基因Ⅶ型新城疫病毒致弱株A-NDV-Ⅶ及其构建方法

    公开(公告)号:CN101182494B

    公开(公告)日:2010-09-08

    申请号:CN200710131863.2

    申请日:2007-09-05

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 基因VII型新城疫病毒致弱株A-NDV-VII及其构建方法,涉及应用反向遗传技术,本发明利用已建立的鹅源新城疫病毒ZJ1株的反向遗传操作平台,将具有高繁殖性能的新城疫病毒分离株JS-5-05-Go的两个囊膜糖蛋白F和HN基因片段对ZJ1株基因组的对应部分进行替换,得到重组病毒NDV-VII,对重组病毒的F基因进行致弱突变后拯救出高度致弱的基因VII型新城疫病毒株A-NDV-VII。同时该病毒在鸡胚上具有较高的繁殖滴度,适合于疫苗的大规模生产,可用于制造疫苗。

    一种检测重组鸡痘病毒活疫苗空斑的染色计数方法

    公开(公告)号:CN101566579A

    公开(公告)日:2009-10-28

    申请号:CN200910027291.2

    申请日:2009-05-27

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种检测重组鸡痘病毒活疫苗空斑的染色计数方法。该方法是将带LacZ标记基因的重组鸡痘病毒活疫苗稀释后接种次代CEF,72h终止培养,加戊二醛固定液固定后,用X-gal染色液染色,37℃培养箱过夜或8-12小时,取出培养板放倒置显微镜下计数蓝染的空斑,计算疫苗病毒含量。本发明方法与现有技术相比,具有操作简单、耗时短、计数准确的优点。

    镁离子调控下的表达噬菌体裂解基因破壁方法

    公开(公告)号:CN100510058C

    公开(公告)日:2009-07-08

    申请号:CN200710021820.9

    申请日:2007-04-30

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及基因工程领域,具体是涉及一种镁离子调控下的表达噬菌体裂解基因破壁方法。所说的镁离子调控下的表达噬菌体裂解基因的破壁方法,其特征是,将噬菌体裂解基因克隆进受镁离子调控的表达载体pYS,再转化进宿主菌,然后通过控制Mg2+的浓度使裂解基因在宿主菌内表达。本发明将噬菌体裂解基因克隆进受镁离子调控的表达载体pYS,通过控制Mg2+的浓度可使裂解基因在大肠杆菌内表达,获得了在温和条件下宿主菌的有效自我裂解。

    初生仔猪腹泻的大肠杆菌基因工程疫苗987P-ST-F41及其构建方法

    公开(公告)号:CN101121936A

    公开(公告)日:2008-02-13

    申请号:CN200710023980.7

    申请日:2007-07-02

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 初生仔猪腹泻的大肠杆菌基因工程疫苗987P-ST-F41及其构建方法,属于畜牧兽医技术领域。将扩增出的987P的主要亚单位基因fasA片段、ST的主要亚单位基因sta片段、F41的主要亚单位基因f41片段按fasA-sta-f41方式定向串联于原核表达载体pGEX-6P-1,经转化宿主菌BL21后,进行IPTG诱导表达,并经SDS-PAGE和Western-blot证明目的基因确已表达,该疫苗可有效预防初生仔猪腹泻,安全性和免疫原性可靠。

    表达新城疫病毒F基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗rFPV-12LSF及其构建方法

    公开(公告)号:CN1769465A

    公开(公告)日:2006-05-10

    申请号:CN200510041180.9

    申请日:2005-07-22

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 表达新城疫病毒F基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗rFPV-12LSF及其构建方法涉及一种能抵抗母源抗体干扰的表达新城疫病毒F基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗,用于预防鸡新城疫。利用FPV表达载体p12-18,将新城疫病毒F基因通过同源重组插入到282E4株新鉴定的鸡痘病毒复制非必需区FPV1-2,从而获得了表达新城疫病毒F基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗rFPV-12LSF。本发明与原来构建的以复制非必需区FPV7S为插入位点构建的表达新城疫病毒F基因的重组FPV相比,该疫苗在高母源抗体商品鸡上具有较强的抵抗新城疫母源抗体干扰的能力。

    鸡痘病毒表达载体p12-18及其构建方法

    公开(公告)号:CN1757741A

    公开(公告)日:2006-04-12

    申请号:CN200510041030.8

    申请日:2005-07-11

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 鸡痘病毒表达载体p12-18及其构建方法,涉及一种有利于提高重组鸡痘病毒抵抗母源抗体干扰能力的鸡痘病毒表达载体,该载体以鸡痘病毒新鉴定的复制非必需区FPV1-2为外源基因插入位点,是一个含有鸡痘病毒复制非必需区侧翼区FPV1和FPV2的表达载体,FPV1的核苷酸长度为1863bp,FPV2的核苷酸长度为1554bp,重组鸡痘病毒疫苗具有较强的抵抗商品鸡所携带的母源抗体干扰的能力。

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