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公开(公告)号:CN120053629A
公开(公告)日:2025-05-30
申请号:CN202510187942.3
申请日:2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: A61K39/135 , C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N7/00 , C12N15/12 , A61K39/125 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供了KRT31基因敲除的细胞系与其在促进小RNA病毒科病毒复制和/或生产小RNA病毒科病毒疫苗中的应用,属于基因工程技术领域。本发明提供了一种KRT31基因或其编码蛋白作为靶点在制备调控小RNA病毒科病毒复制产品和/或疫苗生产中的应用。上调所述KRT31基因表达水平能够抑制小RNA病毒科病毒复制,降低所述KRT31基因表达水平能够促进小RNA病毒科病毒复制。本发明采用sgRNA敲除KRT31基因制备基因编码蛋白功能丧失的细胞系促进小RNA病毒科病毒的复制,提高病毒滴度和抗原产量,有助于高效制备小RNA病毒科病毒疫苗。
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公开(公告)号:CN116589538B
公开(公告)日:2023-12-05
申请号:CN202310373357.3
申请日:2023-04-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合,所述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合能够产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合的七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗,所述七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题,证明了非洲猪瘟亚单位疫苗研究方案的可行性。
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公开(公告)号:CN115948466B
公开(公告)日:2023-11-14
申请号:CN202310019982.8
申请日:2023-01-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/85 , C12N7/00 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12R1/93 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及Tollip敲除细胞系的构建及作为小RNA病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。本发明首先发现,抑制宿主细胞中Tollip基因表达能促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制;其次,本发明提供了一种特异性靶向Tollip的sgRNA,所述sgRNA能够特异性靶向Tollip基因,结合CRISPR‑Cas9技术实现了Tollip基因的敲除,获得的单克隆细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制,提高FMDV疫苗的生产量和抗原表达量,可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗尤其是FMDV疫苗的生产细胞系,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN116948003A
公开(公告)日:2023-10-27
申请号:CN202310933866.7
申请日:2023-07-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/47 , C12N15/113 , A61K45/00 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12N5/10 , C12N7/00 , C12N15/85 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及EIF2B4敲除细胞系的构建及作为小RNA病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。首先,本发明发现过表达宿主EIF2B4基因,能够抑制FMDV的复制,可作为靶点用于设计和筛选抑制FMDV复制的药物;其次,抑制或沉默宿主EIF2B4基因获得的宿主细胞能够促进FMDV病毒的复制,可作为FMDV病毒或病毒疫苗的生产细胞系;基于此,本发明设计了一种特异性靶向EIF2B4基因基因的sgRNA,结合CRISPR/Cas9技术实现了EIF2B4基因的敲除,获得的单克隆细胞系能够显著促进FMDV在细胞内的复制,为研究EIF2B4基因的分子机制提供了工具和材料,具有广阔的前景。
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公开(公告)号:CN113896771B
公开(公告)日:2023-10-27
申请号:CN202111307559.5
申请日:2020-08-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一类促进猪机体产生非洲猪瘟病毒抗原特异性免疫应答的多肽及其应用,属于生物医药技术领域;所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种;所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序列分别如SEQ IDNO.1~SEQ ID NO.5所示。本发明的多肽能够显著促进ASFV致敏免疫细胞增殖,并且能够通过促进猪单核巨噬细胞及B、T淋巴细胞分泌IFN‑γ促进猪机体产生ASFV抗原特异性免疫应答。免疫动物后,能显著促进猪机体免疫应答。本发明所述多肽或者由多肽聚合得到的多肽聚合物能够用于制备非洲猪瘟病毒的亚单位疫苗。
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公开(公告)号:CN116672443A8
公开(公告)日:2023-09-29
申请号:CN202310647769.1
申请日:2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 郝荣增 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: A61K39/12 , A61K39/385 , A61K9/14 , A61K47/34 , A61K47/32 , A61K47/36 , A61K47/10 , A61K47/42 , A61K47/02 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟组合疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合,其中至少一种抗原与纳米颗粒载体形成含有所述抗原或其抗原表位的纳米颗粒;所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合能够刺激机体产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合的疫苗,所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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公开(公告)号:CN116785419A
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202310607714.8
申请日:2023-05-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物技术领域。首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34、P30、P54、A104R、E165R、C129R、P72、X、Y、P8、P15、K205R、K78R、MGF 110‑5L‑6L、L60L、MGF 110‑4L、MGF 110‑7L、I215L、P14、P35、E248R、A238L、EP153R蛋白组成的抗原蛋白组合,所述抗原蛋白组合能够诱导机体产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述抗原蛋白组合的二十三组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗,所述亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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公开(公告)号:CN114807062B
公开(公告)日:2023-09-05
申请号:CN202210240926.2
申请日:2022-03-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种非洲猪瘟病毒I73R基因条件性缺失毒株的构建及其作为疫苗的应用。本发明在基因Ⅱ型非洲猪瘟(African swine fever,ASF)亲本毒株ASFV CN/GS/2018中条件性敲除I73R基因构建了ASFV I73R基因条件性缺失毒株(vI73Ri);所述vI73Ri是一株安全性高的减毒ASF候选疫苗株,对猪完全致弱、免疫猪无典型ASF临床症状、免疫后在猪血液内检测到非常低的病毒,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控ASF疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN113845568B
公开(公告)日:2023-08-18
申请号:CN202111363404.3
申请日:2020-08-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一类促进猪机体产生广谱获得性免疫应答的多肽及其应用,属于生物医药技术领域;所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种;所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.5所示。本发明的多肽能够高水平促进健康猪机体的单核巨噬细胞增殖,显著促进健康猪机体的CD8+T细胞及B细胞分泌IFN‑γ从而增强猪机体产生广谱获得性免疫应答,能够作为猪病疫苗的有效组分或者疫苗免疫增强剂。
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公开(公告)号:CN116355905A
公开(公告)日:2023-06-30
申请号:CN202310323610.4
申请日:2023-03-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 兰州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , C07K14/47 , C12N7/00 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12R1/93 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及一种促进小RNA病毒科病毒复制的BHK‑21细胞系、构建方法及应用。本发明提供了一种特异性靶向KLHL34的sgRNA,所述sgRNA能够特异性靶向KLHL34基因,结合CRISPR‑Cas9技术在BHK‑21细胞系中实现了KLHL34基因的敲除,获得的单克隆细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制,提高FMDV疫苗的生产量和抗原产量,可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗尤其是FMDV疫苗的生产细胞系,具有广阔的应用前景。
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