-
公开(公告)号:CN106442986B
公开(公告)日:2018-05-18
申请号:CN201610837384.1
申请日:2016-09-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一种检测区域性猪流感病毒亚型分布的方法,属于动物卫生检测技术领域,其特征在于,包括以下步骤:首先采集血清样品,采用“胰酶‑高铁酸钠‑过氧化氢‑聚乙二醇”方法处理血清样品,去除其中的非特异性凝血因子,得待检血清;采用倍比稀释的方法确定4个血凝单位的抗原浓度;在V型微量反应板上使待检血清、待检抗原和鸡红细胞悬液发生反应,以完全抑制4个血凝单位待检抗原的待检血清的最高稀释倍数作为血清抗体的效价,确定血清抗体效价为阳性的待检血清。本发明所述方法简单有效,成本低,可用于对数量较多的血清样品进行阳性率分析,为动物疾病治疗与预防奠定基础。
-
公开(公告)号:CN106749553A
公开(公告)日:2017-05-31
申请号:CN201611015852.3
申请日:2016-11-18
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/11 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/543 , C09K11/06 , C12R1/19
CPC classification number: C07K14/005 , C09K11/06 , C09K2211/14 , C12N15/70 , C12N2760/16122 , C12N2800/101 , G01N33/54313 , G01N33/56983
Abstract: 本发明首先提供了猪流感病毒的血凝素重组蛋白的制备方法,通过去除HA的信号肽。根据HA序列设计一对带有HIS标签的引物,构建了带有6*His‑麦芽糖结合蛋白(MBP)组合标签的原核表达质粒。在大肠杆菌表达系统中成功获得以可溶形式表达的HA重组蛋白。该蛋白能够与H1N1亚型猪流感病毒HA鼠源抗体发生反应,说明了HA重组蛋白具有良好的抗原性,利用该凝素重组蛋白建立液相芯片检测技术,灵敏度比ELISA高,该方法的建立,将为开展猪流感病毒抗体的检测提供必要的技术补充,为其它疫病抗体液相芯片检测技术的研究奠定技术基础,为多种猪病抗体多重液相芯片检测技术的建立提供试验依据。
-
公开(公告)号:CN101358247A
公开(公告)日:2009-02-04
申请号:CN200810198528.9
申请日:2008-09-16
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种I型鸭肝炎病毒的分子生物学鉴别方法,包括处理待检样品、制取样品的RNA、反转录得到样品的cDNA、荧光定量RT-PCR或巢式PCR法鉴定I型鸭肝炎病毒等步骤。本发明具有诊断快速、灵敏性高、且适用范围广的有益效果,可用于从组织样品、棉拭子、鸭或鸡胚尿囊液或细胞培养物中均可鉴定DHV-1。
-
公开(公告)号:CN119139464A
公开(公告)日:2024-12-17
申请号:CN202411321198.3
申请日:2024-09-20
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心) , 华南农业大学 , 金宇保灵生物药品有限公司
Abstract: 本发明公开了一种重组非洲猪瘟弱毒疫苗及其制备方法和应用,涉及生物技术领域,疫苗包括促凋亡基序缺失的p54蛋白,由E183L基因编码,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;缺失的促凋亡基序为ASFV GZ分离株全基因组序列162311‑162355和162251‑162355的核苷酸序列;其制备方法为:构建同源重组载体和重组病毒ASFV‑p54△DBM和ASFV‑p54△CTM;该疫苗应用于预防非洲猪瘟。本发明筛选出了p54蛋白发挥促凋亡功能的关键基序,构建获得了一种p54蛋白促凋亡基序敲除的重组ASFV对家猪的致病力显著降低,能够促进宿主免疫反应,诱导高水平抗体。
-
公开(公告)号:CN115877015B
公开(公告)日:2023-08-15
申请号:CN202310037654.0
申请日:2023-01-09
Applicant: 华南农业大学 , 金河佑本生物制品有限公司
IPC: G01N33/68 , G01N21/64 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/12 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种监测悬浮培养杆状病毒表达系统抗原表达量的方法。属于疫苗生产过程控制技术领域。包括首先确定目的蛋白表达量达到目标标准时的阳性细胞比率,作为在生产中监测抗原含量合格时的标准,然后在实际生产中从接毒后第2天开始对悬浮培养细胞每隔24小时取样检测阳性细胞比率,当阳性细胞比率达到抗原合格的标准时即可停止取样检测。本发明可以相对实时监测悬浮培养工艺杆状病毒表达系统中目的蛋白表达过程,并提前确定当前批次细胞悬液的目的蛋白含量能否合格,便于进行后序的操作,有利于生产过程的控制,降低生产成本。对所有用悬浮细胞进行杆状病毒培养表达蛋白的工艺均可适用,在生产实践中具有非常大的指导意义。
