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公开(公告)号:CN105505846A
公开(公告)日:2016-04-20
申请号:CN201610008737.7
申请日:2016-01-07
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明提供了一种表面展示谷氨酸脱氢酶的重组芽孢,该重组芽孢融合表达枯草芽孢杆菌的锚定蛋白CotG与谷氨酸脱氢酶GDH2,所述的锚定蛋白CotG,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;所述的谷氨酸脱氢酶GDH2,其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明还提供了该重组芽孢在制备L-2-氨基丁酸中的应用,重组芽孢上锚定的谷氨酸脱氢酶蛋白发挥全细胞催化剂功能,以α-酮丁酸为底物,催化生产L-2-氨基丁酸,发酵液中L-2-氨基丁酸的浓度可达38.72g/L,转化率为95.6%。
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公开(公告)号:CN119372073A
公开(公告)日:2025-01-28
申请号:CN202411668547.9
申请日:2024-11-21
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/81 , C12N15/12 , C12N15/31 , C12N15/56 , C12N15/62 , C12P19/14 , C12P19/12 , C12P19/00 , C12P19/04 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种基于粘附蛋白的酶高效表面展示的毕赤酵母基因工程菌及其构建方法和固定化连续催化的应用,在出发菌株毕赤酵母中异源表达粘附蛋白基因、β‑半乳糖苷酶基因LacA和细胞壁锚定蛋白基因Pir1p。所述毕赤酵母基因工程菌是在毕赤酵母GS115基因组中整合表达了细胞壁粘附蛋白基因,显著增强了毕赤酵母细胞成膜能力;然后多拷贝整合β‑半乳糖苷酶表面展示基因,并以组成型启动子控制目标蛋白β‑半乳糖苷酶展示于酵母表面。基于粘附蛋白的酶高效表面展示的毕赤酵母基因工程菌能进行多批次连续催化且效果优于未整合生物膜基因的酶表面展示基因工程菌,经6批次后相对转化率仍保持78%,在固定化连续催化上具有良好的工业化应用前景。
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公开(公告)号:CN119120624A
公开(公告)日:2024-12-13
申请号:CN202410998688.0
申请日:2024-07-24
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本申请公开了茶多酚及其组合物在提高蛹虫草发酵虫草素产量上的应用,通过在蛹虫草发酵培养基中加入茶多酚后,可以有效提高虫草素的产量,同时,通过在发酵培养基中进一步添加Fe2+、甘氨酸,在以上发酵条件下可有效提高约56.71%的虫草素产量,具有操作简单,成本低等优势。本发明还进一步提出了一种提高蛹虫草发酵虫草素产量的发酵培养基和发酵培养方法,在无需进行基因改造,只需要调整发酵培养基来提高虫草素产量,过程简便、高效。
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公开(公告)号:CN118561932A
公开(公告)日:2024-08-30
申请号:CN202410654691.0
申请日:2024-05-24
Applicant: 南京工业大学
IPC: C07H1/06 , C07H19/067
Abstract: 本发明公开了一种制备高品质胞苷的结晶方法,包括如下步骤:将胞苷水溶液在15~60℃下持续搅拌,向所述胞苷水溶液中加入粒径为30~200μm的晶种,养晶4~8h后变速降温至4~10℃,经陈化后过滤、洗涤、干燥,得到所述胞苷晶体。本申请通过优化搅拌桨类型、搅拌桨叶高度、初始浓度、降温区间、降温速率、晶种添加量、晶种粒径、晶种添加时溶液过饱和度的具体数值,全方面的对结晶曲线进行设计,通过本工艺对影响结晶的各种因素优化后的产品,具有更大粒径,改善了之前工艺的长径比,CV值更小,优化后的产品晶习多为短棒状,不易结块,流动性更好。本发明的制备过程操作简单,溶剂只涉及到水,工艺稳定,简单环保。
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公开(公告)号:CN116855435A
公开(公告)日:2023-10-10
申请号:CN202310947954.2
申请日:2023-07-31
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于微生物及发酵工程技术领域,具体涉及一种表达纤维素合成酶类似蛋白的重组谷氨酸棒状杆菌及其制备方法与应用。本发明所述的重组谷氨酸棒状杆菌为采用质粒游离表达或在基因组整合表达纤维素合成酶类似蛋白CslA得到的。本发明所提供的制备方法在应用中不仅提高了谷氨酸棒状杆菌生物膜的形成能力,有利于吸附固定化反复批次发酵过程,还提高了谷氨酸棒状杆菌生产赖氨酸的能力,使得谷氨酸棒状杆菌在游离发酵和吸附固定化反复批次发酵产赖氨酸的效率得到了提高,在吸附固定化反复批次发酵中产量提高了17%以上。
