一种益智来源的α-法尼烯合成酶AoFS及其应用

    公开(公告)号:CN118792290A

    公开(公告)日:2024-10-18

    申请号:CN202410988442.5

    申请日:2024-07-23

    Abstract: 本发明公开一种益智来源的α‑法尼烯合成酶AoFS及其应用,属于萜烯生物合成领域。本发明的α‑法尼烯合成酶AoFS的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,其可通过催化法尼基焦磷酸FPP底物合成主产物α‑法尼烯,通过GC‑MS鉴定出在发酵产物中含有倍半萜化合物α‑法尼烯,且其产量表明该α‑法尼烯合成酶的催化效果较佳。因此本发明能够实现α‑法尼烯在微生物细胞中的合成,有效降低生产成本,有利于α‑法尼烯的高效生产,为采用合成生物学方法异源制备萜烯化合物α‑法尼烯提供了技术支持。并且新的α‑法尼烯合成酶的挖掘有利于研究者在不同底盘菌株中选择最佳的α‑法尼烯合成酶从而高产α‑法尼烯。

    基于全细胞生物传感器的水溶性样品中重金属离子半定量检测方法

    公开(公告)号:CN114540390B

    公开(公告)日:2023-09-26

    申请号:CN202210085929.3

    申请日:2022-01-25

    Inventor: 李爽 马浩 朱晁谊

    Abstract: 本发明公开一种基于全细胞生物传感器的水溶性样品中重金属离子半定量检测方法,属于环境生物技术领域。该方法操作便利、耗时短、成本低、可视性好、易于定量。利用SRRz裂解基因作为报告元件,响应迅速,菌液在接触重金属2h内光密度明显下降。利用SRRz裂解基因作为报告元件,导致微生物菌体裂解,所得结果与Cd(II)离子浓度相关性较高,检测结果可实现裸眼判断,也可通过可见光分光光度计检测。利用X‑gal对释放到细胞外的β‑半乳糖苷酶进行检测,操作简便。该方法安全性好、无需添加试剂、不受色素干扰、耗时短成本低,具有特异性,易于实现高通量筛查,便于推广;可为重金属污染的日常检测和高通量筛查提供技术支持。

    一种PtRhPdIrAu/C贵金属高熵合金纳米颗粒及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN116604028A

    公开(公告)日:2023-08-18

    申请号:CN202310471158.6

    申请日:2023-04-27

    Abstract: 一种PtRhPdIrAu/C贵金属高熵合金纳米颗粒的制备方法,具体步骤如下:将铂前驱体、水合氯化铑、氯化钯、水合氯化铱和氯金酸混合后形成贵金属前驱体,将其溶于三乙二醇中形成前驱体溶液;将保护剂溶于三乙二醇,加热后滴加前驱体溶液并搅拌,随即冷却至室温,获得高熵合金纳米颗粒溶胶;将载体材料溶于乙醇后进行恒温超声处理和破碎处理,加入高熵合金纳米颗粒溶胶后再次进行破碎处理,依次进行搅拌、洗涤和干燥后得到产品。本发明还公开了一种PtRhPdIrAu/C贵金属高熵合金纳米颗粒。本发明方法合成的高熵合金纳米颗粒具有高的本征催化活性可加快乙醇氧化反应的动力学,纳米级的高熵合金具有大的表面积和高的稳定性。

    一种重组蓝铜肽前体-寡肽的高纯度制备方法

    公开(公告)号:CN112608933B

    公开(公告)日:2023-08-18

    申请号:CN202011639055.9

    申请日:2020-12-31

    Abstract: 本发明公开一种重组蓝铜肽前体‑寡肽的高纯度制备方法,涉及基因工程领域。该制备方法利用大肠杆菌合成重组多拷贝GHK串联短肽,及酶解法切割释放GHK单体以大量生产GHK单肽。该方法的关键在于(1)利用class‑IIS型限制性核酸内切酶在识别位点下游特定位置切割任意DNA序列的特点,实现短肽的多次串联延长;解决了基因工程表达短肽的低表达量的问题,具有降低生产成本、减轻化学合成中造成的环境负担的优势;(2)无需蛋白纯化柱,简单通过硫酸铵沉淀‑等电点沉淀结合的蛋白纯化方法,即可高效分离纯化酶切获得GHK单体;与GHK标准品具有相同的生物活性,且纯度高、成本低。

