镁离子调控下的表达噬菌体裂解基因破壁方法

    公开(公告)号:CN100510058C

    公开(公告)日:2009-07-08

    申请号:CN200710021820.9

    申请日:2007-04-30

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及基因工程领域,具体是涉及一种镁离子调控下的表达噬菌体裂解基因破壁方法。所说的镁离子调控下的表达噬菌体裂解基因的破壁方法,其特征是,将噬菌体裂解基因克隆进受镁离子调控的表达载体pYS,再转化进宿主菌,然后通过控制Mg2+的浓度使裂解基因在宿主菌内表达。本发明将噬菌体裂解基因克隆进受镁离子调控的表达载体pYS,通过控制Mg2+的浓度可使裂解基因在大肠杆菌内表达,获得了在温和条件下宿主菌的有效自我裂解。

    双基因缺失的产单核细胞李斯特菌减毒突变株及其构建方法

    公开(公告)号:CN101139567A

    公开(公告)日:2008-03-12

    申请号:CN200710025604.1

    申请日:2007-08-08

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种将野生型产单核细胞李斯特菌毒力基因缺失的构建方法。本发明将扩增出待删除基因两翼的同源片段actA、plcB后,利用SOEing PCR方法将其拼接,插入穿梭载体pKSV7中,经电转化导入产单核细胞李斯特菌,得到actA、pclB双基因缺失的产单核细胞李斯特菌减毒突变株(Listeriamonocytogenes yzu LM1-2),保藏号CCTCC NO:M206107。解决了产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes,简称LM)人兽共患病的病原,死亡率高及对食品的污染与危害等。本发明删除了actA和plcB基因,从而实现对野生型菌株yzuLM4的减毒。

    一种鸡特异性的CpG ODN及其应用

    公开(公告)号:CN100336823C

    公开(公告)日:2007-09-12

    申请号:CN200610038448.8

    申请日:2006-02-23

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种CpG DNA,特别是涉及用作鸡特异性的CpG ODN,以及这种CpG ODN在制备作为H5亚型禽流感DNA疫苗佐剂中的用途。该CpG ODN序列具体为5’-TTGGAACGTTCCTTTCCAACGTTGGTTTGGAACGTTCCTT-3’,嵌合了本发明CpG ODN为佐剂的H5亚型禽流感DNA疫苗,通过口服、滴鼻途径对鸡直接进行免疫,可显著增强H5亚型禽流感DNA疫苗免疫后的攻毒保护率,提高免疫家禽的肠粘膜IgA抗体水平;且本发明中构建的DNA疫苗具有安全、免疫后不干扰禽流感疫情的监测、可克服母源抗体的干扰及使用方便等优点。

    禽流感病毒多重PCR检测方法

    公开(公告)号:CN1243108C

    公开(公告)日:2006-02-22

    申请号:CN200410014289.9

    申请日:2004-03-09

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种鉴定病毒,特别是鉴定禽流感H5、H9亚型病毒的检测方法。用Trizol kit提取样本基因RNA,再进行反转录合成cDNA,然后进行一次性PCR扩增特定的多个基因,最后电泳鉴定。由于单个疑似病例样本中的特征基因数量极少,本发明通过将样本的RNA反转录合成cDNA,再一次性同时对可能存在的NP、H5A、H9A基因扩增,形成大量的基因复制片段,比较方便,一次就能鉴定是否为禽流感,以及属于H5或H9亚型作出判断。本发明较经典方法的病毒分离、鉴定和血清学分型试验方法快速、准确。

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