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公开(公告)号：CN111471104B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202010355075.7
申请日：2020-04-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明采用PRRSV病毒液‑SD16作为免疫原，免疫Balb/c小鼠。经细胞融合，病毒感染Marc145细胞筛选克隆，获得高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系，获得鼠单克隆抗体MAB‑GP3。用ELISA技术测定该单克隆抗体MAB‑GP3的亚型为IgG2b型单克隆抗体。PRRSV‑I型和PRRSV‑II型病毒感染Marc145细胞，利用IFA技术用该单克隆抗体进行检测，证明单克隆抗体MAB‑GP3对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒具有广谱反应性。随后用其进行病毒中和实验，利用Western blot技术和qPCR技术证明该单克隆抗体对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒都具有中和活性，可阻止病毒入侵，保护机体免受感染。
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公开(公告)号：CN110776564B
公开(公告)日：2022-02-08
申请号：CN201911047347.0
申请日：2019-10-30
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种抗新城疫病毒的纳米抗体NDV‑Nb4和NDV‑Nb49，氨基酸序列分别如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示。还公开了由纳米抗体NDV‑Nb4与铁蛋白融合构建融合蛋白的方法，通过原核表达系统可溶性表达纳米抗体与铁蛋白的融合蛋白；以及由纳米抗体NDV‑Nb49与辣根过氧化物酶融合构建融合蛋白的方法，通过真核表达系统表达NDV‑Nb49与辣根过氧化物酶融合蛋白。还公开了一种检测新城疫病毒的方法，是以NDV‑Fe‑Nb4融合蛋白为捕获NDV的蛋白、NDV‑Nb49‑HRP融合蛋白为检测NDV的蛋白，配合用于检测NDV，该方法简便易操作，且特异性好，准确率高。
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公开(公告)号：CN112285347A
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN202011062115.5
申请日：2020-09-30
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N33/569 , G01N27/62 , C07K14/08
Abstract: 本发明涉及一种通过使用特异性抗体捕获猪源抗原加工提呈细胞APCs上负责加工提呈抗原的猪白细胞抗原II类DR分子（SLA‑DR），将SLA‑DR上提呈的抗原肽以三氟乙酸洗脱后，脱盐处理重悬后进行质谱分析以测定抗原肽氨基酸序列，鉴定出猪特定病原所有编码的蛋白中可被机体抗原提呈细胞所加工提呈的抗原肽序列，并通过基因工程的方法将以上方法获得的CD4+T表位抗原肽分别与NanoLuc荧光素酶融合后使用大肠杆菌进行体外重组表达并纯化，作为一种人工抗原与相应病原感染的猪血清样本进行ELISA检测，以寻找可被病原感染的猪血清样本识别的CD4+T表位抗原肽序列，进一步将所有抗体ELISA检测为阳性的抗原肽序列串联后在大肠杆菌中进行重组表达，作为人工抗原用于给定病原的特异性抗体检测。
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公开(公告)号：CN111471104A
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN202010355075.7
申请日：2020-04-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明采用PRRSV病毒液-SD16作为免疫原，免疫Balb/c小鼠。经细胞融合，病毒感染Marc145细胞筛选克隆，获得高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系，获得鼠单克隆抗体MAB-GP3。用ELISA技术测定该单克隆抗体MAB-GP3的亚型为IgG2b型单克隆抗体。PRRSV-I型和PRRSV-II型病毒感染Marc145细胞，利用IFA技术用该单克隆抗体进行检测，证明单克隆抗体MAB-GP3对PRRSV-I和PRRSV-II型病毒具有广谱反应性。随后用其进行病毒中和实验，利用Western blot技术和qPCR技术证明该单克隆抗体对PRRSV-I和PRRSV-II型病毒都具有中和活性，可阻止病毒入侵，保护机体免受感染。
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公开(公告)号：CN111450248A
公开(公告)日：2020-07-28
申请号：CN202010354506.8
申请日：2020-04-29