    氧化还原酶及其突变体在生物合成圆柚酮中的应用

    公开(公告)号:CN115927488A

    公开(公告)日:2023-04-07

    申请号:CN202210884935.5

    申请日:2021-12-13

    Abstract: 本发明公开一种氧化还原酶及其突变体在生物合成圆柚酮中的应用,属于生物工程技术领域。本发明首次从海洋嗜杀酵母(Wickerhamomyces anomalusM15)中获得对圆柚醇具有较高转化能力的氧化还原酶,通过定点突变获得了更高能力的氧化还原酶突变体。与现有的能够催化圆柚醇的氧化还原酶相比,该氧化还原酶及其突变体具有良好的底物耐受度、转化率高及高耐盐性。本发明所提供的氧化还原酶及其突变体,为体外酶催化方式合成圆柚酮提供了条件,实现以绿色、高效的方式催化圆柚醇合成圆柚酮产物。本发明将为圆柚酮的合成提供一种重要的工具酶,并为圆柚酮的合成工业带来巨大的经济效益。

    一种基于基因组位点精细调控基因表达的方法

    公开(公告)号:CN115896156A

    公开(公告)日:2023-04-04

    申请号:CN202110962577.0

    申请日:2021-08-20

    Abstract: 本发明公开一种基于基因组位点精细调控基因表达的方法,涉及基因技术领域。本发明中将基因元件或模块整合至酵母基因组相对于与游离型质粒相比,具有可精确控制拷贝数、稳定强、无需抗生素或其他化合物的添加以维持筛选压力等优点。同时基于特定基因组位点精细调控基因表达的应用可以更加精准、定量的调控目的基因的表达,使代谢途径得到更加精准的调控,尤其是分支点处的流量调节,可提高目标产物产量,防止某些基因过度表达给细胞带来的代谢负担。本发明还提供了利用基因组位点精细调控酿酒酵母发酵生产圆柚酮的具体应用。

    氧化还原酶作为圆柚醇脱氢酶在生物合成圆柚酮中的应用

    公开(公告)号:CN115449527A

    公开(公告)日:2022-12-09

    申请号:CN202111012112.5

    申请日:2021-08-31

    Abstract: 本发明公开一种氧化还原酶作为圆柚醇脱氢酶在生物合成圆柚酮中的应用,属于生物工程技术领域。该酶是来源于解脂耶氏酵母Yarrowia lipolyticaCLIB122的氧化还原酶YlADH_Bm6(其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示)及对应经修饰的氧化还原酶(其氨基酸序列如SEQ ID No.3),使用所述的氧化还原酶和经修饰的氧化还原酶,与其重组表达细胞,耐受底物浓度高,转化率高且反应条件温和;在圆柚酮的细胞发酵合成中也具有优秀的表现能力,获得了较高的圆柚酮产量。本发明所述圆柚酮制备方法,对环境友好,操作简便。因此本发明所述的氧化还原酶和经修饰的氧化还原酶具有很好的应用前景。

    一种具有快速同化甘露醇能力的酿酒酵母及其在生产萜类化合物中的应用

    公开(公告)号:CN114540209A

    公开(公告)日:2022-05-27

    申请号:CN202111581215.3

    申请日:2021-12-22

    Inventor: 李爽 朱晁谊 吴涛

    Abstract: 本发明公开一种具有快速同化甘露醇能力的酿酒酵母及其在生产萜类化合物中的应用,属于合成生物学及工业微生物学技术领域。该酿酒酵母为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BN9A,保藏编号:GDMCC No:62101。本发明通过适应性进化获得突变株BN9A,该突变株表现为酿酒酵母甘露醇代谢的天然阻遏被有效解除,甘露醇代谢相关的基因的转录水平提高50~420倍不等;可高效快速同化甘露醇,遗传稳定性好,产量性状稳定,应用于工业化发酵价值较高。本发明菌株可大大提高目标萜类化合物的产量及碳转化率,具有充足的乙酰辅酶A前体供应,是一株优秀的萜类化合物生产菌株。

    一种ε-己内酯高产菌株的高通量筛选方法

    公开(公告)号:CN114350739A

    公开(公告)日:2022-04-15

    申请号:CN202111658178.1

    申请日:2021-12-30

    Abstract: 本发明公开一种ε‑己内酯高产菌株的高通量筛选方法,属于高通量筛选技术领域。本发明将ADH和CHMO双酶级联反应产物ε‑己内酯的浓度与中间产物环己酮的浓度进行相关性分析发现,具有不同催化性能的菌株在全细胞催化反应后,中间产物环己酮浓度与产物ε‑己内酯浓度呈负相关关系,因此以环己酮为筛选标记,通过高通量筛选具有低环己酮浓度的菌株得到高产ε‑己内酯的菌株。本发明利用RBS工程技术构建ε‑己内酯产生菌的突变文库,筛选得到的七株突变菌株并进行摇瓶实验验证,催化70mM环己醇的ε‑己内酯产量,与出发菌株RCL0相比均获得显著提高。该方法操作步骤简单,可大幅降低菌株筛选过程的实验成本并缩短筛选周期。

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