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公开(公告)号：CN109082423A
公开(公告)日：2018-12-25
申请号：CN201810910732.2
申请日：2018-08-10
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种流感病毒HA融合肽+helix A蛋白表达载体的制备方法及其应用与引物。本发明的原理和最核心的关键技术是科学地设计扩增出pGEX-6p-1线性化载体以及流感病毒HA融合肽-helix A基因片段的引物，利用商品化的重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应，直接在体外快速重组克隆HA融合肽-helix A，转化大肠杆菌，经IPTG诱导表达、实现流感病毒HA融合肽-helix A蛋白与GST的融合表达，并获得纯化的HA融合肽-helix A融合蛋白。
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公开(公告)号：CN108752434A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810724849.1
申请日：2018-07-04
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/075 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供了一种抗原多肽，属于生物技术检测技术领域。本发明提供的抗原多肽能够检测血清中的非结构蛋白22K抗体，进而能够检测FAdV‑4病毒感染，而且能够区别自然感染以及灭活疫苗免疫鸡群。
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公开(公告)号：CN108727478A
公开(公告)日：2018-11-02
申请号：CN201810568218.5
申请日：2018-06-05
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/165 , C07K7/08 , C07K16/10 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性支气管炎病毒(IBV)特异性多肽抗原，所述IBV特异性多肽抗原具有氨基酸序列如SEQ ID NO：1~9中的任意一条或几条所示，或者具有经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的氨基酸序列。本发明还公开了一种IBV特异性多肽抗原组合物。本发明还公开了一种IBV抗体及其制备方法。本发明还公开了一种ELISA检测试剂盒及其检测方法和应用。该抗原表位具有很好的抗体反应性，可以用来特异性检测抗IBV的抗体，具有应用价值。
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公开(公告)号：CN108414750A
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201810063994.X
申请日：2018-01-23
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/531 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供了一种血清4型禽腺病毒双单抗夹心ELISA抗原检测试剂盒，其中包括：包被抗FAdV-4纤突蛋白蛋白单克隆抗体（捕获抗原的抗体）的酶标板、酶标记抗FAdV-4纤突蛋白单克隆抗体（检测抗体）。捕获抗体和检测抗体分别针对FAdV-4纤突蛋白2种不同的抗原决定簇：包被在酶标板的抗FAdV-4纤突蛋白单克隆抗体和酶标记抗FAdV-4纤突蛋白单克隆抗体。本发明试剂盒操作简便、快速，能特异性检测出4型禽腺病毒，而与流感病毒（AIV）、马立克病毒（MDV）、血清8型禽腺病毒（FAdV-8）、禽网状内皮组织增生症病毒（REV）、禽白血病病毒（ALV）、传染性法氏囊病毒（IBDV）以及SPF鸡肝组织研磨液等均不反应。该方法所需成本低廉，经济效益显著、应用前景广泛。
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公开(公告)号：CN106442982B
公开(公告)日：2018-06-08
申请号：CN201610796060.8
申请日：2016-08-31
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明提供一种禽白血病病毒J亚群(ALV‑J)特异抗原多肽及其应用。该抗原多肽氨基酸序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5或者其衍生序列，由病毒的囊膜蛋白基因(env)的gp85部分基因编码；其特异性强、亲水性较好，反应性好、纯度高。此外，将该抗原多肽用于制备特异性检测ALV‑J抗体的间接ELISA检测试剂盒，所述检测试剂盒包括包被由一个或者几个如上所述的ALV‑J特异抗原多肽的酶标板以及相关试剂，该试剂盒检测ALV‑J抗体，特异性高，成本低，有利于推广使用，其效果明显优于常规试剂盒和进口试剂盒。上述ALV‑J特异抗原多肽，和由其制备的间接ELISA检测试剂盒适用于评价ALV‑J感染或者净化结果；上述ALV‑J特异抗原多肽适用于制备特异性抗ALV‑J的抗体。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105527446B
