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公开(公告)号:CN112094328A
公开(公告)日:2020-12-18
申请号:CN202010994172.0
申请日:2020-09-21
Applicant: 华南农业大学 , 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
IPC: C07K14/205 , C07K1/14 , C07K1/34
Abstract: 本发明提供了一种空肠弯曲杆菌外膜囊泡的提取及纯化方法,包括以下方法:S1培养空肠弯曲杆菌,获得菌液;S2提取菌液外膜囊泡,获得粗提的外膜囊泡;S3采用Optiprep密度梯度离心法纯化粗提的外膜囊泡。本发明的将超速离心法和Optiprep密度梯度离心法相结合提取纯化空肠弯曲杆菌外膜囊泡,Optiprep梯度离心液浓度为35%的位置回收OMVs。本发明的方法还优化了空肠弯曲杆菌的培养基和培养条件,提高了空肠弯曲杆菌的生长率,这有利于获得更多的OMVs的,增加了OMVs的量。通过本发明的方法制备OMVs减少了杂质纯度更高。
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公开(公告)号:CN109609668A
公开(公告)日:2019-04-12
申请号:CN201910105795.5
申请日:2019-02-01
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了一种鼠伤寒沙门菌MLVA分型的检测引物组、试剂盒及应用。本发明针对鼠伤寒沙门菌4个具有较好分辨能力的VNTR位点设计特异性引物,建立多重PCR扩增检测方法,对各位点PCR扩增产物片段进行测序,采用本地Blast技术对测序结果进行分析,获得4个位点重复序列数目组合,对鼠伤寒沙门菌进行MLVA分型。本发明的方法可对鼠伤寒沙门菌进行稳定的分型检测,仅分析4个VNTR位点、一次多重PCR扩增检测、直观方便的本地Blast分析获得VNTR重复序列数目,其分辨率与原MLVA-5点分型方法相同,但分型效率高于原有MLVA-5位点法,更简单、方便。
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公开(公告)号:CN109295184A
公开(公告)日:2019-02-01
申请号:CN201810988580.8
申请日:2018-08-28
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
IPC: C12Q1/6869 , C12Q1/689 , C12Q1/04
Abstract: 本发明公开了一种阪崎克罗诺杆菌CRISPR分型方法。本方法通过对阪崎克罗诺杆菌的CRISPR1、CRISPR2、CRISPR3和CRISPR6位点序列进行DNA测序,提取四个位点序列中的间隔序列,根据四者的间隔序列组合确定阪崎克罗诺杆菌的CRISPR型别。本发明方法简单、快速、低成本、分辨率高于MLST分型方法,无环境污染,对实验室设备及软件要求低,且CRISPR分子保存有历史侵染的噬菌体及质粒等诸多信息,并可联合数据库实现全国甚至全球标准化分子溯源,可以推广至食品、检验检疫等领域。
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公开(公告)号:CN114540313B
公开(公告)日:2024-02-23
申请号:CN202011330466.X
申请日:2020-11-24
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明提供了一种克罗诺杆菌噬菌体,所述噬菌体为克罗诺杆菌噬菌体vB_CtuP_B1,其保藏编号为:GDMCC No:61185‑B1,所述噬菌体为短尾噬菌体,呈多面体的头部和短尾结构,头部约51nm,尾部约11nm。该噬菌体可特异性的裂解裂解丙二酸盐克罗诺杆菌和苏黎世克罗诺杆菌。噬菌体vB_CtuP_B1在pH 4.0‑11范围和温度25‑60℃条件下具有良好的稳定性,不携带任何毒力或抗生素耐药基因,可以安全地运用于食品克罗诺杆菌的防控。
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公开(公告)号:CN111979142B
公开(公告)日:2022-08-05
申请号:CN202010731841.5
申请日:2020-07-27
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了一种同时携带耐药基因cfr和lsa(E)的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及其检测方法。金黄色葡萄球菌Sta2868B2,保藏号:GDMCC No:61037。本发明提供了一种同时检测多重耐药基因cfr和lsa(E)的引物组及双重PCR检测方法。该方法具有良好的稳定性和特异性,通过对多组引物进行比较后选定的两对最佳引物;通过调整退火温度来进一步提高反应的特异性,本方法对cfr和lsa(E)的检测具有高度特异性,相互之间及与耐药基因无交叉反应,另外还具有较好的重复性;此外,利用本发明可以一次检测两种耐药基因,全部反应在2个小时内完成,省时省力。同时,利用本发明不需要昂贵的荧光PCR仪,也不需要合成昂贵的探针及相应的试剂,检测成本低,操作简便,利于医院和基层部门实验室应用推广。
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公开(公告)号:CN111057775B
公开(公告)日:2022-06-14
申请号:CN201911394381.5
申请日:2019-12-30