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明采用筛选得到的对于PRRSV具有广谱中和活性的单克隆抗体MAB-GP3为活性成分，制备得到对PRRSV感染具有预防和治疗效果的药物制剂，将其用于PRRSV感染的治疗，其可以有效的减轻肺部宏观病变，同时还能有效的提升感染动物的存活率。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111171146A
公开(公告)日：2020-05-19
申请号：CN202010104052.9
申请日：2020-02-20
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种抗H9N2亚型禽流感病毒的纳米抗体、制备方法和应用，该纳米抗体氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过原核表达技术表达了H9N2亚型禽流感病毒的核衣壳蛋白，然后将其作为免疫原免疫双峰驼，构建噬菌体库，再利用噬菌体展示技术筛选获得了1株抗H9N2核衣壳蛋白的纳米抗体，并将该纳米抗体与辣根过氧化物酶(HRP)进行融合表达，成功制备了纳米抗体与HRP的融合蛋白，将该融合蛋白应用到检测鸡血清中抗H9N2亚型禽流感病毒(AIV)抗体中，发现该融合蛋白构建的检测方法灵敏度高，并且具有操作简单、不需要使用二抗、检测样品耗时短等优点。
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公开(公告)号：CN111138535A
公开(公告)日：2020-05-12
申请号：CN202010069365.5
申请日：2020-01-21
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明采用对PRRSV-I和PRRSV-II型病毒都具有中和活性的单克隆抗体5D9制作免疫增强剂，所形成的免疫复合物与佐剂联合免疫小鼠时，IFN-γ分泌T细胞显著升高，提示在灭活病毒免疫过程中，PRRSV特异性抗体5D9与正常的水包油佐剂联合免疫可增强CTL反应。动物试验表明，本发明制备的免疫复合物的免疫保护率相比仅采用商业化佐剂ISA 206制备得到的疫苗以及商品化的弱毒疫苗能够达到更高的保护效力。
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公开(公告)号：CN106380516B
公开(公告)日：2019-10-25
申请号：CN201610892949.6
申请日：2016-10-13
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/14 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种特异性结合BVD病毒非结构蛋白NS5B的纳米抗体及其应用，属抗病毒研究技术领域。本发明通过构建NS5B特异的单域重链抗体文库，筛选抗NS5B特异性纳米抗体，构建稳定表达NS5B纳米抗体的MDBK细胞系并用BVDV感染，公开了特异性结合BVD病毒非结构蛋白NS5B纳米抗体和其氨基酸序列，以及编码该纳米抗体的基因序列，还公开了NS5B纳米抗体在制备抗BVD病毒药物中的应用。
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公开(公告)号：CN110257339A
公开(公告)日：2019-09-20
申请号：CN201910543875.9
申请日：2019-06-21
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C07K19/00 , C12N9/08 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了表达抗新城疫病毒NP蛋白纳米抗体－HRP融合蛋白的细胞系，所述细胞系在中国典型培养物保藏中心的保藏号为C201981；还提供一种该细胞系的构建方法，通过该构建方法可成功将携带纳米抗体-HRP融合基因的慢病毒载体转入表达该外源基因的细胞株中，并稳定表达纳米抗体-HRP融合蛋白；还公开了由此构建方法构建的细胞系，以及该细胞系表达的融合蛋白在血清检测中的应用，具体应用于鸡血清中新城疫抗体的检测，通过本发明的细胞系培养后上清液，按效价1:1000稀释后直接检测阳性鸡血清新城疫抗体与新城疫病毒NP蛋白的结合情况，判断是否感染过新城疫病毒，此检测方法简便易操作，降低生产成本，且提高检测效率。
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公开(公告)号：CN109593122A
公开(公告)日：2019-04-09
申请号：CN201910023151.1
申请日：2019-01-10
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K14/085 , C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/576 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开一种抗猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白单克隆抗体及其制备与应用，主要涉及生物技术领域，该单克隆抗体主要由杂交瘤细胞株1E4分泌，利用原核表达纯化的猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白C端267个氨基酸为包被抗原，针对该区域的亲和层析纯化的单克隆抗体mAb-1E4为阻断抗体，通过HRP标记的特异性单克隆抗体，使其能够通过HRP的底物TMB或DAB直接检测到该单克隆抗体，并应用于制备检测猪戊型肝炎病毒的药物中。
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