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公开(公告)号:CN103331147B
公开(公告)日:2014-10-15
申请号:CN201310285539.1
申请日:2013-07-08
Applicant: 大连理工大学
IPC: C12N15/62 , C12N1/21 , C07K14/735 , B01J20/24 , A61M1/38
Abstract: 本发明涉及一种用于特异性清除甲状旁腺激素的血液净化吸附剂的制备方法。该方法包括基因重组人甲状旁腺激素的表达与纯化,蛋鸡免疫与特异性IgY的获得,特异性IgY的固载及吸附剂效果的评价。本吸附剂由固相载体基质和特异性IgY配基两部分组成,能够有效吸附人血清中的甲状旁腺激素,且制备成本低,物理化学性质稳定,可作为血液净化装置的吸附填料用于甲状旁腺功能亢进患者血液中甲状旁腺激素的清除。
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公开(公告)号:CN102660569B
公开(公告)日:2013-11-06
申请号:CN201210119420.2
申请日:2012-04-21
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明公开一种重组人IgE受体蛋白的制备方法及应用,涉及生物工程领域和血液净化技术。其通过基因重组技术高表达与IgE有高结合力的受体FcεRIα-D2,纯化得到重组蛋白并将其作为一种吸附剂的配基,固定于固相载体上制备得的吸附剂可用于高亲和力结合IgE。本发明解决了血液净化技术去除IgE领域现有技术所存在的安全性低和成本较高的问题。在利用血液净化技术去除过敏反应病人血液中过量的IgE,治疗由IgE介导的过敏反应及IgE的纯化方面等方面有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN102676562A
公开(公告)日:2012-09-19
申请号:CN201210118134.4
申请日:2012-04-21
Applicant: 大连理工大学
IPC: C12N15/62 , C12N15/63 , C12N1/21 , C07K19/00 , C07K1/22 , C07K1/18 , B01J20/26 , B01D15/08 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开一种对抗体具有广谱吸附能力的融合蛋白制备方法及其应用,通过基因工程手段,经过PCR扩增,连接T载体,双酶切得到蛋白A和蛋白G免疫球蛋白结合区基因,然后一起连接到表达载体pET-23a上构成重组质粒,并转化E.coli BL21(DE3),诱导表达后得到大量含有融合蛋白AG的菌体。通过超声破碎、高温加热、沉淀DNA、弱阴离子交换层析和亲和层析纯化得到融合蛋白AG。该蛋白具有蛋白A和蛋白G的双重优点,结合谱更为广泛,且对血清中白蛋白等非免疫球蛋白物质非特异性吸附低。将该蛋白作为配基连接到固相载体基质上制成吸附剂,解决了蛋白A吸附剂对IgG3结合力弱的不足,可用于抗体纯化以及血液净化等领域。
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公开(公告)号:CN101921818A
公开(公告)日:2010-12-22
申请号:CN201010227290.5
申请日:2010-07-15
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明涉及一种生产重组蛋白A的方法,属于生物工程技术领域。本发明提供了利用一种基因工程菌进行高密度发酵表达重组蛋白A的工艺条件,以及利用以IgG的Fc片段为亲和配基的亲和层析一步法高纯度分离纯化重组蛋白A的方法。应用以上方法生产重组蛋白A,高密度发酵的重组菌体培养密度达到OD600nm=80-100,菌体干重40-50g/L,蛋白A表达量占菌体总蛋白的30-50%,每升菌液生产的蛋白A量最高达3g,SDS-PAGE及HPLC检测蛋白A纯度达95%以上。该方法具有生产量大,成本低,产品质量高等优点,为重组蛋白A的制备提供了一条切实可行的途径。
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公开(公告)号:CN101185880A
公开(公告)日:2008-05-28
申请号:CN200710012583.X
申请日:2007-08-22
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明涉及生物医学材料领域中一种用于抗体清除的血液净化吸附剂及其制备方法。血液净化吸附剂包括载体基质和配基两个部分,其中配基通过化学偶联固定在载体基质上,其特征在于采用苯甲酸分子作为血液净化吸附剂的固定化配基。血液净化吸附剂的制备方法是以琼脂糖等交联多糖作为载体基质,经过活化、接臂、偶联配基、后处理四个步骤制备此吸附剂材料。其优点在于:能够高载量地吸附血浆中的抗体组分,对血清白蛋白等其他血浆组分非特异性吸附有限,而且制备成本低、物理化学性质稳定。此材料可作为血液净化装置的吸附填料用于血浆中自身抗体和免疫复合物的清除。
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