公开(公告)号：CN109234245A

公开(公告)日：2019-01-18

申请号：CN201811105086.9

申请日：2018-09-21

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 沈其荣 ,  刘东阳 ,  刘秋梅 ,  黄启为 ,  李荣

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N1/15 ,  C12R1/885

Abstract: 本发明公开了一种吲哚乙醛脱氢酶基因ald2及其过表达方法和应用。一种哈茨木霉NJAU4742中IAA生物合成的关键基因吲哚乙醛脱氢酶基因ald2，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。含有吲哚乙醛脱氢酶基因ald2的过表达方法。吲哚乙醛脱氢酶基因ald2及其过表达片段在构建IAA产量显著提高的哈茨木霉NJAU4742基因工程菌中的应用。本发明最新发现的哈茨木霉NJAU4742中ald2基因在IAA合成过程中具有重要的作用，基因的超表达后均能显著增加植物主根系根毛区中柱鞘位置的IAA含量。本发明为新型木霉生物有机肥的研制、生态农业的发展提供了理论基础和技术保障。

公开(公告)号：CN108148876B

公开(公告)日：2018-11-16

申请号：CN201810031220.9

申请日：2018-01-12

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 沈其荣 ,  张建 ,  黄启为 ,  凌宁

IPC: C12N15/90 ,  C12N1/15 ,  C12R1/885

Abstract: 本发明涉及一种哈茨木霉菌基因敲除方法。一种哈茨木霉基因敲除方法，包括(1)构建敲除基因片段；(2)PEG‑CaCl2原生质体转化；(3)菌落PCR筛选阳性突变子。本发明通过建立一套完整的哈茨木霉基因敲除方法，同源同组效率达到20％；同时结果菌落PCR技术，极大缩短获得阳性转化子的周期，高效敲除靶标基因。

公开(公告)号：CN108410903A

公开(公告)日：2018-08-17

申请号：CN201810128686.0

申请日：2018-02-08

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 沈其荣 ,  缪有志 ,  黄启为

IPC: C12N15/81 ,  C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12P19/14 ,  C12P19/02 ,  C12P19/00

CPC classification number: C12N9/2434 ,  C12N15/815 ,  C12P19/00 ,  C12P19/02 ,  C12P19/14 ,  C12Y302/01008

Abstract: 本发明公开了耐低pH值的内切木聚糖水解酶基因、含有该基因的工程菌及其应用。内切木聚糖水解酶基因，其核苷酸序列为SEQ ID NO.1。其所编码的内切木聚糖水解酶蛋白质氨基酸序列为SEQ ID NO.2。将该内切木聚糖水解酶基因构建重组质粒并导入Pichia pastoris X33即获得含有该基因的基因工程菌P.pastoris X33-x10c。该耐低pH值的内切木聚糖水解酶能够高效降解作物秸秆中大量存在的木聚糖，在pH值2.0条件下能够稳定存在，能够满足微生物有机肥生产工艺中对耐低pH值秸秆降解酶的特殊需求；同时，其耐低pH值的特性能够有效避免动物胃酸对功能酶的失活作用，适合应用于动物饲料行业。

公开(公告)号：CN108164302A

公开(公告)日：2018-06-15

申请号：CN201810011113.X

申请日：2018-01-05

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 沈其荣 ,  黄启为 ,  刘东阳 ,  李荣 ,  凌宁

IPC: C05F17/02

Abstract: 本发明公开了滚筒式微生物有机肥二次固体发酵工艺及设备。一种二次固体发酵制备微生物有机肥的方法，包括先向堆肥物料中加入酸解氨基酸溶液，在70±5℃进行搅拌中和反应24‑40小时；反应结束时物料中土著微生物含量控制在106个/克以下；向中和后的堆肥中接入功能菌种子液，进行二次固体发酵；温度为35±5℃，时间为48‑75小时。本发明使用自制特殊设备将功能菌添加后进行二次固体发酵，以促进和提高生物有机肥料产品中功能菌与有机载体的磨合程度、增加功能菌含量稳定性、提高生物有机肥料进入土壤后定殖效果，最终促进产品的田间生物效果。

公开(公告)号：CN108129234A

公开(公告)日：2018-06-08

申请号：CN201711456822.0

申请日：2017-12-28

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 黄启为 ,  沈其荣

IPC: C05G3/04

Abstract: 本发明公开了一种用于恢复老苹果树生产力的专用全元木霉生物有机肥料及其制备方法和应用。该全元生物有机肥料中含有2×107cfu/g以上的SQR-T037、全氮含量质量比为5～7.5％，全氮中质量比60％以上为有机氮，总氮磷钾养分质量比为10～15％、有机质含量质量比30～40％、游离氨基酸和小肽2-3％，含水量质量比≤30％，pH6-7。施用本发明全元木霉生物有机肥后，解决了20年以上的老苹果园普遍存在的土壤养分供应不协调和微生物区系失衡的问题，显著提升了果实品质；促进了新梢生长和下一年花芽分化；还解决了老苹果园普遍存在的地下部须根系少的问题，促进了老果园苹果树地下部须根的快速生长。

公开(公告)号：CN106591147A

公开(公告)日：2017-04-26

申请号：CN201611122692.2

申请日：2016-12-08

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 王世梅 ,  黄启为 ,  沈其荣 ,  李真 ,  陈莎莎 ,  冯哲叶 ,  邓照亮 ,  杨华 ,  沈标

