公开(公告)号：CN116103249A

公开(公告)日：2023-05-12

申请号：CN202111321403.2

申请日：2021-11-09

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 李爽 ,  刘彤 ,  李文

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/81 ,  C12P7/26 ,  C12N15/53 ,  C12N1/19 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开一种瓦伦西亚烯氧化酶突变体及其在制备圆柚酮中的应用。本发明通过定点突变技术构建了HPO突变体的基因文库，通过静息细胞体外催化实验测定，在相同条件下，最优HPO突变体(HPO_G302G‑V480A‑V482A‑A484A，其氨基酸序列如SEQ ID No.4所示，其核苷酸序列如SEQ ID No.5所示)的催化效率是野生型催化效率的2.54倍，从而加大对底物的利用效率，提高目标化合物圆柚酮的产量。同时，本发明所述圆柚酮的生物制备方法，具有操作简便，对环境友好，反应条件温和等优点，具有很好的应用前景。此外，本发明也是第一个成功构建高产圆柚酮的HPO有益突变体的报道。

公开(公告)号：CN115449527A

公开(公告)日：2022-12-09

申请号：CN202111012112.5

申请日：2021-08-31

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 李爽 ,  李文 ,  刘彤 ,  朱晁谊

IPC: C12P7/26 ,  C12N9/02 ,  C12N15/53

Abstract: 本发明公开一种氧化还原酶作为圆柚醇脱氢酶在生物合成圆柚酮中的应用，属于生物工程技术领域。该酶是来源于解脂耶氏酵母Yarrowia lipolyticaCLIB122的氧化还原酶YlADH_Bm6(其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示)及对应经修饰的氧化还原酶(其氨基酸序列如SEQ ID No.3)，使用所述的氧化还原酶和经修饰的氧化还原酶，与其重组表达细胞，耐受底物浓度高，转化率高且反应条件温和；在圆柚酮的细胞发酵合成中也具有优秀的表现能力，获得了较高的圆柚酮产量。本发明所述圆柚酮制备方法，对环境友好，操作简便。因此本发明所述的氧化还原酶和经修饰的氧化还原酶具有很好的应用前景。