-
公开(公告)号:CN115877015A
公开(公告)日:2023-03-31
申请号:CN202310037654.0
申请日:2023-01-09
Applicant: 华南农业大学 , 金河佑本生物制品有限公司
IPC: G01N33/68 , G01N21/64 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/12 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种监测悬浮培养杆状病毒表达系统抗原表达量的方法。属于疫苗生产过程控制技术领域。包括首先确定目的蛋白表达量达到目标标准时的阳性细胞比率,作为在生产中监测抗原含量合格时的标准,然后在实际生产中从接毒后第2天开始对悬浮培养细胞每隔24小时取样检测阳性细胞比率,当阳性细胞比率达到抗原合格的标准时即可停止取样检测。本发明可以相对实时监测悬浮培养工艺杆状病毒表达系统中目的蛋白表达过程,并提前确定当前批次细胞悬液的目的蛋白含量能否合格,便于进行后序的操作,有利于生产过程的控制,降低生产成本。对所有用悬浮细胞进行杆状病毒培养表达蛋白的工艺均可适用,在生产实践中具有非常大的指导意义。
-
公开(公告)号:CN114395643A
公开(公告)日:2022-04-26
申请号:CN202210156886.3
申请日:2022-02-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及病毒检测领域,尤其涉及非洲猪瘟病毒的双通道数字PCR检测试剂盒及方法。本发明提供了非洲猪瘟病毒的双通道微滴数字PCR检测试剂盒及方法,可以检测到多种不同类型的毒株,并鉴别其是否为EP402R缺失株。此外,本发明提供的产品具有良好的特异性和灵敏度:在几种常见猪病病毒中仅扩增非洲猪瘟病毒、对pMD18T‑EP402R和pMD18T‑B646L质粒的最低检测限分别低至0.43copies/μL和2.6copies/μL。因此本发明有潜力准确检测非洲猪瘟病毒的隐性感染,可以应用于临床和生产中该猪瘟病毒特别是EP402R基因缺失株快速检测。
-
公开(公告)号:CN106632618B
公开(公告)日:2020-12-11
申请号:CN201611015845.3
申请日:2016-11-18
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/08 , C12N15/70 , G01N33/533 , G01N33/543 , G01N33/569
Abstract: 本发明以表达HEV ORF2 C段第337个到第645个氨基酸片段的核苷酸序列为目的片段,利用引物扩增该目的片段;连接pMAL‑c5X载体,获得pMAL‑c5X‑ORF2重组质粒,原核表达获得重组蛋白。该蛋白能与猪戊型肝炎病毒抗体发生反应,利用该蛋白建立液相芯片检测技术,对猪常见的其他疾病阳性血清无交叉反应,其批内、批间变异系数分别为5%、6.6%。对102份临床血清样本检测结果显示,该方法与商品化ELISA试剂盒符合率为93.1%,关联性卡方检验显示两个方法具有一致性(P
-
公开(公告)号:CN110100751A
公开(公告)日:2019-08-09
申请号:CN201910260952.X
申请日:2019-04-02
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于牲畜养殖技术领域,提供了一种智能喂料与清洗系统。本发明包括圈舍和对应圈舍设置的料槽,包括如下:信息采集与处理单元:对圈舍料槽环境及牲畜状态进行信息采集并分析得出投料量和清洗结论,向料量控制与投喂单元发送投料量的信号,向料槽与辅助清洗单元发送清洗的信号;料量投喂单元:根据信息采集与处理单元发送的投料量信号向料槽投喂饲料;料槽清洗单元:根据信息采集与处理单元发送的清洗信号对料槽进行清洗,实现了对牲畜每个个体差异化的进行喂养,以最大程度的激发牲畜的成长潜力的技术效果。
-
公开(公告)号:CN109777890A
公开(公告)日:2019-05-21
申请号:CN201910064482.X
申请日:2019-01-23
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , G01N33/569 , C12N15/70 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种PCV2、CSFV IgG抗体双重荧光微球免疫学检测方法。2型猪圆环病毒Cap基因片段和猪瘟病毒E2基因片段,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1~2所示,其编码的重组蛋白作为抗原分别与羧基化荧光微球偶联并建立了双重FMIA检测方法。本检测方法速度快、特异性强、敏感度高;E2抗体和Cap抗体检测方法的重复性好,与其他常见猪病毒病阳性血清无交叉反应,灵敏度高、特异性强;与商业化ELISA试剂盒相比,灵敏度更高。该方法可同时用于猪瘟病毒和圆环2型病毒感染猪的快速鉴别诊断及保护性抗体的检测,为进一步建立猪病毒病抗体多重检测方法奠定了实验基础,为其他动物疫病抗体的新型血清学诊断技术的建立提供了思路。
-
-
-
-
-
-
-
-
-