IPC: C12N1/14 ,  C05F11/08 ,  C09K17/14 ,  C12R1/685 ,  C09K101/00 ,  C09K109/00

CPC classification number: C12R1/685 ,  C05C11/00 ,  C05F11/08 ,  C09K17/14 ,  C09K2101/00 ,  C09K2109/00 ,  C12N1/14 ,  C05F3/00

Abstract: 本发明公开一种黑曲霉NJDL‑12菌株及其在滨海盐碱土改良上的应用，属于农业集约化生产技术。本发明分离得到的菌株NJDL‑12属于黑曲霉(Aspergillus niger)，于2015年10月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC NO.11544。黑曲霉菌NJDL‑12能大量分泌草酸，结合盐碱土中的Ca2+，形成草酸钙，固结土壤中的Ca2+，降低土壤盐度，改善土壤团粒结构，增加土壤孔隙度。由该菌株NJDL‑12制备的生物有机肥，施入土壤后，降低土壤pH及盐度，改善土壤团粒结构，改良盐碱土，促进作物生长，应用效果显著。

公开(公告)号：CN106244614A

公开(公告)日：2016-12-21

申请号：CN201610695491.5

申请日：2016-08-20

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 沈其荣 ,  张建 ,  黄启为 ,  李荣 ,  刘东阳

IPC: C12N15/80 ,  C12N15/64 ,  C12N1/15 ,  A01N63/04 ,  A01P3/00 ,  C05F11/08

Abstract: 本发明公开一株强寄生广谱病原真菌的哈茨木霉工程菌株的构建及其应用，本发明首次发现了Nox1介导的H2O2是SQR-T037重寄生病原真菌过程中的重要抑菌成分，研究表明，敲除基因nox1，突变子失去重寄生核盘菌、尖孢镰刀菌和齐整小菌核；构建互补表达nox1突变子，恢复野生型所具有的重寄生能力。确实Nox1直接调控SQR-T037重寄生病原真菌。构建过量表达nox1的工程菌，增加菌丝表面H2O2的浓度，显著提高重寄生灰霉病菌、交链格孢菌、尖孢镰刀菌、核盘菌、立枯丝核菌和齐整小菌核的能力。本发明可有效解决以木霉为主的微生物制剂及相关生物肥料应用中功能菌抑制病害发生和田间应用效果不稳定的问题。

公开(公告)号：CN106105450A

公开(公告)日：2016-11-16

申请号：CN201610490519.1

申请日：2016-06-28

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 黄启为 ,  沈其荣

IPC: A01B77/00

CPC classification number: A01B77/00

Abstract: 本发明涉及一种防控作物枯萎病的土壤处理与生物有机肥联用的方法。本发明利用棉隆熏蒸扰动原有土壤微生物群落，结合施用“馕播王”复合微生物肥提高土壤中有益菌数量，降低土壤中尖孢镰刀菌数量(≤5.4×103cfu/g土，尖孢镰刀菌数量在104cfu/g土以下，就能有效防控作物枯萎病)，构建抑病型土壤微生物区系。试验结果表明：用该方法处理连作7茬以上(含7茬)作物(黄瓜、西瓜、甜瓜、苦瓜、香蕉)枯萎病高发几乎绝产的土壤后，与对照比较，其发病率减少87.5‑91.0％，作物果实产量增加，是对照产量的9.87‑29.54倍，该方法能有效抑制作物枯萎病，保证集约化作物生产的可持续发展。

公开(公告)号：CN104170555B

公开(公告)日：2016-01-20

申请号：CN201410327691.6

申请日：2014-07-08

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 沈其荣 ,  黄启为 ,  李荣 ,  张树生

IPC: A01B79/02

Abstract: 本发明涉及一种防控黄瓜枯萎病的无毒无残留土壤处理与生物有机肥联用的方法，属于农业集约化生产技术。本发明利用液氨熏蒸扰动原有土壤微生物群落，结合施用专用生物有机肥提高土壤中有益菌数量，降低土壤中尖孢镰刀菌数量(≤8.4×103cfu/g土，尖孢镰刀菌数量在104cfu/g土以下，就能有效防控黄瓜枯萎病)，构建抑病型土壤微生物区系。试验结果表明：用该方法处理连作9年黄瓜枯萎病高发几乎绝产的土壤后，与对照比较，其发病率减少88.5％，黄瓜果实产量增加350％，该方法能有效抑制黄瓜枯萎病，保证集约化黄瓜生产的可持续发展。

公开(公告)号：CN102617203B

公开(公告)日：2014-05-07

申请号：CN201210110083.0

申请日：2012-04-16

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 沈其荣 ,  孙冬丽 ,  黄启为 ,  李荣

IPC: C05F17/00

CPC classification number: Y02W30/43

Abstract: 本发明涉及利用家禽羽毛生产微生物有机肥料的方法及其产品，属于农业集约化生产技术。本发明利用了膨化羽毛作为氨基酸源载体，混合腐熟的猪粪堆肥和菜粕的微生物分解混合物进行固体发酵制成微生物有机肥料，肥料中含有1×108个/g以上的功能菌、全氮含量为2～4％(90％以上为有机氮)，总氮磷钾养分为3～5％、有机质含量为25～35％。试验结果表明，将废弃羽毛经膨化后和猪粪堆肥混合起来进行二次发酵制作生物有机肥，其总体效果较好。