公开(公告)日：2017-12-08
申请号：CN201610014747.1
申请日：2016-01-11
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 一种多肽抗原检测牛结核分枝杆菌抗体的ELISA试剂盒，属于生物技术检测领域，本利用牛结核分支杆菌特异性多肽，体外人工合成作为抗原快速检测牛结核分枝杆菌的抗体。采用人工合成5种多肽抗原作为包被液，有效提高多肽与目标抗体的结合效率，从而显著提高可检测灵敏度，同时显著降低非特异背景读值，特异性高。本发明的牛结核分枝杆菌抗体ELISA检测试剂盒具有操作简单、诊断速度快、在进行大规模检测中经济方便等优点，是一种便于普及的好方法，具有广泛的应用前景。采用本发明的ELISA检测试剂盒检测牛结核分枝杆菌抗体，成本低，有利于推广使用。
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公开(公告)号：CN106995486A
公开(公告)日：2017-08-01
申请号：CN201710248360.7
申请日：2017-04-17
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种GyV8新型环形病毒VP3可溶性蛋白的制备方法。该方法是用pGEX‑6p‑1线性化载体以及GyV8病毒VP3基因片段的引物，利用重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应，直接在体外快速重组克隆VP3，转化大肠杆菌，经IPTG诱导表达、实现GyV8的VP3蛋白与GST的融合可溶性表达，并获得纯化的VP3可溶性蛋白。本发明不依赖于酶切位点及限制性内切酶的重组酶ExnaseTM II体外重组技术克隆GyV8病毒VP3基因，简化克隆过程，实现VP3基因快速克隆表达。
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公开(公告)号：CN106692964A
公开(公告)日：2017-05-24
申请号：CN201611102065.2
申请日：2016-12-05
Applicant: 扬州大学 , 国药集团扬州威克生物工程有限公司 , 福建圣维生物科技有限公司
IPC: A61K39/235 , A61P31/14 , C12N7/00
CPC classification number: A61K39/12 , A61K2039/5252 , A61K2039/552 , C12N7/00 , C12N2710/10034
Abstract: 本发明属于疫苗制备技术领域，具体涉及血清4型禽腺病毒灭活苗及其制备方法。所述血清4型禽腺病毒灭活苗，其抗原为通过悬浮培养方法获得的效价不低于109TCID50/ml的灭活后的血清4型禽腺病毒。本发明的利用鸡肝细胞，通过激流式生物反应器悬浮培养技术高效扩增血清4型禽腺病毒，并研制出高效价血清4型禽腺病毒灭活苗。该疫苗效价可达109TCID50/ml，是传统鸡胚疫苗效价的100倍。高效价血清4型禽腺病毒灭活苗的制备可大大降低疫苗的成本，提供疫苗免疫效果，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN105037504B
公开(公告)日：2016-11-30
申请号：CN201510359309.4
申请日：2015-06-25
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明提供了一种AGV2型环形病毒VP2可溶性蛋白及其制备方法。是利用pGEX‑6p‑1线性化载体以及AGV2病毒VP2基因片段的引物，利用重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应，直接在体外快速重组克隆VP2，转化大肠杆菌，经IPTG诱导表达、实现AGV2的VP2蛋白与GST的融合可溶性表达，并获得纯化的VP2可溶性蛋白。本发明获得的AGV2病毒VP2可溶性表达及纯化的蛋白，可直接提供VP2可容性蛋白作为AGV2诊断抗原；作为免疫原获得抗VP2多克隆抗体；为开展AGV2血清学流行病学调查及VP2功能研究提供有效免疫学试剂，填补国内外空白；并为进一步探究VP2生物学功能具有重要意义。
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公开(公告)号：CN105274089A
公开(公告)日：2016-01-27
申请号：CN201510802359.5
申请日：2015-11-19
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种表达绿色荧光囊膜融合蛋白的REV病毒传染性克隆的构建方法，是将特定PCR引物扩增出的绿色荧光EGFP基因片段，插入到线性化的REV病毒基因组Env基因的N端，利用商品化的重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应，直接在体外快速重组克隆，随后转化到大肠杆菌进行质粒扩增与鉴定；并将阳性克隆转染DF1细胞，拯救获得表达绿色荧光囊膜融合蛋白的REV病毒。
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