检测微小隐孢子虫的直接免疫荧光试剂、试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN116068177A

    公开(公告)日:2023-05-05

    申请号:CN202310034659.8

    申请日:2023-01-10

    Abstract: 本发明公开了一种检测微小隐孢子虫的直接免疫荧光试剂、试剂盒及其应用,属于生物技术领域。本发明通过利用微小隐孢子虫全虫蛋白作为抗原,采用杂交瘤细胞单克隆抗体技术制备获得抗微小隐孢子虫的单克隆抗体;用荧光染料标记步骤S1所得抗微小隐孢子虫的单克隆抗体,即获得检测微小隐孢子虫的直接免疫荧光检测试剂。应用本发明试剂建立的直接免疫荧光检测方法,可用于临床粪便样本及环境中微小隐孢子虫的检测及鉴定,且敏感性高、特异性强、稳定性好、诊断速度快,具有良好的应用前景。

    一种IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠的扩繁方法及其应用

    公开(公告)号:CN111820185A

    公开(公告)日:2020-10-27

    申请号:CN202010712347.4

    申请日:2020-07-22

    Abstract: 本发明公开了一种IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠的扩繁方法及其应用,所述扩繁方法为先将购买的IFN–γ基因缺陷杂合子交配,再将其子代中的纯合子和杂合子进行交配,再将子代中的雄性和雌性纯合子交配即可获得大量IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠,实现IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠的扩繁,同时获得的IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠较直接购买的IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠体质正常,可更好用于隐孢子虫体外感染模型建立,极低剂量即可造成快速、慢性感染,且过程中小鼠死亡率低,可以满足隐孢子虫感染需要较长研究周期的要求。而且扩繁后获得的FN–γ基因缺陷纯合子小鼠可再直接纯纯交配产后代,实现大量扩繁,无需再经过复杂的纯杂交配。

    一种用于卡耶塔环孢子虫快速分型和溯源的定量PCR方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN109136386A

    公开(公告)日:2019-01-04

    申请号:CN201810828293.0

    申请日:2018-07-25

    CPC classification number: C12Q1/6888 C12Q1/6851 C12Q2531/113 C12Q2563/107

    Abstract: 本发明公开了一种对卡耶塔环孢子虫进行快速分型和溯源的定量PCR方法,采用卡耶塔环孢子虫线粒体基因组不同拷贝间的多态性连接区域作为遗传标记,设计了特异性的定量PCR引物,包含上游引物Cyc‑Mito‑F1和下游引物Cyc‑Mito‑R1,其核苷酸序列依次如SEQ ID NO:1~2所示。本发明方法克服了现有的卡耶塔环孢子虫单位点分子诊断工具无法对该病原进行精细分型的缺点,而且扩增效率比现有的单位点分子诊断工具高;本发明采用卡耶塔环孢子虫线粒体基因组上的单个位点定量PCR和熔解曲线分析就可进行快速的基因型区分和溯源,克服了现有的卡耶塔环孢子虫多位点序列分型工具中因需要对多个位点扩增和测序所导致的分型耗时长、成本高的缺点,具有较大的应用前景。

    利用发光菌连续培养进行水质监测的方法及装置

    公开(公告)号:CN104792770A

    公开(公告)日:2015-07-22

    申请号:CN201510173288.7

    申请日:2015-04-13

    Abstract: 本发明公开了一种利用发光菌连续培养进行水质监测的方法及装置,所述的装置,包括发光菌培养系统、反应系统和检测系统;所述的发光菌培养系统包括设有搅拌装置的发酵罐、废液槽和补料槽;所述的发酵罐的进液口通过补料泵与补料槽相连接,排液口通过排液泵与废液槽相连接,采样口通过采样泵与反应系统的入口相连接,反应系统的出口与废液槽相连接;所述的检测系统包裹在所述的反应系统四周。本发明的装置结构简单,成本低廉,操作方便,维护简单,能实现水质连续自动化急性毒性监测,而且灵敏度与国标的发光细菌法相当,极大的简化监测步骤。能够为突发环境事故提供预警及时的采取相应措施,保障水质安全。

    明亮发光杆菌冻干粉及其制备方法

    公开(公告)号:CN104762209B

    公开(公告)日:2017-12-29

    申请号:CN201510144197.0

    申请日:2015-03-30

    Abstract: 本发明公开了一种明亮发光杆菌冻干粉及其制备方法,所述明亮发光杆菌冻干粉,包括如下重量百分比的组分:脱脂乳25~35%,海藻糖20~24%,精氨酸0.7~1.0%,氯化钠1~1.5%,菌体余量。本发明采用复合冷冻保护剂,试验证明,其抗冻能力大大提高,具有比单一的保护剂更强的保护性能,且具有很好的稳定性。本发明获得的明亮发光杆菌冻干粉,其发光度平均值为1843mv左右,接近模型预期值1820mv。并用制备的冻干粉对ZnSO4·7H2O、K2Cr2O7和C6H5OH的毒性进行检测,发现不同批次间的冻干粉测得的EC50值变异系数均小于6%。

    一种城市污水中隐孢子虫、贾第虫的快速检测及溯源方法

    公开(公告)号:CN107177692A

    公开(公告)日:2017-09-19

    申请号:CN201710589277.6

    申请日:2017-07-19

    Abstract: 本发明提供一种城市污水中隐孢子虫、贾第虫的快速检测及溯源方法,所述方法包括以下步骤:1)采集适量城市污水,静置一定时间后,弃去上层污水,收集下层污水;2)重复步骤1)至一定水样总量;3)将收集到的水样离心,收集沉淀;4)提取所述沉淀中的DNA;5)对提取到的DNA进行PCR并测序,以检测该城市污水中的隐孢子虫和贾第虫;以及6)将步骤5)中得到的序列与GenBank中的序列进行比对,确定其虫种或基因型。本发明采用将污水离心沉淀后PCR的方法,提供了一种样本体积需求小、操作简便、结果准确、定种溯源效果理想、成本低廉的城市污水中隐孢子虫、贾第虫的快速检测及溯源方法。

    明亮发光杆菌冻干粉及其制备方法

    公开(公告)号:CN104762209A

    公开(公告)日:2015-07-08

    申请号:CN201510144197.0

    申请日:2015-03-30

    CPC classification number: C12N1/04 C12N1/20

    Abstract: 本发明公开了一种明亮发光杆菌冻干粉及其制备方法,所述明亮发光杆菌冻干粉,包括如下重量百分比的组分:脱脂乳25~35%,海藻糖20~24%,精氨酸0.7~1.0%,氯化钠1~1.5%,菌体余量。本发明采用复合冷冻保护剂,试验证明,其抗冻能力大大提高,具有比单一的保护剂更强的保护性能,且具有很好的稳定性。本发明获得的明亮发光杆菌冻干粉,其发光度平均值为1843mv左右,接近模型预期值1820mv。并用制备的冻干粉对ZnSO4·7H2O、K2Cr2O7和C6H5OH的毒性进行检测,发现不同批次间的冻干粉测得的EC50值变异系数均小于6%。

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