号:CN1661071A
公开(公告)日:2005-08-31
申请号:CN200410016596.0
申请日:2004-02-27
Applicant: 复旦大学 , 上海人类基因组研究中心
Abstract: 本发明公开了一种检测原发性高血压易感性的方法,它包括检测个体的载脂蛋白C2基因APOC2、转录本和/或蛋白与正常相比是否存在变异,存在变异就表明该个体患原发性高血压的可能性大于正常人群。本发明还公开了相应的检测试剂盒。
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公开(公告)号:CN1661064A
公开(公告)日:2005-08-31
申请号:CN200410016542.4
申请日:2004-02-25
Applicant: 复旦大学 , 上海人类基因组研究中心
Abstract: 本发明公开了一种检测原发性高血压易感性的方法,它包括检测个体的触珠蛋白基因HP、转录本和/或蛋白与正常相比是否存在变异,存在变异就表明该个体患原发性高血压的可能性大于正常人群。本发明还公开了相应的检测试剂盒。
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公开(公告)号:CN1661059A
公开(公告)日:2005-08-31
申请号:CN200410016530.1
申请日:2004-02-25
Applicant: 复旦大学 , 上海人类基因组研究中心
Abstract: 本发明公开了一种检测原发性高血压易感性的方法,它包括检测个体的胰岛素受体基因INSR、转录本和/或蛋白与正常相比是否存在变异,存在变异就表明该个体患原发性高血压的可能性大于正常人群。本发明还公开了相应的检测试剂盒。
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公开(公告)号:CN1661058A
公开(公告)日:2005-08-31
申请号:CN200410016529.9
申请日:2004-02-25
Applicant: 复旦大学 , 上海人类基因组研究中心
Abstract: 本发明公开了一种检测原发性高血压易感性的方法,它包括检测个体的触珠蛋白基因HP、转录本和/或蛋白与正常相比是否存在变异,存在变异就表明该个体患原发性高血压的可能性大于正常人群。本发明还公开了相应的检测试剂盒。
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公开(公告)号:CN1661055A
公开(公告)日:2005-08-31
申请号:CN200410016526.5
申请日:2004-02-25
Applicant: 复旦大学 , 上海人类基因组研究中心
Abstract: 本发明公开了一种检测原发性高血压易感性的方法,它包括检测个体的触珠蛋白基因HP、转录本和/或蛋白与正常相比是否存在变异,存在变异就表明该个体患原发性高血压的可能性大于正常人群。本发明还公开了相应的检测试剂盒。
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