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) , 广东环凯生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一组用于检测沙门氏菌的分子靶标,所述分子靶标包括如SEQ ID NO.1~13所示的核苷酸序列。本发明还提供例了一组用于检测如权利要求1所述的用于检测沙门氏菌分子靶标的引物,其核苷酸序列如SEQ IDNO.14~39所示。采用本发明的引物针对特异性靶标进行PCR扩增,通过检测扩增产物是否含有目的条带判定样品中是否含有沙门氏菌,该方法降低了检测成本,更加具有实用性;本发明的特异性分子靶标即13个保守核酸具有单一的特异性,检测结果特异,结果判定简单。
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公开(公告)号:CN112029885B
公开(公告)日:2022-06-07
申请号:CN202011054958.0
申请日:2020-09-29
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了用于鉴定瑞士乳杆菌、发酵乳杆菌和嗜酸乳杆菌的分子标记、检测引物和检测方法。所述的分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1、2、3、4、5或6所示。本发明能有效鉴定瑞士乳杆菌、发酵乳杆菌和嗜酸乳杆菌,具有快速、准确、经济和操作简单等优点,便于食品企业和检验机构使用。
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公开(公告)号:CN113388539B
公开(公告)日:2022-05-20
申请号:CN202011617902.1
申请日:2020-12-30
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) , 广东环凯生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了用于检测5株沙门氏菌的特异性分子靶标,所述分子靶标为:(a)如SEQ ID NO:1~5所示的任意一种或几种核苷酸序列;或者,(b)在(a)中的核苷酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个核苷酸且与(a)中核苷酸具有90%以上同源性的核苷酸序列。同时还提供了5株含有所述特异性分子靶标的沙门氏菌标准菌株,其保藏号分别为:GDMCC 60847、GDMCC 60848、GDMCC 60849、GDMCC 60850、GDMCC 60851。本发明的沙门氏菌标准菌株具有典型的沙门氏菌生理生化特性,且能较好地反映该菌在中国地区的遗传背景。
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公开(公告)号:CN112725474B
公开(公告)日:2022-05-20
申请号:CN202011615517.3
申请日:2020-12-30
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) , 广东环凯生物科技有限公司
Inventor: 陈谋通 , 吴清平 , 丁郁 , 张菊梅 , 薛亮 , 王涓 , 吴诗 , 叶青华 , 曾海燕 , 杨小鹃 , 张淑红 , 徐环 , 代京莎 , 庞锐 , 张友雄 , 程健恒 , 陈鲁
Abstract: 本发明提供了用于检测单核细胞增生李斯特菌的特异性分子靶标,以及含有该分子靶标的菌株及其定量保藏方法,所述特异性分子靶包括如SEQ ID NO:1~4所示的核苷酸序列,所述4株含有所述分子靶标特异性的单核细胞增生李斯特菌,其保藏号的分别为GDMCC 60836、GDMCC 60838、GDMCC 60839和GDMCC 60840,所述菌株具有标准的单核细胞增生李斯特菌菌体显微形态和生理生化特征,可用于检验单核细胞增生李斯特菌菌显色平板的准确性,以及相关试剂验证的标准菌株。本发明还提供了一种冻干保护剂,具有易于成型,水溶性好,1‑2秒内能够完全溶解,在‑20℃条件下可以保存至少一年以上,可用于长期储存质控菌株。
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公开(公告)号:CN112592993B
公开(公告)日:2022-05-20
申请号:CN202011619828.7
申请日:2020-12-30
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) , 广东环凯生物科技有限公司
Inventor: 吴诗 , 吴清平 , 代京莎 , 丁郁 , 陈谋通 , 张菊梅 , 薛亮 , 王涓 , 叶青华 , 曾海燕 , 古其会 , 杨小鹃 , 张淑红 , 韦献虎 , 张友雄 , 庞锐 , 卢勉飞 , 张峰 , 黄嘉慧 , 陈鲁
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域,具有涉及4株我国自主知识产权的、符合国内传播规律的金黄色葡萄球菌标准菌株,可用作食品、药品、临床检验等不同领域的标准参考菌株。其保藏编号分别为GDMCC 60841、GDMCC 60843、GDMCC 60844和GDMCC 60845。本发明的4株金黄色葡萄球菌菌株,具有标准的葡萄球菌菌体显微形态和生理生化特征,遗传背景清晰,且耐药性、毒力基因和分子检测靶标等信息清晰。本发明还涉及一组用于检测、鉴别上述4株金黄色葡萄球菌标准菌株的特异性靶标基因以及对应的PCR引物。最后,本发明还提供了一种存活率高、特异性的金黄色葡萄球菌冻干保护剂,可用于本发明标准菌株的长期储存。
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