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公开(公告)号:CN116836965A
公开(公告)日:2023-10-03
申请号:CN202310054618.5
申请日:2023-02-03
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明提供了一种N‑乙酰葡萄糖胺异构酶突变体及其应用。所述的N‑乙酰葡萄糖胺异构酶突变体,是对野生型N‑乙酰葡萄糖胺异构酶位于第73位谷氨酸、第110位谷氨酰胺、第171位亮氨酸、第172位丙氨酸或第198位丙氨酸中的任意一个或几个位点进行突变得到的。与野生型N‑乙酰葡萄糖胺异构酶相比,本发明所构建的N‑乙酰葡萄糖胺异构酶突变体,具有更高的催化活性,其酶活性提升了27‑55%。本发明改造过后的N‑乙酰葡萄糖胺异构酶突变体,可以更好的应用于N‑乙酰神经氨酸的制备上,更适于工业化应用。
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公开(公告)号:CN116536176A
公开(公告)日:2023-08-04
申请号:CN202310555884.6
申请日:2023-05-17
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株重组毕赤酵母基因工程菌及其构建方法和应用。所述重组毕赤酵母基因工程菌是由出发毕赤酵母的PAS_FragB_0067基因过表达后改造得到。本发明以能够产木聚糖酶的毕赤酵母表达菌Komagataella phaffii GS115‑xyn为出发菌,首次过表达PAS_FragB_0067基因,成功构建重组菌0067*,提升了毕赤酵母生物成膜能力,解决现有技术中毕赤酵母菌成膜能力弱,发酵效率低等的问题。并且改造后的毕赤酵母基因工程菌在连续发酵过程中发酵性能更高,产酶酶活性更强,在发酵上具有明显优势。
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公开(公告)号:CN112725323B
公开(公告)日:2023-05-26
申请号:CN202110163676.2
申请日:2021-02-05
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种重组耐盐腺苷酸环化酶及其应用,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,长度为1008 bp,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,共335个氨基酸,理论分子量为36.09 kDa。该耐盐腺苷酸环化酶最适pH为10.0,最适温度为45℃,该重组耐盐腺苷酸环化酶活性随着氯化钠浓度的提高而增强,在氯化钠浓度为2.5 M时酶活性达到最大(约22倍),具有良好的耐盐性,与现有报道的腺苷酸环化酶相比,其在高渗条件下能更好地提高生产效率,具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN111254151B
公开(公告)日:2021-10-29
申请号:CN202010249275.4
申请日:2020-04-01
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物技术及基因工程领域,具体公开了一种邻苯二酚1,2‑双加氧酶基因及其在合成4位取代顺,顺‑粘康酸中的应用。所述的苯二酚1,2‑双加氧酶编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。该基因表达的产物邻苯二酚1,2‑双加氧酶,能高效催化4位取代儿茶酚生成相应的4位取代顺,顺‑粘康酸。本发明还提供了一种利用分批补料策略进行全细胞催化制备4位取代顺,顺‑粘康酸的方法,该方法过程简单、反应条件温和以及对环境友好,符合绿色发展经济的道路的概念,为安全大批量生产提供了简单便捷的途径。
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公开(公告)号:CN113151204A
公开(公告)日:2021-07-23
申请号:CN202110522691.1
申请日:2021-05-13
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开一种邻苯二酚1,2‑双加氧酶突变体及其应用,通过定向突变得到了2个突变酶CatAV90A和CatAI206V,在以4‑乙基儿茶酚为底物时,突变体酶CatAV90A和CatAI206V与底物的亲和性分别是野生酶的1.62倍和2.03倍,催化效率分别是野生型的1.44倍和2.05倍,以4‑丙基儿茶酚为底物时,突变体酶CatAV90A和CatAI206V与底物的亲和性分别是野生酶的1.59倍和2.42倍,催化效率分别是野生型的1.31倍和2.11倍,利用突变酶CatAI206V催化合成4‑乙基粘康酸产量提高了13.5%,催化合成4‑丙基粘康酸产量提高了24.4%,解决了在合成4位取代粘康酸的过程中酶催化效率低的问题,为利用该酶及其编码基因来生物合成4位取代粘康酸创造了良好的条件,反应条件温和,操作简便,具有工业应用前景。
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