马铃薯金线虫SCAR标记和LAMP快速检测方法及应用

    公开(公告)号:CN104059909B

    公开(公告)日:2016-05-04

    申请号:CN201410331743.7

    申请日:2014-07-11

    Abstract: 本发明涉及马铃薯金线虫SCAR标记和LAMP快速检测方法及应用。根据扩增得到马铃薯金线虫的SCAR特异性片段,其核苷酸序列如SEQ ID NO1所示。以此为基础设计了一对特异性引物GrFI和GrRI,获得稳定的SCAR标记,可特异快速检测出马铃薯金线虫。同时根据SCAR片段序列设计了4条LAMP引物GrF3、GrB3、GrFIP和GrBIP;并建立LAMP反应体系,通过提取DNA,等温扩增、扩增产物显色检测,从而快速检测出马铃薯金线虫。本发明的检测方法利用SCAR-PCR和LAMP恒温两种方式均能特异性强、灵敏度高、成本低廉、操作简便,在马铃薯金线虫快速检疫检测方面具有很高的应用价值。

    马铃薯腐烂茎线虫快速PCR分子检测方法及其应用

    公开(公告)号:CN103740857A

    公开(公告)日:2014-04-23

    申请号:CN201410050457.3

    申请日:2014-02-13

    CPC classification number: C12Q1/686 C12Q2531/113

    Abstract: 本发明为“马铃薯腐烂茎线虫快速PCR分子检测方法及其应用”,属植物线虫分子检测技术领域。马铃薯腐烂茎线虫快速PCR分子检测方法,包括PCR反应体系,其特征在于所述PCR反应体系中有一组特异性引物,所述特异性引物为DdF1和DdR1,上述引物能够从A型和B型的马铃薯腐烂茎线虫中特异的扩增出长度为495bp的片段,从而实现对马铃薯腐烂茎线虫的快速分子检测。本发明具有灵敏度高,特异性强且快速准确,在作物腐烂茎线虫病的早期诊断和田间监测预警等方面,具有很高的实际应用价值。

    小麦禾谷孢囊线虫特异性SCAR标记及其快速PCR检测方法

    公开(公告)号:CN102559669B

    公开(公告)日:2013-03-27

    申请号:CN201210032018.0

    申请日:2012-02-13

    Abstract: 本发明为“小麦禾谷孢囊线虫特异性SCAR标记及其快速PCR检测方法”,属生物技术领域。小麦禾谷孢囊线虫特异性SCAR标记的DNA片段,其特征在于该DNA片段具有如SEQ ID NO 1所示的核苷酸序列。根据小麦禾谷孢囊线虫特异性SCAR标记的DNA片段设计的特异性引物HaF1和HaR1,在PCR快速检测小麦禾谷孢囊线虫的方法中,可扩增出1010bp的特异性片段。本发明提高了分子检测灵敏度并且快速准确,在小麦禾谷孢囊线虫检测和小麦孢囊线虫病的早期诊断方面,具有很高的应用价值。

    菲利普孢囊线虫特异性SCAR标记及其快速PCR检测方法

    公开(公告)号:CN102329793A

    公开(公告)日:2012-01-25

    申请号:CN201110338657.5

    申请日:2011-10-31

    Abstract: 本发明为“菲利普孢囊线虫特异性SCAR标记及其快速PCR检测方法”,属生物技术领域。菲利普孢囊线虫特异性SCAR标记的DNA片段,其特征在于该DNA片段具有如SEQ ID NO1所示的核苷酸序列。根据菲利普孢囊线虫特异性SCAR标记的DNA片段设计的引物HfF1和HfR1,在PCR快速检测菲利普孢囊线虫的方法中,可扩增出313bp的片段,同时还可以在PCR反应体系中加入通用引物TW81和AB28作为内标,能同时扩增出1000bp的片段。本发明提高了分子检测灵敏度并且快速准确,在菲利普孢囊线虫检测和菲利普孢囊线虫病的早期诊断方面,具有很高的应用价值。

    一种香蕉穿孔线虫特异性LAMP检测方法及其应用

    公开(公告)号:CN102154476A

    公开(公告)日:2011-08-17

    申请号:CN201110032956.6

    申请日:2011-01-31

    Inventor: 彭德良 彭焕 王琼

    Abstract: 本发明为“一种香蕉穿孔线虫特异性LAMP检测方法及其应用”,属生物技术领域。一种香蕉穿孔线虫特异性的循环恒温扩增(LAMP)检测方法,其反应体系中香蕉穿孔线虫特异性LAMP检测引物RSF3、RSB3、RSFIP、RSBIP和RSLF,通过对罹病植物组织中香蕉穿孔线虫或单头香蕉穿孔线虫DNA提取,LAMP等温扩增,从而快速和特异性检测香蕉穿孔线虫。本发明的检测方法特异性强、灵敏度高、成本低廉、操作简便,在香蕉穿孔线虫现场快速检测和香蕉穿孔线虫病的早期诊断方面具有很高的应用价值。

    一种植物组织内植物寄生线虫的快速富集分离方法

    公开(公告)号:CN116803257B

    公开(公告)日:2024-03-12

    申请号:CN202310998375.0

    申请日:2023-08-09

    Abstract: 本发明公开了一种植物组织内植物寄生线虫的快速富集分离方法,属于生物技术领域,该方法用纤维素酶和果胶酶裂解植物组织,裂解后的植物组织研磨,并进行梯度冲洗过滤,获得不同龄期的植物寄生线虫。本发明经反复筛选和实验验证发现,采用特定的纤维素酶和果胶酶能够高效、充分裂解植物的细胞壁,利用橡皮塞轻轻磨破植物组织,从而使得寄生在植物根系内的线虫释放出来;将裂解的植物组织通过不同孔径大小的筛网,获得不同龄期的植物线虫,再通过蔗糖溶液离心,即可分离富集出不同龄期植物线虫;本发明操作简单,安全且成本低,可以迅速地从植物组织内获得大量的植物线虫,为获取不同龄期植物线虫及其研究提供了一种有效方法。

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